尼古丁和烟草浸提液对人牙龈成纤维细胞生长和贴附能力的影响

目的 :体外观察尼古丁和烟草浸提液 (ST)对人牙龈成纤维细胞的生长和贴附影响。方法 :用不同浓度的尼古丁和ST作用于人牙龈成纤维细胞 ,用MTT法检测细胞的生长和贴附情况。结果 :随尼古丁和ST浓度的增加 ,细胞的生长率逐渐下降 ,尼古丁和ST对细胞生长半抑制浓度 (IC50 )分别为 0 .0 95 g/L和 11.88g/L ;与对照组相比 ,当尼古丁及ST浓度分别大于 0 .0 1g/L和 6 .2 g/L时差异有显著意义。而对细胞贴附的影响表明 ,随着尼古丁和ST浓度的增加 ,细胞的贴附率逐渐下降 ,尼古丁和ST对细胞贴附的IC50 分别是 0 .6 g/L和 10 .33g/L ;与对照组相比 ,当尼古丁及ST浓度分别大于 0 .1g/L和 12 .4 g/L时差异有显著意义。结论 :尼古丁和浸提取液均可抑制人牙龈成纤维细胞的生长和贴附 。

骨保护素基因修饰的pSecTag2/B载体的构建

目的:克隆骨保护素基因(osteoprotegerin,OPG)的cDNA,构建pSecTag2/B-OPG真核分泌表达穿梭载体,为组织工程和基因工程联合治疗牙周病提供物质基础。方法:提取人胚胎肾293细胞的总RNA,设计和合成特异性引物,进行逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),扩增出具有抑制破骨细胞功能的OPG基因cDNA,并将其重组到pSecTag2/B载体中,测序鉴定。结果:从293细胞的总RNA中反转录扩增得到编码骨保护素的基因片段,重组到pSecTag2/B载体。经测序证实,此基因与GenBank中[gi:33878056]提供的序列完全一致;重组质粒经PCR、HindIII单酶酶切及EcoRI和BamHI双酶酶切,电泳显示均能切下与预期大小相符的片段。结论:本研究成功构建了pSecTag2/B-OPG分泌表达穿梭载体。

雌激素受体XbaI和PvuⅡ基因多态性与侵袭性牙周炎的相关研究

目的:探讨侵袭性牙周炎(aggressive periodontitis,AgP)易感性与雌激素受体XbaI和PvuⅡ基因多态性的关系。方法:收集48例侵袭性牙周炎(AgP)患者和60例牙周健康对照组的颊黏膜拭子,采用Chelex-100法提取DNA,应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性技术检测雌激素受体XbaI和PvuⅡ的等位基因及基因型频率在各组之间分布的差异。结果:XbaI基因型分布在AgP组与对照组、AgP组女性与对照组女性、AgP组男性与对照组男性之间均有显著性差异(P<0.05)。其等位基因频率在女性组间有统计学意义(P<0.05)。PvuⅡ基因型分布在AgP组与对照组之间均无明显差异,其等位基因频率分布有明显差异(P<0.05)。多因素logistic回归分析显示男性患病的可能性小(OR=0.352);随年龄增大患病的可能性变小(OR=0.950);当其他条件一定时,xx、Xx基因型的人患病的可能性小(OR值分别为0.678,0.224)。结论:侵袭性牙周炎易感性与雌激素受体XbaI基因型分布有关,XX基因型最易患病,其次为xx,Xx基因型。

半导体激光在牙齿美白术中的应用

目的:了解半导体激光在牙齿美白术中的应用。方法:随机选择78例患者,女性患者比男性多,约4:1,平均年龄33岁。35%H2O2作为美白剂,美白过程中以半导体激光进行牙齿美白催化。结果:经过4个循环近1h的牙齿激光美白,牙齿在色阶上有显著性差异,美白过程中,患者有不同程度酸痛感,24h后不适感消失。结论:半导体激光美白牙齿效果显著,对周围组织刺激性小,临床易于推广应用。

