干细胞条件培养液促进小鼠卵母细胞体外成熟

目的：研究骨髓问充质干细胞（MSCs）条件培养液对小鼠未成熟卵母细胞体外成熟的作用。方法：分离、培养小鼠MSCs，获得MSCs条件培养液。收集3类生发泡期卵母细胞，分别在对照培养基和条件培养液中培养，观察卵母细胞成熟率，判断最佳时间点；FDA、Hoechst33258和PI联合染色评价细胞活力；荧光标记检测皮质颗粒分布、迁移及纺锤体复合物的形成情况。结果：条件培养液组3类生发泡期卵母细胞的成熟率高于对照培养基组；其中，完全／大部分裸露的生发泡卵母细胞和周围有疏松的颗粒细胞包裹的生发泡卵母细胞的最佳体外成熟时间为16h，有完整的数层颗粒细胞紧密包裹的生发泡卵母细胞的最佳体外成熟时间为24h。体外成熟卵母细胞活力良好，皮质颗粒分布及纺锤体复合物形成与体内成熟卵母细胞一致。结论：MSCs条件培养液有利于小鼠体外成熟卵母细胞核、细胞质同步成熟，提高卵母细胞质量，是一种较好的体外成熟培养体系。