模式生物果蝇在食品毒理学实验教学改革中的应用

黑腹果蝇是生命科学领域经典模式生物之一,具有体积小、易饲养、繁殖快和遗传背景清晰等特点,已助力科学家获得六次诺贝尔生理学或医学奖。目前,黑腹果蝇已成为食源性污染物毒作用评价及深入机制研究的新兴动物模型,且不受伦理限制,符合毒理学替代法3R原则。该文简述了模式生物果蝇在食品毒理学实验教学应用中的可行性和优势,及其在寿命、神经和生殖毒作用机制方面的应用研究。将果蝇模型应用于食品毒理学实验教学,有助于实现教学与科研相融合,推动食品毒理学教学的发展。

毒理学基础教学中学生创新能力的培养

毒理学基础既是一门基础学科,也是一门应用科学,毒理学相关课程已成为医学相关专业人才培养的重要内容。本文结合自己的教学经验,对在毒理学基础的理论和实验教学中采取多种方式,注重启发学生的创新意识,引导学生树立创新精神,形成创新思维,并培养学生的创新能力,把学生培养为适应时代需要的创新型人才进行了探讨。

毒理学实验教学中3R原则的应用探索

目的:本课题将3R原则在毒理学实验教学进行应用,探讨其提高毒理学实验教学效果,增强学生创新思维与意识的作用。方法:以我校2015级食品质量与安全专业的30名学生为主体,在教师、教辅和硕士生的辅助下,整个实验过程中遵循3R原则,完成文献检索阅读、实验动物的毒物暴露、生物材料的采集和实验结果分析。结果:所有学生顺利完成教学目标,同时解决了食品安全中小的现实问题,并贯彻了“3R”原则,减少实验动物的使用量,优化了传统实验方法和技术,替代了整体动物试验模式。结论:3R原则在毒理学实验教学中可以有效地提高实验教学效果,促进了教学与科研的有机结合,学生的创新思维得到扩展。

《毒理学基础》教学过程中课程思政内容的初步挖掘

我国高校思想政治教育处于从思政课程到课程思政的改革阶段。《毒理学基础》课程内容涵括多个领域专业知识,许多内容都适合作为课程思政教育的素材。本文对《毒理学基础》中课程思政内容进行初步挖掘,为发挥专业课程思想政治隐性教育功能、落实“教育、立德、树人”根本任务提供参考和帮助。

肺癌细胞中GTSE1与细胞周期的关系及潜在调控机制

细胞周期的调控对于维持细胞正常功能至关重要,尤其在肺癌等疾病的发展中。细胞周期由四个主要阶段组成(G1、S、G2和M期),这些阶段通过一系列精确的分子事件来确保细胞正确增殖和分裂。在肺癌细胞中,细胞周期失调可导致癌细胞无序增殖和侵袭能力增强。G2和S期表达-1(G2and S-phase expressed 1,GTSE1)是一种在细胞质中发现的调节蛋白,它在多种癌细胞的细胞周期分布中起着关键作用,并参与了细胞增殖和凋亡等过程。GTSE1通过与细胞周期蛋白依赖激酶抑制因子1A(cyclin-dependent kinase inhibitor 1A,p21)的相互作用,维持p21的稳定性,进而抑制细胞周期蛋白依赖性激酶1/2(cyclin-dependent kinase 1/2,CDK1/2)的活性,影响细胞周期的进程。此外,GTSE1还参与肿瘤蛋白53(tumor protein 53,p53)信号通路的调控。在双微体同源基因2(mouse double minute 2 homolog,MDM2)的协助下,GTSE1能够将p53从细胞核转运至胞质,并促进其泛素化降解,从而影响细胞周期和细胞死亡相关信号通路。本文综述了GTSE1在肺癌细胞中的表达情况和对肺癌的影响,以及其参与细胞周期调控的潜在机制。

