IgA类单克隆抗体血型定型试剂的实验室研究及临床应用

目的:用实验室手段和大样本临床验证方法,研究IgA类抗血型单克隆抗体(mAb)用作人血型定型试剂的可行性。方法:根据《中国生物制品规程》、新药临床验证以及有关要求,检测规模化生产的mAb的有关指标,并在人群中用反向定型等方法进行验证。结果:所有指标均达到或超过国家标准,临床应用未出现错判和误判。结论:所生产的mAb完全可以用于中国人ABO血型定型。

抗血型物质杂交瘤细胞悬浮培养研究

诱导、选育了适于连续悬浮培养的抗人血型杂交瘤细胞株，并初步建立了一种血型定型试剂悬浮培养生产工艺，抗体效价和亲和力等所有指标均达到或超过国家标准。它是一种经济、简单、切实可行的大生产方法。此外，为用发酵罐大规模生产血型定型试剂提供了物质基础和初步的生产模式。

沙克沙豆凝集素的分离纯化及其性质的研究

用PBS抽提、硫酸铵分段沉淀及猪甲状腺球蛋白—Sepharose 4B亲和层析可从腰点沙克沙(phaseolus vulgaris L)中分离得沙克沙凝集素,达到电泳纯。SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳得出一条带,分子量为30.26×10~3u,表明该凝集素由单一亚基组成。其含糖量为5%。该凝集素能凝集兔、小鼠、鸡、人A、B、O红细胞,其凝集作用可被猪甲状腺球蛋白明显抑制。该凝集素可有效地促进淋巴细胞转化和分裂;体外实验表明,它可凝集Sp 2/0骨髓瘤细胞。

不同年龄组人红细胞内ATP含量

本文用萤光素－萤光素酶生物发光法测定了不同年龄组人红细胞内ＡＴＰ含量，发现老年组和脐血组红细胞内ＡＴＰ含量分别为１．５５±０．２８ｍｍｏｌ·Ｌ^（－１）ＲＢＣ和１．５６±０．２５ｍｍｏｌ·Ｌ^（－１）ＲＢＣ，中年组和青年组红细胞内ＡＴＰ含量分别为１．４５±０．１２ｍｍｏｌ·Ｌ^（－１）ＲＢＣ和１．４２±０．１２ｍｍｏｌ·Ｌ^（－１）ＲＢＣ，老年组和脐血组红细胞内ＡＴＰ含量明显高于中青年组。

IgA类鼠抗人A血型单抗的研制和临床应用

应用Ｂ淋巴细胞杂交瘤技术，以Ａ血型物质ＭＳＳ１０％２×（Ａ１）为抗原，经ＰＥＧ细胞融合，获得两株分泌ＩｇＡ类鼠抗人Ａ血型单抗杂交瘤细胞，细胞培养上清液效价为１０２４～２０４８，亲和力２～３ｓ。其中２Ｈ１０Ｅ１１杂交瘤细胞经血凝特异性试验、血凝抑制试验、吸收放散试验、红细胞标准谱细胞试验，表明２Ｈ１０Ｅ１１单抗仅对Ａ血型红细胞特异。２Ｈ１０Ｅ１１细胞置液氮中贮存３年，复苏传代后分泌抗体能力不变。单抗置５６℃水浴３０ｍｉｎ，－２０℃和３７℃反复冻融３次，效价不变。临床试用近百万人次，无一例错型，准确率１００％。证明可以替代标准血清，用于临床血型定型。

表达Epstein-Barr病毒壳抗原gp125重组痘苗病毒的免疫原性

目的研究基因重组ＥｐｓｔｅｉｎＢａｒ病毒ｇｐ１２５蛋白的免疫原性。方法用表达ｇｐ１２５的重组痘苗病毒免疫中国本兔，用免疫荧光法检测免疫血清的抗体效价并研究其特异性。结果重组痘苗病毒在感染细胞内特异性地表达ｇｐ１２５，活病毒能够刺激兔产生高滴度的特异性抗体，经２次免疫，免疫荧光效价达１∶３２０。结论基因重组ｇｐ１２５和天然的该蛋白一样，有较强的免疫原性。

老化和被氧化的红细胞内ATP含量的变化

本文用荧光素－荧光素酶生物发光法测定了老化和被氧化红细胞内ＡＴＰ含量的变化，结果表明老化的红细胞和被外源性Ｈ２Ｏ２氧化的红细胞，其内ＡＴＰ含量均明显降低，而麦芽酚对红细胞氧化具有保护作用，能减少氧化红细胞内ＡＴＰ含量的变化。

