白消安注射法建立昆明小鼠精原干细胞移植受体模型

【目的】 通过对6周龄昆明小鼠腹腔内单次注射不同剂量的白消安来制作精原干细胞移植受体模型。【方法】将104只昆明小鼠随机分成4组，分别注射0（对照组，注射等量的白消安溶解液二甲基亚砜（DMSO），10，20和30 mg/kg白消安，于注射白消安后5，7，9，11和13周记录小鼠的死亡数、小鼠睾丸外观体积、小鼠睾丸质量和小鼠体质量，计算睾丸指数；通过组织学观察注射不同剂量白消安后小鼠曲细精管精子恢复情况，并检测受体小鼠血液中红细胞和白细胞数量的变化。【结果】 注射0（对照组），10，20和30 mg/kg白消安13周后，小鼠死亡率分别为0（0/22），11.54%（3/26），17.86%（5/28）和89.29%（25/28）。10 mg/kg白消安组小鼠的睾丸指数在注射后5，7和9周显著小于对照组（P＜0.05），而在注射后11和13周，与对照组差异不显著（P＞0.05）；在注射后不同时间，对照组和10和20 mg/kg白消安组的睾丸指数均显著高于20 mg/kg白消安组（P＜0.05）。在注射白消安5，7，9，11和13周后，对照组曲细精管上皮无变化；10和20 mg/kg白消安组有完整精子发生的曲细精管占总曲细精管的百分比分别为（49.56±8.23）%，（66.61±6.13）%，（80.24±10.42）%，（93.87±3.23）%，（92.49±4.58）%；（8.73±9.22）%，（9.89±6.39）%，（29.21±12.31）%，（49.64±3.59）% 和（81.99±4.98）%。受体小鼠红细胞和白细胞数量均随着处理时间及白消安处理剂量的变化而变化。【结论】腹腔内注射20 mg/kg白消安小鼠的死亡率、睾丸指数均较低，中空的曲细精管数量多，且恢复较慢，适于做精原干细胞移植的受体，合适的移植时间是白消安处理后5～7周。

Ghrelin对小鼠不同来源胚胎体外发育的影响及其受体的表达模式

为探明Ghrelin及其受体Ghsr-1a在早期胚胎发育中的作用,以小鼠体内受精、体外受精和孤雌激活胚胎为研究对象,在其体外发育过程中添加不同浓度Ghrelin,观察胚胎发育效率;通过免疫荧光染色和荧光定量PCR,观察不同时期胚胎中Ghsr-1a的变化。结果表明,体内受精胚体外发育中添加0.1 ng/m L Ghrelin显著降低了囊胚率(P<0.05),添加1 ng/m L的Ghrelin显著降低了小鼠体外受精胚的囊胚率(P<0.05)。在体内受精胎中,Ghsr-1a的mRNA表达水平在4细胞显著高于其他时期(P<0.05);体外受精胚中,Ghsr-1a的mRNA水平在8细胞前无明显差异,桑椹胚和囊胚显著下降(P<0.05)。在孤雌激活胚胎中,Ghsr-1a的mRNA表达水平从2细胞到8细胞显著降低,之后到囊胚期开始显著升高,其蛋白表达模式与mRNA表达模式相反。Ghsr-1a在体内受精和体外受精胚胎中的表达相似,囊胚期表达量最低。结果提示,Ghrelin能够抑制体内和体外受精胚的体外发育,不同来源胚胎Ghsr-1a mRNA和蛋白表达模式均不相同。研究结果为进一步探索Ghrelin在胚胎发育中的作用机制提供了试验基础。