N-乙酰半胱氨酸对佐剂性关节炎大鼠治疗作用及机制

目的:探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对佐剂性关节炎(AA)大鼠的抗炎作用,以及Toll样受体2(TLR2)炎症因子的改变。方法:SD大鼠50只,随机取10只为对照组,40只进行AA造模,造模10 d后,再均分为模型组及NAC低、中、高剂量组(灌胃给药量50、100、200 mg/kg),NAC组给药16 d,应用关节肿胀度和关节炎指数评价NAC对AA大鼠治疗作用;免疫组化染色和Western blot观察关节滑膜组织中TLR2蛋白表达;ELISA法检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-10(IL-10)水平。结果:与对照组比较,模型组关节肿胀、关节炎指数明显升高,NAC低、中、高剂量组大鼠关节肿胀和关节炎指数降低明显,差异均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01);NAC低、中、高剂量组滑膜组织TLR2蛋白表达减弱,炎症因子TNF-α、IL-1β下降,IL-10上升,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:NAC可改善AA大鼠关节炎症状,其机制可能与抑制AA大鼠TLR2和调节下游炎症因子通路有关。

N-乙酰半胱氨酸通过阻断Nrf2/Keap1通路抑制(H_(2)O_(2))处理的佐剂性关节炎成纤维细胞样滑膜细胞增殖

目的探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对低浓度过氧化氢(H_(2)O_(2))处理的佐剂性关节炎(AA)大鼠成纤维细胞样滑膜细胞(AA-FLS)增殖的影响及机制。方法SD大鼠分为正常对照组和模型组(均为10只),模型组采用足趾皮下注射Freund完全佐剂造模,28 d后处死大鼠。硫代巴比妥酸法检测血清丙二醛(MDA)含量、羟胺法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性,比色法测定谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,免疫组织化学染色法检测踝关节滑膜组织中核因子E2相关因子2(Nrf2)、Kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)蛋白表达;体外培养和鉴定AA-FLS,CCK-8法检测(0、0.3、0.9、3、10、30、90、180)μmol/L NAC对5μmol/L H_(2)O_(2)处理的AA-FLS活力的影响,采用MitoSOX线粒体活性氧荧光探针检测AA-FLS中线粒体活性氧(ROS)含量,Western blot法检测(0、3、10、30)μmol/L NAC对低浓度H_(2)O_(2)处理AA-FLS的Nrf2、Keap1蛋白表达的影响。结果与正常对照组比较,AA模型大鼠血清MDA水平增加、SOD、GSH-Px水平降低,滑膜组织中Nrf2表达升高、Keap1表达降低;免疫细胞化学染色证实分离培养的细胞是AA-FLS,NAC可浓度依赖性抑制H_(2)O_(2)处理的AA-FLS增殖,且线粒体ROS含量下降,Nrf2、Keap1蛋白表达降低。结论NAC可抑制H_(2)O_(2)处理后的AA-FLS增殖,其机制可能与阻断Nrf2/Keap1通路有关。

子宫颈病变中Nrf2和Keap1蛋白的表达及与预后的关系

目的探讨氧化应激蛋白核因子E2相关因子(nuclear factor E2-related factor,Nrf2)和Kelch样ECH相关蛋白1(Kelch-like ECH-related protein 1,Keap1)在子宫颈病变中的表达及与预后的关系。方法收集20例子宫颈上皮内病变和67例子宫颈癌(Ia期21例、Ib期24例、IIa期22例)标本,采用免疫组化SP法检测Nrf2和Keap1蛋白在子宫颈病变组织中的表达,并分析两者表达与患者预后的关系。结果Nrf2和Keap1蛋白表达定位于子宫颈上皮细胞质,呈浅黄色至棕黄色;随着子宫颈病变病理分级的升高,Nrf2蛋白在子宫颈上皮内病变,子宫颈癌Ia、Ib、IIa期中的阳性率分别为25.0%、61.9%、75.0%、81.9%,Keap1蛋白的阳性率分别为75.0%、66.6%、54.2%、45.5%。Keap1蛋白表达与肿瘤肌层浸润、有无淋巴结转移、分化程度、临床分期有关。结论Nrf2和Keap1蛋白表达可能与子宫颈病变的发生、发展以及预后相关。