组合微生物利用发酵秸秆产乳酸效果的研究

为了更好的利用玉米芯、玉米秸秆等农业废弃物,提高其综合利用率,减少传统化学方法及秸秆焚烧过程造成的环境污染,试验采用里氏木霉与鸡腿菇混合发酵产粗酶液降解秸秆等废弃物,再利用米根霉将废弃物转化为乳酸。此试验中以商品纤维素酶处理的玉米芯及秸秆为对照进行乳酸发酵试验。鸡腿菇与里氏木霉按5∶2的接种比例,接种时间间隔为12 h,在26℃,150 r/min培养3 d,此时漆酶酶活比鸡腿菇单独发酵酶活提高106%。用以上两菌混合发酵3 d的粗酶液在50℃,pH 5.0,120 r/min下酶解原材料84 h,酶解得率为55.2%,米根霉再转化酶水解液产乳酸量为3.69 g/L,糖酸转化率为67.40%。

安徽省万佛山地区虫草资源的初步调查

通过对万佛山自然保护区的多次野外采集和调查,研究发现万佛山地区分布的虫草分属6个种,分别为丝虫草Ophiocordyceps filiformis、珊瑚虫草Cordyceps martialis、粉被虫草C.pruinosa、下垂虫草O.nutans、亚黄蜂虫草O.oxycephala和莲状虫草C.nelumboides。其中下垂虫草和丝虫草最多,分别占总数的28%和23%。虫草的寄主涉及到鳞翅目的幼虫和茧、蜂的成虫、蜘蛛和蝽象,而主要寄主为鳞翅目的幼虫,占总数的58%。莲状虫草为中国大陆新记录种,此前仅在日本和中国台湾省有过报道。

安徽省合肥市杨树害虫与天敌结构及动态研究

通过对合肥地区杨树害虫与天敌的抽样调查,共查得杨树害虫36种,分属于昆虫纲7目22科,自然天敌22种,分属于昆虫纲5目10科和蛛形纲1目6科。主要害虫类群为舟蛾科、跳甲科、网蝽科、蟋蟀科和刺蛾科,主要天敌类群为茧蜂科、草蛉科、寄蝇科、微蛛科和肖蛛科。杨树害虫和天敌的物种丰富度全年的动态变化基本一致,均表现为低-高-低-高-低的变化格局。害虫和天敌的物种多样性指数年动态变趋势化基本一致,表现为春季物种多样性指数低,5月开始显著升高,害虫的物种多样性指数延续至8月、天敌的物种多样性指数延续至10月维持在较高的水平上。天敌群落对害虫群落有明显的追随联系。

白僵菌生物防治林中马尾松毛虫天敌昆虫群落调查

通过对多年应用接种式放菌的林地进行马尾松毛虫天敌昆虫群落调查发现,林区内存在着丰富的松毛虫天敌昆虫群落,其中以松毛虫幼虫期最为丰富,种类最高可达9种;卵期次之,可达4种;蛹期1种。在天敌昆虫群落结构最丰富时,可在林间同时出现13种松毛虫天敌昆虫。天敌昆虫群落呈现出时序变化的特征。与对照区相比,接种式放菌对天敌昆虫影响小,能持续控制松毛虫的发生。

防治假眼小绿叶蝉的虫生真菌高毒菌株的筛选及田间防治效果

茶小绿叶蝉Empoasca spp.是我国最重要的茶树害虫,几乎对所有化学农药都产生了很高的抗药性,亟需开发经济有效的生物农药。本研究通过对从茶小绿叶蝉上分离的1株爪哇棒束孢Isaria javanicus和4株自其它叶蝉上分离的球孢白僵菌Beauveria bassiana的胞外蛋白酶活性测定,初选出活性较高的爪哇棒束孢和两株球孢白僵菌;对假眼小绿叶蝉低龄若虫的生物测定结果显示,爪哇棒束孢毒力最强,分别比两株球孢白僵菌高2.33～7.26倍和6.08～27.26倍,在1×108孢子mL 1浓度条件下第13 d的致死率达100%,LT50为5.9 d。通过随机区组设计进行的田间防治试验结果表明,使用爪哇棒束孢菌株配制的IJOD-1悬乳剂以7.5×1013孢子hm 2的剂量常量喷施,对假眼小绿叶蝉虫口的防治效果在第11 d时为50.32%;第25 d时追加1次放菌,在第55 d时的防治效果达68.40%。

粉拟青霉不同菌株生物学特性的研究

比较了15株来自不同地域和寄主的粉拟青霉生物学特性,明确了它们在产孢量、生长速度、抗旱能力、抗紫外能力以及产胞外蛋白酶等方面的差异.结果表明,粉拟青霉菌落生长和产生孢子的最适温度为20℃.在此温度下,24 h孢子萌发率在80%～100%之间;此外不同菌株的抗旱力差异较大,Pf20抗旱能力最强,而Pf127的抗旱能力最弱.经紫外线照射5 min,菌株的萌发率在44%～81%范围内;不同菌株的产胞外蛋白酶水平差异较大,以Pf96最高,高达2.3.