膝关节及其周围损伤患者关节挛缩的危险因素分析

目的探讨膝关节及其周围损伤后关节挛缩相关危险因素,为膝关节挛缩患者早期康复干预提供思路。方法回顾性分析2017年7月至2023年1月就诊于安徽医科大学第二附属医院的150例膝关节及其周围损伤患者病历资料。根据关节挛缩的状况将患者分为关节挛缩组(病例组)和非关节挛缩组(对照组)。收集患者的性别、年龄、体重指数(BMI)、损伤类型、疼痛评分、未有效康复干预时长等基本资料,建立多因素模型并进行统计学分析。结果膝关节及其周围损伤后发生关节挛缩104例,关节挛缩发生率69.33%;病例组和对照组性别、损伤类型、视觉模拟评分(VAS)和未有效康复干预时长的分布比较,差异有统计学意义(P<0.05);病例组和对照组患者年龄、BMI比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论男性、VAS≥3分、损伤类型、未有效康复干预时长≥30 d是关节挛缩发生的危险因素。

雌激素替代疗法与女性阿尔茨海默病关系的Meta分析

目的探讨雌激素替代疗法与女性阿尔茨海默病发病风险之间的关系。方法计算机检索PubMed、Springer、CBM、CNKI和维普数据库,查找雌激素替代疗法与女性阿尔茨海默病相关性的病例对照研究,检索时间从建库到2012年12月。评价纳入文献的方法学质量后,采用RevMan 5.0软件对提取的数据进行分析。结果共纳入7项病例对照研究,病例组1392例,对照组2719例。Meta分析结果显示AD组中雌激素替代疗法者所占比例明显低于对照组,差异有统计学意义[OR=0.68,95%CI(0.50,0.90),P=0.01]。结论雌激素替代疗法对女性阿尔茨海默病存在影响,且为保护因素。

铝对神经系统的毒性作用研究进展

铝是地壳中含量第3丰富的元素，铝毒性早已引起学者们的关注，但其神经毒性作用机制目前仍无统一观点。本文主要综述了近几年来，关于铝对中枢神经系统的毒作用机制的各种学说，为深入研究铝的神经毒性机制提供新的途径和方法。

浅谈大学新入职青年教师的困与惑——新职位、新角色、新挑战

大学新入职青年教师面临的不单是新的职位,更多的是在工作中尽快适应新的环境,快速完成从学生到教师的角色转换,面临和应对新的挑战。这些挑战主要来源于新入职青年教师教学经验不足,而掌握问题所在,然后有针对性地进行训练,通过备课、课堂教学训练,最后总结教学效果等环节,提升青年教师的教学水平。

毒理学试验教学的问题与思考

毒理学是研究毒物与机体的交互作用及其机制,并进行安全性评价和危险度管理的科学,是公共卫生与预防医学的基础学科。毒理学研究内容包括描述毒理学、机制毒理学和管理毒理学,涉及生理学、生物化学、细胞生物学、病理学、药理学和预防医学等多个学科。毒理学试验课程是预防医学、