急性粒细胞白血病染色体杂合性缺失

目的探讨染色体微卫星不稳定性和杂合性缺失与急性白血病发生的相关性。方法应用PCR-非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳-银染技术检测7q22-36微卫星不稳定性和杂合性缺失现象。结果在24例急性粒细胞性白血病中,有9例发生了杂合性缺失,发生率为37·50%,D7S515、D7S523、D7S636、D7S487的发生率分别为16·67%(4/24)、8·33%(2/24)、8·33%(2/24)和4·17%(1/24)。结论白血病患者染色体上的多位点微卫星改变,提示白血病的发生、发展与染色体的多部位、多步骤改变有关。

抗AB血型单克隆抗体的研制和鉴定

抗ＡＢ血型单克隆抗体的研制和鉴定＊２３００３２安徽医科大学分子生物学研究室徐镜庾蕾熊江霞王晓琴陈华堂淋巴细胞杂交瘤技术［１］的问世、血型单抗的产生为人类ＡＢＯ血型分型提供了新的手段。本室继１９９０年研制成抗Ａ、抗Ｂ和抗Ｈ血型单抗后［２、３］，现又研制...

抗人H血型物质(抗O血型)单抗的研制和临床验证

应用淋巴细胞杂交瘤技术，以Ｈ血型物质为抗原，经聚乙二醇细胞融合，获得一株分泌ＩｇＧ类抗人Ｈ血型抗原的单克隆抗体杂交瘤２Ｇ６－Ｈ８，细胞培养上清液效价１：１２８，亲和力１０秒。经血凝特异试验，血凝抑制试验，吸收放散试验及临床验证，表明２Ｇ６－Ｈ８，单抗对人Ｈ血型抗原特异凝集，主要为抗Ｏ血型单抗。

基因重组Epstein-Barr病毒壳抗原gp125的免疫原性

天然的Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｒ病毒ｇｐ１２５蛋白有极强的免疫原性，是ＥＢＶ初次感染的主要免疫原，也是诊断ＥＢＶ既往感染和新近感染最有价值的抗原。文章在用重组痘苗病毒表达ｇｐ１２５的基础上，研究了表达产物的特异性，并用活的重组痘苗病毒免疫中国本兔，用表达产物免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，研究了其免疫原性和免疫抗体的特异性。结果显示：重组痘苗病毒在感染细胞内特异性地表达ｇｐ１２５，活病毒及表达产物能诱导动物产生较高滴度的特异性抗体。活病毒免疫兔，免疫荧光效价达１３２０；表达产物免疫小鼠，免疫荧光效价达１６４０。

免疫酶法检测鼻咽癌病人血清IgA/gp125抗体

建立了用表达Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒ病毒壳抗原ｇｐ１２５的重组痘苗病毒感染细胞为抗原，检测ＩｇＡ／ｇｐ１２５抗体的免疫酶法，并检测了鼻咽癌、其它肿瘤病人和正常人的ＩｇＡ／ｇｐ１２５抗体，其灵敏度远远高于ＩｇＡ／ＥＡ，接近于ＩｇＡ／ＭＡ和ＩｇＡ／ＶＣＡ，特异性高于ＩｇＡ／ＭＡ和ＩｇＡ／ＶＣＡ，接近于ＩｇＡ／ＥＡ。

用重组抗原检测鼻咽癌病人血清IgA/gp125抗体

用重组抗原检测鼻咽癌病人血清ＩｇＡ／ｇｐ１２５抗体薛绍礼１皮国华２谷淑燕２李平１抗Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒ病毒（ＥＢＶ）壳抗原（ＶＣＡ）ＩｇＡ抗体，是鼻咽癌（ＮＰＣ）早期诊断的一个重要血清学指标。曾先后用免疫荧光法（ＩＦ）和免疫酶法（ＩＥ）进行检测［１...

(鱼章)胺对无脊椎动物的生理作用

鱆胺是自然界存在的一种生物胺,其化学名称为对羟苯-β-羟乙胺,又称对羟基苯乙醇胺或β-羟酪胺。由于最先是在章鱼的唾液腺中发现的,所以俗称鱆胺。随着高敏感、高特异性检测技术的发展和应用,在无脊椎动物的中枢神经系统和周围神经系统以及非神经系统的许多组织,如唾液腺、鳃下腺、心、肾、体液中均发现有大量鱆胺存在。神经元末梢能合成、贮存和释放鱆胺,释放出来的鱆胺能被酶催化降解。研究发现鱆胺受体是一种仅对鱆胺敏感的腺苷酸环化酶,它能促进环腺苷酸(cAMP)的合成,