STAT-6/KLF-4/PPAR-γ激活在二氧化硅致肺纤维化中肺泡巨噬细胞极化改变中的作用

目的:观察二氧化硅(SiO_(2))对小鼠肺泡巨噬细胞(AMs)极化的影响,探讨信号转导及转录激活因子-6(STAT-6)/Krüppel样因子-4(KLF-4)/过氧化物酶体增殖激活受体-γ(PPAR-γ)信号分子在AMs中的表达情况及意义。方法:于2020年11月,将C57BL/6小鼠随机分为结晶型SiO_(2)组和生理盐水(NS)组,每组12只。通过气管滴注100μl SiO_(2)混悬液(20 mg/ml)或NS,28 d后处死小鼠,Masson染色观察小鼠肺组织纤维化情况,并检测羟脯氨酸(HYP)水平;流式细胞术检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中M1和M2型AMs比例,用实时荧光定量PCR检测AMs中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、精氨酸酶-1(Arg-1)、白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-6、IL-10、转化生长因子-β(TGF-β)、STAT-6、KLF-4、PPAR-γ等mRNA相对表达水平;酶联免疫吸附试验检测BALF中iNOS、Arg-1活力和IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-10、TGF-β含量,免疫荧光检测AMs中磷酸化信号转导及转录激活因子-6(p-STAT-6)、KLF-4、PPAR-γ蛋白相对表达水平。结果:处理28 d后,结晶型SiO_(2)组小鼠肺组织结构被破坏,胶原蛋白沉积明显增多;与NS组比较,结晶型SiO_(2)组小鼠肺组织HYP水平明显升高,M2型AMs比例明显增加,M1型AMs比例明显下降;Arg-1、IL-10和TGF-βmRNA相对表达水平和含量升高,而iNOS、IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA相对表达水平和含量降低,STAT-6、KLF-4、PPAR-γmRNA和p-STAT-6、KLF-4、PPAR-γ蛋白相对表达水平上调,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:结晶型SiO_(2)可能通过激活STAT-6/KLF-4/PPAR-γ信号通路,促进AMs向M2型极化,从而介导肺纤维化过程。