应用富血小板血浆联合根面处理促进牙周组织再生的疗效评价

目的:评价应用富血小板血浆联合根面处理促进牙周组织再生的临床效果。方法:将26例患者的26颗Ⅱ°根分叉病变磨牙进行随机分组治疗。对照组14颗患牙施行常规牙周组织引导再生术(Bio-oss骨粉+生物膜);实验组12颗患牙是在对照组手术方法的基础上,先用盐酸米诺环素处理根面1min,生理盐水冲洗后,应用富血小板血浆(PRP)与骨粉混合植入根分叉区,覆盖生物膜。比较两组患牙根分叉病变位点处的治疗前后的探诊深度(PD)、水平探诊深度(HPD)和骨密度(BMD)3项指标。观察时间为术前(基线)、术后3个月和6个月。结果:术后两组患牙根分叉病变位点处的PD、HPD和BMD 3项指标均较基线时有明显改善(P<0.01),且实验组的改善优于对照组,两组间的差异有统计学意义(P<0.05)。结论:应用富血小板血浆联合根面处理能够促进常规牙周再生性手术的临床效果。

骨保护素修饰的Beagle犬骨髓基质细胞表达体系的建立与鉴定

目的利用pSecTag2/B-OPG真核分泌表达穿梭载体,建立经骨保护素基因(OPG)修饰的Beagle犬骨髓基质细胞(BMSC)瞬时表达体系并检测其表达能力,为基因工程与组织工程联合治疗牙周病提供细胞基础。方法体外分离、培养Beagle犬BMSC,通过脂质体法将已鉴定的目的基因瞬时转染至BMSC,并用RT-PCR鉴定OPG是否有转录,同时通过Westernblot方法检测OPG在6周内的表达水平。结果重组质粒pSecTag2/B-OPG经HindⅢ单酶切及EcoRⅠ、BamHⅠ双酶切,电泳显示切下的片段均与预期大小相符,经测序证实此基因与GeneBank中[gi:33878056]提供的序列一致;鉴定正确的重组质粒在BMSC中有转录,并且在39d内都明显有OPG表达。结论建立了骨保护素基因修饰的骨髓基质细胞瞬时表达体系。

骨保护素配体在大鼠牙龈炎症组织中的表达

目的观察骨保护素配体(Osteoprotegerin Ligand,OPGL)在鼠炎症性牙龈组织中的表达。方法12只Wistar大鼠随机分为实验组和正常对照组。实验组用丝线结扎大鼠第二磨牙并喂高糖水方法建立牙龈炎模型,术后1周处死动物,制作组织标本,用免疫组织化学方法检测OPGL在大鼠牙龈组织中的表达。结果实验组术后3d局部检查即显示牙龈组织探诊出血;术后1周牙龈探诊出血明显,免疫组织化学结果显示OPGL在鼠炎症性牙龈组织中的阳性表达细胞明显增多;OPGL表达细胞主要为中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、牙龈上皮细胞、成纤维细胞。对照组牙龈组织内OPGL阳性表达细胞数目较少。结论大鼠炎症性牙龈组织中OPGL表达升高,提示OPGL可能与牙龈炎症有关。

变链素的纯化

目的从变异链球菌临床株中分离纯化变链素,为进一步从分子水平研究变链素奠定基础。方法通过抑菌活性检测,从变异链球菌临床株中选择出抑菌活性较强的菌株。用氯仿抽提法从该菌株培养液中粗提变链素,经固相萃取和反相高效液相色谱(RP-HPLC)对粗提物进行纯化。结果获得变链素活性较强的菌株1G。从其200 mL液体培养基中粗提出变链素约15μg,经固相萃取柱洗脱,再经过RP-HPLC的2次纯化,得到有抑菌活性的成分,此为纯化的变链素。结论变链素相对分子质量小,分离提纯步骤复杂,本实验得到纯化的变链素,为下一步研究变链素的氨基酸序列和基因序列奠定了基础。

烟草对牙周成纤维细胞影响的实验观察

目的 观察尼古丁和烟草浸提液 (smokelesstobaccoextract,ST)对牙周膜成纤维细胞(periodontalligamentfibroblasts,PDLFs)的形态、超微结构及增殖贴附的影响。 方法 用不同浓度的尼古丁和ST作用于人PDLFs ,细胞爬片作HE染色 ,光学显微镜观察细胞的形态 ;透射电镜作超微结构观察 ;MTT法分别于第 5天和 2h测细胞的增殖和贴附情况。结果 随着尼古丁和ST浓度的增加 ,细胞排列的极性消失 ,细胞变小并由长梭形变成椭圆形或圆形 ;超微结构显示 ,细胞器成分减少 ,尤其是粗面内质网和高尔基体减少 ,含胶原蛋白的分泌小泡减少 ,波形丝、微管分解消失。细胞核有程度不同的减小或核畸变 ;细胞的增殖和贴附能力呈浓度依赖性抑制。结论 尼古丁和ST可改变PDLFs的形态和结构 ,抑制细胞的胶原合成 ,改变细胞的支架结构 ,从而改变细胞的贴附和增殖 。

