重度烟雾吸入致大鼠急性肺损伤的免疫应答及其机制探讨

目的 分析重度烟雾吸入致吸入性急性肺损伤（ALI）对大鼠肺自然免疫及特异性免疫反应。方法 分别复制一氧化碳（CO）浓度为2×10^-3（低浓度）和4×10^-3（高浓度）重度烟雾吸入致大鼠吸入性ALI模型。观察染毒后0～24h大鼠肺组织病理学变化；检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中致炎及抗炎细胞因子的浓度；用流式细胞仪检测外周血及BALF中淋巴细胞亚群数，BALF中CD45^＋淋巴细胞和非淋巴细胞数量以及CD4^＋／CD8^＋变化。结果 肺组织病理学检查证实染毒后可致明显肺损伤。染毒2hBALF中肿瘤坏死因子-α（TNF—α）呈一过性升高，高浓度组较低浓度组更明显，之后下降；4h白细胞介素-6（IL-6）、γ-干扰素（IFN-7）开始升高，其中IL-6低浓度组较高浓度组明显，IFN-γ高浓度组较低浓度组明显，至12h达高峰，24h开始下降，但仍高于正常对照组水平（P〈0．05或P＜0．01）；6～24hIL-10与正常对照组比较均显著升高，尤以24h明显（P〈0．05或P＜0．01）。外周血及BALF中CD4^＋、CD8^＋、自然杀伤细胞、B细胞及总T细胞均较正常对照组明显下降（P〈0．05或P＜0．01）。BALF中CD45^＋淋巴细胞数和CD4^＋／CD8^＋均较正常对照组明显减少，非淋巴细胞数较正常对照组明显增多，且高浓度组较低浓度组变化趋势明显（P〈0．05或P＜0．01）。结论 重度烟雾吸入致吸入性ALI的过程中伴有持续且过度的肺自然免疫反应，这种自然免疫反应部分由活化的中性粒细胞及巨噬细胞所介导；而肺特异性免疫反应受到明显的抑制。

日本血吸虫童虫文库免疫筛选及其高丰度表达膜蛋白初步鉴定

目的获得新的可能具有诊断意义的血吸虫蛋白分子并对其鉴定。方法免疫学方法筛选日本血吸虫童虫cDNA文库,对获得的阳性克隆进行测序分析,设计引物体外扩增目的蛋白基因,将其亚克隆入原核表达载体pET28a中,并转化大肠埃希菌BL21,进行诱导表达,最后用Westernblotting鉴定。结果获得34个阳性克隆,选择其中24个进行测序,其中13个是日本血吸虫相对分子质量(Mr)为22600膜相关蛋白(Sj22.6)基因。Sj22.6基因在体外被成功扩增,并被亚克隆入pET28a中进行表达。WesternBlotting结果显示,菌体表达的条带可以被感染兔血清以及血吸虫患者血清识别。结论Sj22.6膜相关蛋白基因在童虫cDNA文库中可以被高频率筛出,融合蛋白Sj22.6成功地在BL21中表达并具有免疫反应性。

CpG ODN增强免疫力低下小鼠对乙肝疫苗的体液免疫应答

目的 探讨CpGODN对免疫力低下小鼠的体液免疫增强作用。方法 选用老年C57BL/ 6小鼠和免疫抑制模型小鼠 ,将重组HBsAg疫苗和CpGODN同时或单独肌注到小鼠体内 ,2周后以同样剂量加强免疫 1次 ,再过 3周后摘除眼球取血 ,用ELISA方法检测抗HBsAgIgG抗体。 结果 免疫抑制模型中同时注射CpGODN和疫苗组产生的IgG抗体绝对量是单独注射疫苗组的 2倍 ;老年鼠组中 1 0 μg和2 0 μgCpGODN与疫苗同时注射组产生的IgG抗体绝对量分别是单独注射疫苗组的 3倍和 4倍。

评估人T淋巴细胞亚群对结核杆菌脂质抗原的免疫反应

目的:观察结核杆菌脂质的一些脂类抗原对人外周血中淋巴细胞活化和增殖的作用,进而探讨脂类抗原在结核感染中是否存在特异性的免疫作用。方法:取健康人外周血单个核细胞(PBMC),分离诱导出非成熟树突状细胞(im DC)后分别加入结核杆菌脂质全脂质(TLIP)、丙酮可溶性脂质(ASLIP)、纯硫脂(PSLIP)、脂阿拉伯糖(LAM)、脂甘露聚糖(LM)、同时设置非脂类抗原全菌裂解物(WCL)、培养分泌蛋白(CFP)、耐热抗原(Mtb-HAg)、脂多糖(LPS)和空白对照组。用CFSE标记自体淋巴细胞后,与被脂质抗原刺激后的DC共培养。之后,用流式细胞仪(FCM)检测T淋巴细胞亚群(CD4+、CD8+、NKT和γδT)的增殖和分泌细胞因子(IFN-γ、TNF-α和IL-4)的情况。结果:相较于空白组,所有脂质都能促进NKT细胞和CD8+T细胞增殖(P<0.05)。相较于空白组ASLIP,LAM和LM可以促进非增殖的CD4+T细胞分泌IL-4,或者促进增殖的CD4+T细胞分泌IFN-γ(P<0.05)。相较于空白对照组,所有脂质抗原(除了LM)都能促进增殖的γδT和CD8+T细胞分泌IFN-γ和TNF-α,而LM能抑制增殖的CD8+T细胞分泌TNF-α。结论:结核杆菌脂质抗原能激活PBMC的特异性免疫反应,特别是CD1限制性T细胞的应答。

