亚抗菌剂量的米诺环素对大鼠实验性牙周炎治疗作用的初步观察

目的:初步观察亚抗菌剂量的米诺环素在大鼠实验性牙周炎中的治疗作用。方法:由24只成年雄性SD大鼠组成3个实验组:1组是模型组:仅诱导牙周炎;2组是治疗组:诱导牙周炎且用亚抗菌剂量的米诺环素治疗;3组是阴性对照组:假手术(仅腹腔麻醉)。牙周炎的诱导采用丝线结扎法并辅以100g/L蔗糖水为饮料。动物于实验的28d和58d处死,观察指标为:(1)视觉指标:牙松动度(MT),牙龈指数(GI)和牙槽骨丧失(ABL);(2)组织学指标:牙周组织中单核细胞的渗出数、破骨细胞数和牙周组织胶原的含量。资料采用方差分析统计学处理。结果:与模型组相比,28d和56d指标均显示亚抗菌剂量的米诺环素能显著抑制GI,MT,ABL和破骨细胞的形成,56d指标表明亚抗菌剂量的米诺环素能显著抑制牙周组织中单核细胞的渗出和胶原组织的降解。结论:亚抗菌剂量的米诺环素能有效抑制牙槽骨的吸收和牙周胶原纤维的降解,减缓大鼠实验性牙周炎的发展进程。

盐酸米诺环素治疗牙周牙髓联合病变的临床疗效

目的观察使用米诺环素软膏治疗牙周牙髓联合病变患者的疗效。方法91例牙周牙髓联合病变患者在进行龈下刮治和根面平整后随机分成两组,分别用米诺环素和氢氧化钙糊剂消毒预备根管,观察根管治疗诊间疼痛、根备时间、牙周临床指标变化和牙槽骨修复再生的差异,比较二者疗效异同点。结果治疗后临床牙周指数均较治疗前有显著改善,但组间差异没有显著性;根管治疗诊间疼痛、牙槽嵴顶骨质新生和总有效率两组间没有差异;米诺环素软膏组在根管预备所用时间和根尖周骨质新生方面显著优于氢氧化钙组。结论米诺环素在有效控制感染、减轻诊间疼痛和提高治疗的有效率方面,具有和氢氧化钙相似的疗效,在缩短根备时间和促进根尖周牙槽骨新生方面,米诺环素优于氢氧化钙。

牙囊干细胞诱导成骨的体外研究

目的:体外研究牙囊干细胞(DFSC)的成骨能力,为其在牙周组织工程中的应用提供理论基础。方法:结合组织块法和酶消化法分离培养DFSC,用有限稀释法纯化细胞,经细胞形态、免疫组化和流式细胞技术鉴定DFSC后,然后进行成骨诱导,并通过碱性磷酸酶和茜素红染色、Real-timePCR、Western-blot检测成骨/牙骨质细胞表面标记物ALP、OCN、BMP2、RUNX2的表达。结果:DFSC具有较强的增殖能力,免疫组化示波形丝蛋白表达阳性,角蛋白表达阴性;DFSC高表达间充质干细胞表面标记物CD44、CD90、CD105、CD146;随着诱导时间的增加,其ALP、OCN、BMP2、RUNX2的表达明显上调(P<0.05)。结论:DFSC是牙周组织再生良好的种子细胞,必将为牙周组织再生治疗开辟新的途径。

抗牙龈卟啉单胞菌卵黄免疫球蛋白的制备、鉴定及理化特性分析

目的制备牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis，Pg）的卯黄免疫球蛋白（immunoglobulin yolk，IgY）并评价其理化性质，以期为采用被动免疫抗体防治慢性牙周炎寻找新途径。方法厌氧培养聘国际标准菌株ATCC33277，收集细菌，超声振荡至菌体完全破碎，离心，收集上清液，即为全菌可溶性蛋白抗原。罗曼母鸡隔离饲养至5个月龄用于抗体的制备。以质量浓度为1g／LPg全菌可溶性蛋白抗原1ml与等量弗氏完全佐剂吹打混匀成油包水状注射剂，经皮下和肌肉多点注射免疫母鸡，共注射免疫4次，每次免疫间隔时间为10d。初次免疫即开始收集鸡蛋，标记后4℃保存。提纯免疫后不同时间的抗Pg-IgY，二喹啉甲酸总蛋白定量法测定蛋白浓度，SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分析鉴定，间接酶联免疫吸附测定（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）法进行IgY抗体效价变化和理化性质的检测。结果通过免疫诱导出质量浓度为2．05g／L的特异性IgY，经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测得相对分子质量分别为65000的重链和25000的轻链，与理论值一致；间接ELISA法结果显示初次免疫后5d左右出现抗Pg-IgY，免疫后50～55d达峰值；抗体效价达到1：100000以上；一个鸡蛋可以生产超过10mg的IgY，纯度高达95％。结论Pg全菌蛋白免疫产蛋母鸡可使鸡蛋产生高效价、高浓度的特异性IgY，该抗体纯度高、耐热、耐酸碱，理化性质稳定，适合口腔环境。