金龟子绿僵菌无纺布菌剂与引诱剂结合使用防治短角幽天牛的试验

通过不同方式应用金龟子绿僵菌无纺布菌剂与引诱剂结合防治短角幽天牛。在诱捕器中接触无纺布菌条的天牛(处理3)感染率达70.0%,而罩笼试验表明,处理1和处理2通过气传分生孢子的扩散所造成的感染率达35.0%以上,均与对照差异显著。将各处理诱捕回收的天牛在室内饲养,接触过菌条的处理3侵染率达63.3%,而处理1和处理2天牛的感染率分别为48.7%和53.1%,均与对照差异显著。结果显示了绿僵菌无纺布菌条与引诱剂结合防治短角幽天牛具较大潜力。

利用白僵菌防治松褐天牛的试验研究

通过生物测定筛选出对松褐天牛毒力较高的菌株Bb202,用该菌株生产白僵菌无纺布菌条和高孢粉用于野外防治松褐天牛,结果表明,防治后松褐天牛的虫株率下降了0.9%,下降幅度达31.1%;无纺布菌条处理区解剖木中的幼虫死亡率为61.8%,高孢粉处理区为52.5%,对照区为45.6%。挂笼试验中,无纺布菌条处理区解剖木的幼虫死亡率为41.9%,高孢粉处理区为62.0%,对照区为32.3%,说明用白僵菌防治松褐天牛有一定的效果。

球孢白僵菌无纺布菌剂与引诱剂联合防治松褐天牛初报

在宣城地区利用引诱剂(M99-1)诱捕松褐天牛成虫,结果表明,7月12-8月1是松褐天牛的危害高峰期。使用不同诱集方法与球孢白僵菌无纺布菌条联合应用,通过多指标分析显示,白僵菌对松褐天牛具有显著的抑制效果,其中以诱芯与白僵菌无纺布菌条联合使用的效果最佳:感染率52.1%,刻槽抑制率39.13%,寿命抑制率40.1%,侵入孔数下降7.75%,幼虫数下降12.43%。

安徽西南部家蚕白僵病病源及传播途径追踪

【目的】明确安徽西南部家蚕白僵病菌株来源和传播途径,控制蚕病流行。【方法】利用ISSR分子标记对安徽西南潜山的病蚕、蚕室及其周边桑园、农田及松林的70株球孢白僵菌进行聚类分析和三维主坐标分析。【结果】该地区的球孢白僵菌为优势性明显的异质种群;6个类群中仅主病源第II-1类群和次病源第IV类群引起家蚕的地方性白僵病,与用于防治松毛虫的菌株及在附近松毛虫种群中自然流行的土著菌株关系较远。生物测定表明,使用松毛虫分离株使家蚕死亡25%的LC25、LD25和LT25分别为使用家蚕分离株使家蚕死亡75%的LC75、LD75和LT75的1 327、1 378和1.5倍。【结论】鉴于松毛虫分离株明显的寄主专化性,在该蚕区使用由这类菌株研制的白僵菌杀虫剂防治松毛虫对蚕业是相对较为安全的。另外,当年夏秋季蚕室附近螳螂种群的白僵病大流行与家蚕白僵病无关。

用于防治假眼小绿叶蝉的爪哇棒束孢可湿性粉剂的研制

由于对刺吸式口器昆虫的独特侵染方式，真菌杀虫剂对防治茶树重要害虫假眼小绿叶蝉极具潜力，但迄今产品极少。本研究研制出对该叶蝉有高毒力的爪哇棒束孢可湿性粉剂，筛选出的助剂对孢子活力均无显著影响，物理性状为最佳。从4种载体中筛选出入水3～5 s即湿润的惰性载体海泡石，从12种湿润剂中筛选出湿润时间仅3 s的湿润剂A，从7种分散剂中筛选出悬浮率达94.9%的分散剂B，以及从2种紫外保护剂中筛选出对孢子保护率可达76.2%的荧光素钠。最后确定的配方为分生孢子粉（1011孢子/g）10%，湿润剂A 3%，分散剂B 5%，紫外保护剂荧光素钠1%，抗氧化剂C 0.5%，以海泡石作为载体补足到100%。该剂型在室温下储藏7个月后，孢子的萌发率仍达55.7%，极显著高于未制剂的分生孢子的4.9%。室内生物测定结果显示制剂对假眼小绿叶蝉的侵染死亡率达到100%。