浅谈医学免疫学教学中的几点体会

目的本文作者通过对现代医学免疫学的教学实践深切体会到,改革传统教学模式,提高教学质量,无论对学校或者学生都有重要意义。文章提出了免疫教学改革的一些体会,如兴趣教学法的应用,板书和多媒体相结合的教学模式,理论联系实验等,使教师建立科学合理适应现代免疫学发展趋势的授课体系。

成人隐匿性自身免疫糖尿病与调节性T细胞及相关基因Foxp3表达关系

目的探讨成人隐匿性自身免疫糖尿病与调节性T细胞(Treg)及相关基因Foxp3表达关系。方法采集LADA组、T1DM组、T2DM组和正常对照组新鲜外周血,密度梯度分离单个核细胞,流式细胞术检测4组CD3、CD4、CD25 T淋巴细胞亚群数量,计算Treg数量,RT-PCR检测转录因子Foxp3 mRNA的表达水平。结果 LADA组和T1DM组外周血CD4+T细胞明显高于T2DM组和正常对照组(P<0.05)。LADA组外周血Treg细胞高于T1DM组(P>0.05),明显低于T2DM组和正常对照组(P<0.05)。T1DM组外周血Treg细胞明显低于T2DM组和正常对照组(P<0.01),T2DM组和正常对照组之间无统计学差异(P>0.05)。LADA组Foxp3 mRNA明显高于T1DM组(P<0.05),明显低于T2DM组和正常对照组(P<0.05)。T1DM组Foxp3 mRNA明显低于T2DM组和正常对照组(P<0.01),T2DM组和正常对照组之间无明显统计学差异(P<0.05)。结论 LADA患者Treg细胞数量和活性降低,可能是其发病机制之一。

PBL教学法在医学免疫学教学中的应用

目的探讨PBL教学法的医学免疫学教学效果。方法在2006级本科临床专业就部分章节进行教学尝试。结果提高了学生的学习兴趣,促进了学生对知识的理解和记忆,提高了学生的自学能力、表达能力及人际沟通能力,增强了学生的主观能动性。结论PBL教学方法应用于实际教学有利于提高免疫学教学质量。

科研与创新能力培养在医学免疫学教学中的探索

医学免疫学作为生命科学研究的重要支持学科,其内容在基础医学研究及临床科研研究中应用极为广泛。为适应快速发展的生命科学研究需要,如何在医学免疫学教学中培养学生的科研能力和创新性思维是目前医学免疫学教学中需要注重的问题。分别从理论教学、实验教学、科研文献学习以及考核制度四方面对医学免疫学教学进行改革,以期从学生的科研兴趣和科研能力出发,培养出有潜力的科研型人才。

《医学免疫学》教学中教学互动新模式的尝试

探求免疫学教学中解决学生缺乏学习兴趣的新方法。通过改进已有的教学互动方式,让学生走上讲台,丰富课堂教学形式,提高学生学习热情,达到变"要我学"为"我要学"的教学效果。

双语教学在医学免疫学教学中的尝试

为适应科技发展和人才培养的需要,高等医学院校开展双语教学势在必行。从建立恰当的教学目标、提高教师的业务水平、准备合适的教材与课件以及改革教学与考试模式等方面对免疫学双语教学进行了初步尝试,为推动双语教学的进一步发展打下基础。

浅谈《医学免疫学》教学中的几个结合

免疫学教学中,学生往往觉得晦涩难懂,从而产生厌学情绪,问题的症结在于学生缺乏兴趣和学习主动性,解决问题的出路在于改变单一的教学手段,紧密结合现代教学方法,加强与其他学科渗透,重视实验操作,鼓励学生参与教学互动,在各种方法相互结合取长补短中达到最佳的教学效果。

自身免疫性疾病中T_H1/T_H2细胞平衡

CD4 + T细胞能分化成功能不同的TH1和TH2亚群 ,这两类细胞及其特征性细胞因子的平衡受TH分化因素、TH1 TH2细胞间相互作用及TH1 TH2细胞稳定性等的影响 ,并与自身免疫性疾病的发生、发展密切相关。本文就近年来对TH1 TH2细胞特性、功能、平衡的研究及一些自身免疫性疾病中TH1