牵伸联合低强度脉冲超声对兔膝关节挛缩影响的研究

目的:观察牵伸联合低强度脉冲超声(low intensity pulsed ultrasound,LIPUS)对固定诱导的兔膝关节囊纤维化的影响,并明确牵伸联合LIPUS对兔膝关节源性挛缩的影响。方法:选取新西兰白兔30只,随机分为以下5组,每组6只:对照组(C)、自然恢复组(NR)、LIPUS组(LT)、牵伸组(ST)、牵伸联合LIPUS组(CT)。C组不进行任何处理,其余4组将兔左膝关节伸直位固定6周后,再解除固定分为:NR组进行自然恢复,LT组进行LIPUS干预,ST组进行牵伸干预,CT组进行牵伸联合LIPUS干预。各组干预时间为4周,通过关节活动测量仪检测各组膝关节源性挛缩角度、马松(Masson)染色分析膝关节前囊胶原沉积百分比、蛋白质免疫印迹分析(Western blot)膝关节前囊内转化生长因子(TGF)-β1、α-平滑肌肌动蛋白(SMA)、Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、Ⅲ型胶原(CollagenⅢ)的蛋白表达水平。结果:在干预4周后,与NR组比较,LT组、ST组、CT组均能有效减小膝关节源性挛缩角度(P<0.05);LT组、ST组、CT组均能减轻关节囊纤维化(P<0.05),表现为胶原沉积百分比降低(P<0.05)以及TGF-β1、α-SMA、CollagenⅠ、Colla⁃genⅢ的蛋白表达水平降低(P<0.05)。值得注意的是,CT组取得最好的干预效果(与其他干预组相比均P<0.05)。结论:牵伸联合低强度脉冲超声通过降低膝关节囊内胶原沉积和TGF-β1、α-SMA、CollagenⅠ、CollagenⅢ的蛋白水平表达来减轻关节囊的纤维化,继而改善膝关节源性挛缩角度。

纳米氧化锌诱发人心肌细胞AC16氧化应激损伤及转录组分析改变

目的探讨纳米氧化锌(ZnO NPs)对人心肌细胞AC16的氧化应激损伤,并从转录组层面分析ZnO NPs作用机制。方法利用动态光散射法(DLS)对ZnO NPs进行表征检测。将AC16细胞暴露于不同剂量、不同时间的ZnO NPs后,使用CCK-8法测定细胞存活率。将AC16细胞分为对照组、ZnO NPs(50、100、200μmol/L)暴露组,处理6 h后检测细胞线粒体膜电位(MMP)及活性氧自由基(ROS)。将AC16细胞分为对照组、50μmol/L ZnO NPs组、200μmol/L ZnO NPs组,暴露6 h后使用TRIzol提取细胞总RNA,进行转录组分析,并对差异表达基因进行基因本体(GO)、京都基因和基因组百科全书(KEGG)富集分析。结果DLS法结果显示,流体动力学直径为(192.2±1.63)nm,Zeta电位为(-23.26±1.05)m V。CCK-8结果显示,随着ZnO NPs暴露的剂量与时间的增加,AC16细胞存活率下降。荧光定量法观察显示,随着ZnO NPs暴露剂量的增加,MMP在100μmol/L ZnO NPs时下降(P<0.05),ROS在50μmol/L ZnO NPs时升高(P<0.05)。转录组分析结果显示,50μmol/L ZnO NPs组与对照组相比共富集到1071个基因,其中上调基因561个,下调基因510个;200μmol/L ZnO NPs组与对照组相比共富集到7164个基因,其中上调基因4098个,下调基因3066个。GO与KEGG分析结果显示,差异基因主要富集于活性氧、抗氧化活性、线粒体细胞色素C的释放、凋亡等信号通路。结论ZnO NPs可导致AC16细胞存活率下降,诱发细胞线粒体损伤和氧化应激,其中ROS介导的氧化应激与线粒体功能改变是ZnO NPs致AC16细胞毒性的重要毒作用机制。