一株利用生物柴油废水产氢的光合菌的筛选、鉴定

从37株光合细菌中筛选出1株能够利用甘油做碳源进行有效产氢的菌株(DB803).根据该菌株的形态、生理生化特征、16SrDNA序列和ERIC-PCR结果分析,初步鉴定该菌株为类球红细菌(Rhodobacter sphaeroides).研究了该菌株在30℃,4000lx光照厌氧条件下利用不同浓度的生物柴油废水产氢的能力,当培养基起始COD浓度为11.5g/L时,其在对数生长期平均产氢速度为38mL/(L·h),同时,废水COD去除率达91.2%.

安徽大别山区绿僵菌属物种多样性

绿僵菌是一类常见且极具应用价值的生物防治材料。目前绿僵菌分类系统取得了突破性的进展,然而新分类系统在国内尚未普遍采用。本文用该系统研究了近年来分离自大别山区僵虫的21株绿僵菌的物种多样性。在对大别山绿僵菌菌株的形态学研究基础上;对其转录延长因子(EF-1a)进行了进一步的PCR扩增、测序和同源性分析,并选用MEGA软件依据简约法构建EF-1a系统发育树。结果表明,21株菌株在新系统中分别属于5个种,即贵州绿僵菌、大孢绿僵菌、蚱蜢绿僵菌、黄绿绿僵菌瘿绵蚜变种和棕色绿僵菌,并对中国新纪录棕色绿僵菌进行了形态学的描述。该研究基本明确了大别山区的绿僵菌物种多样性,为生物防治菌株提供了科学鉴定方法和丰富种质资源。

台湾柄天牛生物学习性及危害特性

台湾柄天牛是黄山风景区近年来危害壳斗科植物最为严重的蛀干害虫之一。该天牛在黄山风景区2a发生1代,以幼虫在寄主枝干木质部内越冬,成虫5月下旬开始羽化,6月中、下旬为羽化盛期,7月上旬开始产卵,7月中旬孵化为幼虫。台湾柄天牛在黄山风景区的寄主分布广、自然条件适宜、种群密度大、生活隐蔽,致使其在黄山风景区分布范围迅速扩大,给景区的森林植被造成了较大的破坏。建议采用清理枯死木和生物防治等多种方法加以防治。

我国利用真菌防治害虫的历史、进展及现状

我国利用虫生真菌防治害虫起步较晚,始于20世纪50年代,迄今只有约60年历史。经过1969年在广东省新会县召开的南方8省(区)利用白僵菌防治松毛虫现场交流会以及2002年"杀蝗绿僵菌油悬浮剂"获农业部农药检定所登记这两个里程碑式的事件,我国不仅建立了世界生产规模最大而且技术先进的真菌杀虫剂产业以及形成以利用球孢白僵菌防治马尾松毛虫和玉米螟为代表的世界最大规模的成功的生物防治项目,而且在虫生真菌的分类学、病理生物学、遗传育种以及生态学等研究领域全面地赶上了国际先进水平,在分子致病机制、基因工程以及基因组学等方面还取得了举世瞩目的研究成果。本文综述了我国利用真菌防治害虫近60年的发展历史,介绍了近年来在细胞核及线粒体变异和菌种退化、分子致病机制、基因工程、比较基因组学、遗传多样性、利用真菌持续控制害虫的生态机制、真菌杀虫剂应用效果的精确评价以及真菌流行病的溯源等领域的研究进展及现状。

一株分离自德国小蠊的贵州绿僵菌的鉴定及生物学特性

从安徽省宣城市麻姑山林场采集到自然罹病的德国小蠊僵虫,通过分离纯化获得一株绿僵菌RCEF6416,采用显微形态和分子生物学相结合方法将该菌株鉴定为贵州绿僵菌。本试验研究了在不同培养基、盐浓度、pH以及高温胁迫等条件下,该菌株的培养特征及产孢能力,以期为世界性卫生害虫德国小蠊的生物防治提供种质资源和理论依据。结果表明:该菌株在PPDA培养基上的生长速度较快,菌落直径平均日增量为4.94 mm/d,但在PDA培养基上产孢量最大,为5.1×10^(7)孢子/cm^(2);在一定范围内,随着盐浓度增加菌落直径日增量增加,但是产孢量逐渐下降,且菌落逐渐产生白色菌丝圈;当pH为8时,菌株生长速度最快,产孢量最大;高温对菌株孢子萌发率影响很大,当水浴温度为45℃处理4 h后,其孢子萌发率仅为2.6%。

