卫生检验与检疫专业就业分析与实践能力培养探讨

现行公共卫生预防医学教育体制还有很多不完善的地方,特别是卫生检验与检疫专业实践能力培养方面存在着短板。在对毕业生就业情况调查和用人单位对毕业生反馈意见的基础上,对学生实践能力培养体制所存在的问题进行分析探讨、寻找根源,提出改进措施,为进一步改善学生实践能力培养体制提供参考。

卫生检验专业细菌学检验双语教学实践与体会

细菌学检验是卫生检验专业本科生的主要专业课程之一,开展该门课程的双语教学是必须的。从双语教学的目的入手,阐述细菌学检验双语教学的实践内容,针对细菌学检验双语教学在师资、教材、学生和教学手段等方面所遇到的问题,提出了具体的思考和对策,为更好的完成卫生检验专业双语教学的目标提供参考。

卫生微生物学开展设计性综合实验教学模式的分析

在卫生微生物学实验教学改革中,采用设计性综合实验模式,概述卫生微生物设计性综合实验的选题以及如何开展实验教学,对教学效果予以探讨,分析在实施过程中需要重视的问题。设计性综合实验对提升学生的自学能力,增强实验技能,培养科研素养,树立团队协作精神有很大的帮助,有效提高教学质量。

小鼠妊娠期甲状腺功能减退诱导雌性子代生命早期脂质代谢紊乱

目的通过构建小鼠妊娠期甲状腺功能减退模型,评估对雌性子代生命早期脂质代谢的影响。方法将雌性小鼠(C57BL/6J)随机分为正常对照组(NC0)、甲状腺功能减退合并妊娠组(PH0)、妊娠伴发甲状腺功能减退组(GH0)。首先对PH0组给予含0.15%丙基硫氧嘧啶饲料喂养28 d,NC0组和GH0组则给予正常饲料喂养。确认造模成功后进行合笼,妊娠期间,GH0组和PH0组雌鼠给予含0.15%丙基硫氧嘧啶饲料,NC0组则给予正常饲料喂养。分娩后,在3周龄时检测各组雌性子代血清游离三碘甲腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、促甲状腺激素(TSH)和血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)的水平;HE染色法观察甲状腺、肝脏病理改变;Western blot检测与脂质代谢相关的蛋白水平。结果与NC0组比较,PH0组与GH0组雌性子代的血清FT3、FT4水平降低,血清TSH水平升高,血清TC水平和肝脏TC、TG水平升高,肝脏存在脂质沉积的现象,肝脏中与脂质代谢相关蛋白HMGCR、FAS、CD36的表达水平升高,CPT1A、LDL-R的表达发生了下调。结论小鼠妊娠期甲状腺功能减退能够导致雌性子代生命早期脂质代谢紊乱。

小细胞肺癌90例免疫表型特征及其预后分析

目的探讨小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)神经内分泌标志物、CKpan及TTF-1与TNM分期及患者预后的关系。方法采用免疫组化Max Vision两步法检测90例SCLC组织中NSE、Cg A、Syn、CD56、CKpan及TTF-1的表达,分析患者的临床病理资料及TNM分期,电话随访计算患者的总生存期(overall survival,OS)。结果 90例SCLC中多数为老年男性,男女比为5∶1,中位年龄64岁,其中Ⅰ+Ⅱ期21例,Ⅲ期30例,Ⅳ期39例。SCLC中NSE、Cg A、Syn、CD56、CKpan及TTF-1的阳性率分别为83.3%、70%、65.5%、86%、92.2%和81.1%。Kaplan-Meier单因素分析显示TTF-1、NSE的表达与TNM分期及患者生存期相关(P<0.05);TTF-1阳性组中位生存期为8个月,与TTF-1阴性组(5.5个月)相比差异有统计学意义(P=0.000);NSE阳性组中位生存期为7个月,与NSE阴性组(11个月)相比差异有统计学意义(P=0.009);TNM分期中Ⅰ+Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ的中位生存期分别为16个月、9个月和4个月,差异均有统计学意义(P=0.000);Cox多因素生存分析显示TTF-1表达和TNM分期是影响SCLC OS的独立预后因素。结论 SCLC多伴有神经内分泌分化,多数表达CKpan和TTF-1;其中TTF-1表达与SCLC的预后呈负相关;NSE表达与预后呈正相关;TTF-1表达和TNM分期是影响SCLC OS的独立预后因素。

正交试验优选淡豆豉中SOD的最佳水提条件

目的研究淡豆豉中超氧化物歧化酶(SOD)水提取的最佳工艺条件。方法用正交试验法对淡豆豉中SOD提取工艺条件进行优选,以SOD提出量为指标,选用L9(34)正交试验表;考察影响SOD提出量的提取时间、提取温度和提取液的pH值3个因素,每个因素取3个水平。结果影响淡豆豉中SOD提取量的最主要因素是提取液的pH值,其次是提取温度。水提法优化工艺条件为温度35℃,时间5h,提取液的pH值为5.8。