利福平对小鼠肝细胞胆汁酸转运体Bsep和Mrp2表达与定位的影响

目的利福平(Rifampicin,RIF)具有肝毒性,但其机制尚不清楚。本研究在RIF诱导的肝内胆汁淤积小鼠中,探讨RIF对肝细胞胆汁酸转运体胆汁酸输出泵(bile salt exportpump,Bsep)和多药抵抗相关蛋白-2(multidrug resistance-associated protein-2,Mrp2)表达和定位影响。方法 48只♀ICR小鼠随机分为4组,RIF1wk组:经灌胃给予RIF(200mg.kg-1.d-1),连续1周,于末次给药后6h取材;RIF6h组:单次灌胃给予RIF(200mg.kg-1)后6h取材;RIF1周对照组(CON1wk)与RIF6h对照组(CON6h):经灌胃给予等容积生理盐水。所有小鼠均收集血液和肝组织,常规生化检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TB)和结合胆红素(DB),并检测小鼠血清和肝组织总胆汁酸(TBA)水平。HE染色分析肝组织病理改变。RT-PCR测定肝脏肝细胞胆汁酸转运体Bsep和Mrp2mRNA表达。免疫荧光法分析Bsep和Mrp2在肝细胞的位置。结果给予RIF1周后,小鼠血清TB由(1.25±0.69)μmol.L-1上升至(65.73±12.08)μmol.L-1,上升近70倍,DB由(0.77±0.40)μmol.L-1上升至(53.33±12.43)μmol.L-1,上升约80倍,ALP由(110.2±13.8)U.L-1上升至(279.5±80.4)U.L-1,上升约1.5倍,TBA由(3.15±0.89)μmol.L-1上升至(13.54±6.51)μmol.L-1,上升约5倍并伴有血清ALT和AST轻度升高;肝脏组织TBA由(0.15±0.04)μmol.g-1liver上升至(0.30±0.19)μmol.g-1liver,上升约2倍;肝脏组织HE染色显示肝细胞出现脂肪变性、轻度坏死和炎症。单次给予RIF6h后血清TB、DB、ALP、ALT、AST和TBA明显上升,但未观察到小鼠肝脏组织病理发生改变。免疫荧光分析显示,给予小鼠RIF1wk与单次给予RIF6h后肝细胞中Bsep和Mrp2的定位发生了改变。而无论单次给予RIF还是连续给药1周,肝细胞Bsep和Mrp2mRNA表达水平均未发生变化。结论肝细胞胆汁酸转运体Bsep和Mrp2定位改变可能是RIF诱发肝内胆汁淤积的重要机制。

N-乙酰半胱氨酸对小鼠免疫性肝损伤的影响

目的研究N-乙酰半胱氨酸(NAC)对卡介苗(BCG)与细菌脂多糖(LPS)引起小鼠免疫性肝损伤的影响。方法建立BCG/LPS引起的小鼠免疫性肝损伤模型。采用两种处理方式给予NAC:方式A,于LPS处理前4h和15min分别经腹腔注射给予NAC(预处理);方式B,于LPS处理后0h和4h分别经腹腔注射NAC(后处理)。LPS处理后8h剖杀动物,取血和肝脏,并检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性与一氧化氮(NO)水平、肝脏组织谷胱甘肽(GSH)与丙二醛(MDA)含量以及肿瘤坏死因子α(TNF-α) mRNA表达水平。结果与模型组比较,NAC预处理组小鼠血清ALT活性下降,肝脏TNF-α mRNA表达明显减少,而体内NO生成和肝脏脂质过氧化水平无改变;NAC后处理组与模型组相比,小鼠死亡率升高,血清NO生成增加,肝脏GSH含量进一步下降,而小鼠血清ALT活性未见明显改变。结论NAC对小鼠免疫性肝损伤有双重效应,NAC预处理对抗BCG/LPS引起的小鼠免疫性肝脏损伤,NAC后处理加重BCG/LPS引起的氧化应激并升高动物死亡率。

孕期补充锌减轻镉引起的小鼠胚胎发育毒性

目的研究孕期补充锌对镉所致胎儿死亡、外观畸形和生长发育迟缓的保护作用。方法孕鼠随机分为对照组、单纯锌处理组、单纯镉处理组和锌+镉处理组。单纯镉处理组和锌+镉处理组孕鼠于受孕第9天经腹腔注射氯化镉(4.5 mg/kg),锌处理组和锌+镉处理组小鼠于受孕第1～18天饮用硫酸锌水溶液(186 mg/L)。于受孕第18天剖杀所有孕鼠,记录活胎、死胎和吸收胎数,称量活胎体重,测量胎鼠身长,并评价胎鼠外观畸形和骨骼发育情况。结果与对照组比较,镉处理组平均每窝死胎数和畸形胎鼠数明显升高,活胎平均身长和体重明显降低,胸骨、尾骨和后掌(趾)骨骨化程度明显滞后;孕期补充锌对抗镉引起的胎儿死亡和致畸作用,减轻镉引起的胎鼠生长发育迟缓和骨骼发育不全。结论孕期补充锌明显减轻镉引起的小鼠胚胎发育毒性。