安徽合肥地区杨树林节肢动物群落结构变化规律研究

为分析杨树林节肢动物群落结构动态变化规律,在对安徽合肥杨树林系统调查的基础上,分别用通径分析、聚类分析和最优分割等方法进行了分析。结果表明,群落中均匀度J与多样性H'关系密切,物种数S、优势集中性C和物种丰富度R是影响群落多样性的重要因素。全年13次调查结果可将群落聚为5类,D为1.474 1,反映出群落的变化状况,聚类交替现象则反映出群落在较长时间内的复杂性。将群落结构按1年中的时间顺序分割为4段(3～4月、5～8月、9～10月、11～12月),反映了群落结构的季节性变化规律。

球孢白僵菌tps2基因的克隆和生物信息学分析

运用SMART RACE RT-PCR技术与DNA步移技术,首次从球孢白僵菌中克隆出完整的海藻糖-6-磷酸磷酸酯酶TPS2的基因编码区序列及上游序列。该基因cDNA全长3 219 bp,其中开放阅读框(ORF)2 619 bp,编码872个氨基酸。成熟蛋白理论分子量为97.8 kD,理论等电点为6.32。编码框结构基因的全长为2 821 bp,有两个长度分别为140 bp和62 bp的内含子。分析表明,上游序列中含有TATA-box、CAAT-box和GC-box,并且也存在GATA元件等启动子顺式调控元件。本文结果将为进一步研究海藻糖在虫生真菌中的生理合成以及抗逆调控机制奠定坚实的基础。

昆虫病原真菌对梨网蝽防治潜力的室内评测

梨网蝽Stephanitis nashi是多种果树和园林植物上的重要害虫,在长江流域、华北地区为害严重。梨网蝽发生世代多,易产生抗药性,筛选出能替代化学农药的生物控制因子,是对梨网蝽实现有效可持续控制的重要手段。本文通过菌株筛选平台,挑选出产孢较好的15株昆虫病原真菌,用喷雾法测定其对梨网蝽成虫和若虫致病力的差异。在1.0×106孢子/m L孢子悬浮液接种后,菌株Bb2359等6株球孢白僵菌和1株金龟子绿僵菌Ma67对梨网蝽成、若虫累积死亡率均达到100%,其中菌株Bb2352、Bb2359、Bb2372等对成虫的LT50小于4 d,而菌株Bb2352、Bb2359、Ma67对2龄若虫的LT50均在5 d以内,LT50显示菌株对成虫的致死速度要快于对若虫的致死速度。在时间-剂量-死亡模型研究中,梨网蝽成、若虫在接种后的第3 d到第7 d,累积死亡率均呈直线快速上升趋势,而在前后均变化平缓。同时,各菌株均表现出明显的死亡率随接种浓度增高而不断增高的剂量效应。菌株Bb2359对梨网蝽成虫、若虫均显示出很高的毒力水平,致死中浓度LC50分别为6.466×104和4.747×104孢子/m L;在1.0×107孢子/m L浓度下致死中时LT50分别为2.89和3.54 d。该菌株具备高效快速的杀虫特点,具有开发为真菌生物农药的巨大潜力。

红叶石楠叶斑病病原鉴定及其生物学特性研究

红叶石楠是我国园林绿化常用的彩叶树种。近来,安徽合肥市红叶石楠叶斑病发生严重,导致叶片枯萎脱落甚至植株死亡,严重影响其观赏价值。为科学防控红叶石楠叶斑病,对其病原菌种类和生物学特性进行了研究。本研究采用组织分离法获得红叶石楠叶斑病的病原菌,并通过显微形态观察结合系统发育树的方法,最终将其病原菌鉴定为小孢拟盘多毛孢Pestalotiopsis microspora。生物学特性测定结果表明:适宜菌丝生长的最佳碳源和最佳氮源分别为蔗糖和蛋白胨,最适生长温度和pH分别为25℃和6。研究结果为该病害的正确诊断提供了较为可靠的科学依据。