Chinese1基因型弓形虫棒状体蛋白ROP16的基因克隆表达及生物信息学分析

目的构建弓形虫Chinese 1基因型Tg Ct Wh3(以后均简称Wh3)株棒状体蛋白(rhoptry protein,ROPs)16的原核和真核重组表达质粒及其3D结构。方法参照ROP16序列分别设计引物,采用PCR从弓形虫Chinese 1基因型Wh3株基因组DNA中扩增出编码ROP16的基因片段,克隆至p MD18-T载体;经PCR及测序分析鉴定;阳性克隆的质粒分别亚克隆至原核表达载体p ET-28a和真核表达载体p EGFP-C2,分别转化大肠杆菌BL21和DH5α,PCR和酶切鉴定转化菌落插入的序列;将构建的原核表达菌株经IPTG诱导,SDS-PAGE和免疫印迹分析融合蛋白的表达;将构建的真核重组质粒经脂质体转染293T细胞,观察其在细胞中表达;采用生物信息学方法分析构建了蛋白的3D结构。结果各组均PCR扩增出约2.1 kb ROP16基因的特异片段,序列检测结果均正确;分别亚克隆到原核表达载体p ET-28a和真核表达载体p EGFP-C2中,成功构建了Chinese 1基因型弓形虫棒状体蛋白ROP16的原核表达质粒和真核表达质粒;原核表达质粒在大肠杆菌中表达了ROP16的融合蛋白;真核表达质粒在293T细胞中成功表达,成功构建出ROP16基因的3D结构图。结论以p ET-28a和p EGFP-C2为载体,分别成功构建并表达了ROP16的原核和真核重组质粒,并构建出其3D结构图。

氧化应激在镉抑制小鼠睾丸间质细胞睾酮合成中的作用

目的探讨氧化应激在镉抑制小鼠睾丸间质细胞睾酮合成中的作用。方法采用20μmol/L CdCl_2处理小鼠睾丸间质细胞系TM3细胞,在加入CdCl_2 4 h和8 h后分别收集细胞和上清液,等容积磷酸盐缓冲液处理8 h为对照组,采用ELISA法检测上清液中睾酮含量,采用RT-PCR法检测血红素加氧酶-1(HO-1)、超氧化物歧化酶(SOD1)、SOD2和SOD3、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)mRNA的表达水平,采用Western blot法检测HO-1和血红素加氧酶-2(HO-2)蛋白的表达水平。结果 CdCl_2处理4 h和8 h后的细胞上清液中睾酮的含量明显低于对照组(P<0.01);CdCl_2处理组的SOD1、SOD2、SOD3、GSH-Px、CAT mRNA与对照组相比表达水平均降低。此外,CdCl_2处理组中HO-1的mRNA表达量与对照相比明显升高;与此相一致,CdCl_2明显诱导TM3细胞HO-1的蛋白表达,并具有明显的时间-效应关系(P<0.01);结论镉抑制TM3细胞睾酮的合成,氧化应激可能在其中发挥重要作用。

microRNA干扰HPV16 E6基因对宫颈癌细胞顺铂敏感性影响的实验研究

背景与目的:宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤,其中80%的宫颈癌可以检测到HPV16基因。本研究观察HPV16 E6基因miRNA干扰对宫颈癌CaSki细胞顺铂敏感性的影响。方法:利用分子生物学技术,将本实验室构建的针对HPV16 E6基因的miRNA表达载体pcDNA 6.2-GW/EmGFPmiR,分别转染至CaSki细胞和C-33A细胞内。倒置荧光显微镜观察转染效率,RT-PCR测定HPV16 E6 mRNA变化,蛋白质印迹法(Western blot)检测转染前后E6蛋白表达,MTT法检测转染前后对宫颈癌细胞顺铂敏感性的影响。结果:经杀稻瘟菌素(blasticidin S HCl)选择培养液筛选2周后,将获得的稳定转染细胞分别命名为CaSki-M3和CaSki-N、C-33A-M3和C-33A-N。RT-PCR显示,CaSki-M3细胞内的E6 mRNA转录水平比未转染组降低了99%,E6蛋白的表达抑制率为87.5%。用0.005、0.05、0.5、5、50和500μg/mL的顺铂处理未转染CaSki和C-33A以及转染后CaSki-M3、CaSki-N、C-33A-M3和C-33A-N细胞,CaSki-M3细胞对顺铂的敏感性显著升高(P<0.01)。结论:HPV16 E6 miRNA有效下调HPV16 E6mRNA水平,抑制HPV16 E6蛋白的表达,可明显提高CaSki细胞对顺铂的敏感程度。