褪黑素保护细菌脂多糖引起的小鼠宫内胎儿死亡和生长发育迟缓

目的研究褪黑素（MT）对细菌脂多糖（LPS）引起宫内胎儿死亡（IUFD）和生长发育迟缓（IUGR）的保护作用。方法实验1：LPS组小鼠于受孕第15-17天每天经腹腔注射LPS（75μg／kg），LPS＋MT组在LPS处理前和（或）处理后经腹腔注射MT，生理盐水和单纯MT处理作为对照。所有孕鼠于受孕第18天处死，统计活胎、死胎和吸收胎数，称量活胎体重，测量胎鼠身长和尾长，并对胎鼠骨骼发育情况进行评价。实验2：LPS组小鼠于受孕第16天经腹腔一次性注射75μg／kg LPS，LPS＋MT组孕鼠于LPS处理前和（或）处理后经腹腔注射MT，生理盐水和单纯MT处理作为对照。LPS处理后6h处死孕鼠，取母肝和胎盘，检测丙二醛和谷胱甘肽水平。结果LPS＋MT处理组宫内胎儿死亡数显著低于单纯LPS处理组，并呈明显剂量-效应关系；MT预＋后和后处理均显著减轻LPS引起生长发育迟缓，并逆转LPS引起的枕骨骨化不全。MT预＋后处理明显减轻LPS引起的母肝和胎盘脂质过氧化，但对LPS所致GSH含量降低无明显影响。结论MT通过其抗氧化功能保护LPS引起的IUFD和IUGR。

褪黑素对GalN/LPS引起小鼠急性肝损伤的保护作用

目的研究褪黑素(MT)对氨基半乳糖(D-GalN)与细菌脂多糖(LPS)共处理引起小鼠急性肝损伤的保护作用。方法建立GalN/LPS引起的小鼠急性肝脏损伤模型。于GalN/LPS共处理前30min和处理后1h、2h分别经腹腔注射给予MT,经GalN/LPS共处理8h后剖杀动物,取血和肝脏,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)活力、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和一氧化氮(NO)水平,测定肝脏组织Caspase-3活性、还原性谷胱甘肽(GSH)含量、谷胱甘肽还原酶(GSH-RD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性,采用DNA梯度分析实验检测肝脏凋亡,并对小鼠部分肝脏进行病理组织学检查。结果与模型组比较,MT处理组小鼠血清ALT活力和TNF-α含量明显下降,肝脏Caspase-3活性、GSH损耗明显降低,肝组织GSH-RD和GSH-PX活性明显升高,DNA凋亡条带较前有所减弱,而MT对体内NO生成无明显影响。结论MT对GalN/LPS引起小鼠急性肝损伤有保护作用,主要通过其抗炎、抗氧化和抗凋亡作用。