原位杂交方法检测白细胞介素1及肿瘤坏死因子α在鼠根尖周炎中的基因表达

目的 通过观察鼠根尖周炎中白细胞介素 1(interleukin 1,IL 1)、肿瘤坏死因子α(tumornecrosisfactor α ,TNF α)的基因表达 ,了解它们在根尖周炎致病机制中的作用。方法 建立大鼠根尖周炎动物模型 ,于术后 1、2、3、4周取下颌骨组织 ,摄X线牙片、制作石蜡切片 ;用原位杂交技术测定IL 1α、IL 1β及TNF αmRNA在根尖周炎组织中的表达 ,进行半定量分析 ,并将其与根尖阴影面积作相关分析。结果 术后 1～ 3周根尖周炎组织中IL 1α、IL 1β、TNF α表达量逐渐增高 ,至第 3周阳性细胞数达峰值 ,呈时间依赖关系 ,4周后有所下降 ;IL 1α和TNF α表达量远高于IL 1β表达量 ;并且IL 1α和TNF αmRNA阳性表达细胞数与根尖阴影面积呈显著正相关关系 (IL 1α:r =0 875 ,P <0 0 0 1;TNF α:r=0 85 8,P <0 0 0 1) ,IL 1α和TNF α间亦呈显著正相关 (r =0 96 9,P <0 0 0 1)。阳性细胞类型为多形核粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞、浆细胞、成纤维细胞及血管内皮细胞等。结论 IL 1α和TNF α是鼠根尖周炎中的主要细胞因子 。

Mini Five刮治器结合盐酸米诺环素治疗磨牙Ⅱ度根分叉病变的疗效评价

目的:评价Mini Five型Gracey手工刮治器结合盐酸米诺环素治疗磨牙Ⅱ度根分叉病变的的临床疗效。方法:32例患者的68个Ⅱ度根分叉病变磨牙进行配对分组治疗。实验组患牙在常规超声龈下刮治后应用Mini Five型Gracey手工刮治器进行根面平整,局部注入盐酸米诺环素软膏,每周1次,共4次;对照组患牙在常规超声龈下刮治后应用标准型Gracey手工刮治器进行根面平整。比较两组患牙治疗后5周的菌斑指数(PLI)、龈沟出血指数(BI)、探诊深度(PD)和水平探诊深度(HPD)四项临床指标以及治疗成功率。结果:①.两组患牙的PLI、BI、PD和HPD均较基线时有改善(P<0.05);②.实验组指标的改善明显优于对照组,两组间的差异有统计学意义(P<0.01),且实验组的成功率为85.29%,明显高于对照组52.94%(P<0.01)。结论:应用Mini Five型Gracey手工刮治器结合盐酸米诺环素软膏治疗磨牙Ⅱ度根分叉病变,能取得较好的临床效果。

磨牙Ⅱ度根分叉病变治疗的研究进展

根分叉病变的骨质破坏是牙周病中较为常见损害,其中Ⅱ度根分叉病变是临床最常见的磨牙根分叉病变。在治疗过程中,由于其特殊的位置和解剖特点,决定了根分叉病变在治疗上的复杂性。现将磨牙Ⅱ度根分叉病治疗的研究进展进行综述。

釉基质蛋白影响牙周组织再生的研究进展

众多研究表明由Hertwig上皮根鞘内层的成釉细胞分泌的釉基质蛋白和釉基质蛋白样因子可以调节参与牙周组织再生细胞的活性,参与诱导形成新的牙骨质和牙周支持组织,本文就近年来釉基质蛋白诱导牙周组织再生方面的研究进展做一综述。

釉基质蛋白影响牙周组织再生的研究进展

众多研究表明由Hertwig上皮根鞘内层的成釉细胞分泌的釉基质蛋白和釉基质蛋白样因子可以调节参与牙周组织再生细胞的活性,参与诱导形成新的牙骨质和牙周支持组织,本文就近年来釉基质蛋白诱导牙周组织再生方面的研究进展做一综述。