人轮状病毒抗原非复制型重组腺病毒黏膜免疫效果的研究

目的 :对人轮状病毒抗原非复制型重组腺病毒诱导黏膜免疫的效果进行初步评价。方法 :用表达轮状病毒VP7、VP6基因的 3株重组腺病毒rvAdG1VP7(G)、rvAdG1VP7和rvAdVP6 ,分别通过灌胃和滴鼻两种途径对BALB C小鼠进行 2次免疫后 ,对肺灌洗液和肺、肠粘膜组织匀浆液中轮状病毒特异性的分泌型IgA(secretoryIgA ,SIgA)和local IgG进行检测。结果 :对肺灌洗液中特异性SIgA进行检测 ,发现滴鼻组的免疫学效果明显优于灌胃组。对肺、肠组织匀浆液中特异性IgA的分析表明 ,灌胃途径刺激异位粘膜组织产生免疫应答的能力较弱。对rvAdVP6滴鼻组小鼠肺灌洗液 (1∶2 0 )特异性local IgG和SI gA的阳转率进行比较 ,发现特异性local IgG的应答水平明显高于特异性SIgA。结论 :重组腺病毒可有效诱导针对轮状病毒的黏膜免疫。此研究为轮状病毒基因工程疫苗的免疫方案、免疫途径及免疫保护作用等的进一步研究奠定了基础。

人肺泡型细胞A549在大肠埃希菌诱导下非特异性免疫分子的表达

目的:呼吸道上皮细胞在呼吸道固有免疫应答中起重要作用,文中探讨呼吸道上皮细胞对大肠埃希菌(E.coli)的应激反应能力及其作用机制。方法:常规体外培养A549细胞,细胞传代24h后加入灭活的E.coli,进行不同浓度或时间的诱导;用半定量RT-PCR法检测其细胞中白细胞介素(IL)-6、补体C3和C-反应蛋白(CRP)mRNA水平;ELISA法检测其上清液中IL-6、CRP和血清淀粉样蛋白A(SAA)蛋白水平,免疫比浊法检测其上清液中C3蛋白水平。结果:培养的A549细胞在不同浓度和不同时间的E.coli诱导下,表达IL-6、C3和CRP mRNA及IL-6、C3、CRP和SAA蛋白水平呈浓度和时间的依赖性。与对照组相比,均有显著性差异(P<0.05)。结论:呼吸道上皮细胞在病原微生物刺激下,表达多种非特异性免疫效应分子,积极清除外来致病物,发挥重要的固有免疫防御作用。上皮细胞还可能在固有免疫和适应性免疫之间起连接作用。

血吸虫及其相关蛋白与自身免疫性疾病(英文)

自身免疫性疾病(ADs)是以特定的靶器官或多个器官系统的慢性损害和功能障碍为特征,临床上缺乏有效的治疗方法,目前发病率逐年升高,严重威胁人类健康。现有数据显示,血吸虫感染或注射血吸虫相关蛋白可能保护或减轻机体免受自身免疫性疾病的损害。研究学者已经建立相应的小鼠自身免疫疾病模型,证实了注射血吸虫蛋白具有诱导宿主Th2免疫偏移,下调Th17反应,并诱导旁路途经活化的巨噬细胞,从而减轻自身免疫性疾病,具有肯定的治疗效果。在这篇综述中,我们总结了血吸虫感染及血吸虫相关蛋白与减轻Th1介导的自身免疫性疾病之间的关系,力争明确其潜在的免疫保护机制。

间接免疫荧光法筛选抗呼吸道合胞病毒单克隆抗体及其性质的初步鉴定

目的利用活体骨髓瘤细胞与杂交瘤技术,采用间接免疫荧光分析法(IFA)筛选出更多可识别人呼吸道合胞病毒(RSV)的单克隆抗体,并对其体外性质进行鉴定,以期为RSV的被动免疫治疗以及临床诊断奠定基础。方法以RSV通过滴鼻途径免疫小鼠,同时采用实体瘤技术体内制备骨髓瘤细胞。取免疫后小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞进行细胞融合,利用IFA方法筛选经有限稀释法亚克隆获得的可稳定分泌抗RSV单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株。通过间接ELISA和Western blot等方法初步分析McAb对RSV蛋白的特异性结合能力,通过免疫酶法(IE)蚀斑减少中和实验和融合抑制实验分析McAb体外保护作用。结果获得4株稳定分泌抗RSV单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别为2A7、3E10、1F10及3G4,经间接ELISA以及Westernblot初步鉴定,获得的4株单克隆抗体可特异性识别RSV蛋白,McAbs 2A7和3E10可分别识别融合糖蛋白(F)蛋白二聚体和单体,McAbs 1F10和3G4可识别黏附糖蛋白(G)蛋白。其中McAbs 2A7与1F10可以在体外抑制RSV对HEp-2细胞的感染,具有中和活性,同时具有融合抑制活性。结论利用IFA法成功筛选了能特异性识别RSV的4种单克隆抗体,初步鉴定显示两种单抗可分别识别F蛋白二聚体和单体,另两种单抗可识别G蛋白。IE法蚀斑减少实验显示两种单抗在体外具有中和活性和融合抑制活性,表明获得的单抗对RSV感染具有一定的预防作用。