4-苯基丁酸对果糖所致非酒精性脂肪肝的保护效应

目的探讨4-苯基丁酸(PBA)对饮用果糖所致小鼠非酒精性脂肪肝的保护作用。方法 48只♀ICR小鼠随机分为4组。对照组给予普通自来水喂养8周;果糖组给予30%果糖水溶液喂养8周;PBA组给予普通自来水喂养8周,最后2周经腹腔注射给予PBA(100 mg.kg-1);PBA+果糖组给予富含30%果糖水溶液喂养8周,最后2周经腹腔注射给予PBA(100 mg.kg-1)。各组小鼠均自由进食标准饲料。实验结束后立即剖杀小鼠,采集血清和肝组织,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆固醇(TCH)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、极低密度脂蛋白(VLDL)和肝脏组织TCH和TG;HE染色分析肝脏组织病理学改变;油红O染色分析肝脏脂质沉积。RT-PCR测定小鼠肝脏脂肪酸合成酶(fas)、乙酰辅酶A羧化酶(acc)和硬脂酰辅酶A去饱和酶-1(scd-1)mRNA表达。结果与对照组相比,果糖组小鼠血清和肝脏TG及肝脏TCH的含量明显升高;HE染色显示,果糖组小鼠肝细胞脂肪变性;油红O染色证实,果糖组小鼠肝脏有明显脂质沉积;进一步研究显示,与对照组相比,果糖组小鼠肝脏fas,acc和scd-1 mRNA水平均明显上调。果糖组与PBA+果糖组比较显示,PBA干预可明显降低血清、肝脏TG含量及肝脏TCH含量,减轻果糖引起的肝脏脂质沉积;抑制果糖引起的肝脏fas,acc和scd-1表达上调。结论 PBA对饮用果糖所致的小鼠非酒精性脂肪肝有保护作用。

SREBP-1c激活在细菌脂多糖引起小鼠肝脏脂质沉积中的作用

目的通过建立细菌脂多糖(LPS)致小鼠急性炎症反应模型,观察LPS对小鼠肝脏脂质沉积的影响并初步探讨固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)激活在LPS引起肝脏脂质沉积中的作用。方法雄性ICR小鼠随机分为对照组和LPS组,分别经腹腔注射给予生理盐水和LPS(2 mg/kg),LPS处理24 h后称量小鼠体重,眼球取血后剖杀小鼠,取肝脏并称量肝组织重量;检测血清和肝脏甘油三酯(TG)、胆固醇(TCH)含量;HE染色法分析肝脏组织病理学改变;油红O染色法分析肝脏脂质沉积;RT-PCR检测脂肪酸合成酶(FAS)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)和硬脂酰辅酶A去饱和酶-1(SCD-1)的mRNA水平;Western blot检测肝脏脂质合成的转录因子碳水化合物反应元件结合蛋白(ChREBP)和SREBP-1c的核蛋白水平。结果与对照组相比,LPS组小鼠肝脏重量及脏器系数明显增加;血清和肝脏TG含量明显升高;HE染色显示LPS组小鼠肝脏出现明显脂肪变性、轻度坏死及炎症反应;油红O染色显示LPS组小鼠肝脏发生明显脂质沉积;RT-PCR结果显示LPS明显上调FAS和ACCmRNA水平;Western blot结果显示LPS处理后小鼠肝脏核蛋白SREBP-1c水平明显升高。结论 LPS可能通过激活肝脏SREBP-1c,继而上调从头合成脂肪酸关键酶FAS和ACC,引起小鼠肝脏脂质合成增加,最终导致肝脏脂质沉积。

内质网应激在四氯化碳致急性肝损伤中的作用

目的探讨内质网应激(ERS)在四氯化碳(CCl4)致急性肝损伤中的作用。方法 24只成年健康♂ICR小鼠经腹腔注射CCl4(300μl·kg-1),于CCl4处理后不同时点(0、2、6、12、24和72 h)剖杀小鼠,采集血清和肝脏组织,检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)活性;TUNEL技术检测肝脏细胞凋亡;Western blot检测肝脏GRP78、CHOP、p-IRE1α、p-JNK和裂解型Caspase-12蛋白水平;免疫组化检测肝脏GRP78分布。结果与对照组相比,CCl4处理组小鼠肝脏重量、肝脏系数和ALT水平均明显升高;病理组织学结果显示,CCl4处理引起肝细胞凋亡和坏死,以CCl4处理后24 h损伤最明显;进一步观察发现,CCl4处理明显升高肝脏GRP78、p-IRE1α和pJNK蛋白水平,上调肝脏CHOP蛋白表达,导致肝脏细胞凋亡相关蛋白Caspase-12裂解。结论 ERS在CCl4致急性肝损伤过程中可能起重要作用。