斑点热与发热伴血小板减少综合征早期鉴别模型研究

目的 建立斑点热(SF)与发热伴血小板减少综合征(SFTS)临床鉴别模型,为早期鉴别SF和SFTS提供参考。方法 通过中国疾病预防控制信息系统收集2017年5月—2021年5月安徽省六安市二级及以上医院经实验室确诊的SF和SFTS病例临床资料;采用logistic回归模型分析SF的影响因素,建立SF与SFTS早期鉴别模型;采用Hosmer-Lemeshow检验评价模型拟合效果;采用受试者操作特征曲线下面积(AUC)评价模型鉴别价值。结果 纳入62例SF病例资料和115例SFTS病例资料。多因素logistic回归分析结果显示,SF与SFTS鉴别模型最终纳入皮疹(β=5.994)、C反应蛋白(β=4.409)、白细胞(β=-3.176)和血小板(β=-3.234) 4个指标,分别赋值6、4、-3和-3分,总分为-6~10分;Hosmer-Lemeshow检验显示模型拟合效果较好(χ^(2)=3.245,P=0.662)。模型AUC值为0.992,当截断值取1分时,灵敏度为0.935,特异度为0.991。结论 本研究建立的SF与SFTS鉴别模型包括皮疹、C反应蛋白、白细胞和血小板4个指标,早期鉴别的准确性较高。

油烟中细颗粒物致胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞DNA损伤的研究

目的探讨油烟中的细颗粒物(PM2.5)对原代培养的胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)DNA的损伤效应。方法将1只妊娠18 d的SPF级ICR小鼠体内的胎鼠肺组织制成AECⅡ细胞悬液,取对数生长期细胞,调整细胞密度为1×106/ml,分别加入终浓度为0(溶剂对照,含10%FBS的DMEM)、12.5、25、50、100μg/ml的PM2.5(来源于烹调油烟)溶液,培养6、12 h后进行MTT试验和彗星试验,并检测AECⅡ细胞的尾长、尾部DNA百分比、尾矩和Olive尾矩。结果与溶剂对照组比较,50、100μg/ml PM2.5染毒6、12 h时胎鼠AECⅡ存活率下降,差异均有统计学意义(P<0.05);12.5、25、50μg/ml PM2.5染毒6、12 h时胎鼠AECⅡ的尾长、尾部DNA百分比、尾矩和Olive尾矩升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。随着PM2.5染毒浓度的升高,AECⅡ细胞存活率呈下降趋势,尾长、尾部DNA百分比、尾矩和Olive尾矩均呈上升趋势。结论油烟中的PM2.5可降低AECⅡ的细胞活性,对AECⅡ的DNA具有损伤效应。

丙型肝炎病毒感染者自身抗体检测分析及临床意义

目的调查丙型肝炎病毒(hepatitis C virus, HCV)感染者血清中自身抗体检出情况,探讨自身免疫在HCV感染中的意义。方法选取2015-2017年来自上海市闵行区中心医院就诊的HCV感染者40例作为感染组,另选该院健康体检者20例作为对照组。用自身抗体检测芯片筛查检测83种自身抗体;然后建立预包被酶联免疫吸附试验(ELISA)检测13种自身抗原,将两种方法检测到的抗体滴度变化进行比对,分析结果。结果芯片检测83种自身抗体,发现HCV感染者中28种自身抗体滴度显著上调,3种抗体滴度显著下调。将ELISA法能检测到的13种抗体进行吸光度值统计分析,发现11种自身抗体滴度显著升高,2种自身抗体滴度无显著变化,与芯片结果一致。结论 HCV感染可以诱发自身免疫反应,产生多种自身抗体,有助于探索HCV致病机制,并为临床诊断和治疗HCV感染提供依据。

microRNA-155在弓形虫感染调节巨噬细胞极化中的作用

目的探讨弓形虫感染对宿主细胞内microRNA-155(miR-155)表达的影响及其对巨噬细胞极化的作用。方法利用miRNAs基因芯片检测弓形虫感染宿主细胞内miRNAs表达水平,应用实时定量聚合酶链反应技术(qPCR)检测miR-155表达水平。采用脂质体转染法将pEGFP-miR-155导入人巨噬细胞,利用流式细胞术检测转染效率。采用流式细胞术、qPCR、酶联免疫法检测弓形虫感染组、pEGFP-miR-155过表达组以及miR-155抑制组诱导巨噬细胞表面分子CD86及诱导型一氧化氮合酶(i NOS)和白细胞介素(IL)-12表达水平。结果基因芯片和q PCR检测结果显示,随着弓形虫感染时间的延长,miR-155表达量上升;pEGFP-miR-155转染宿主细胞的转染效率可达82.6%。弓形虫感染组和pEGFP-miR-155过表达组CD86表达水平显著高于对照组和miR-155抑制组,iNOS和IL-12基因表达量显著升高。结论弓形虫感染能够通过上调miR-155表达参与驱动人源巨噬细胞向M1型偏移。