形态学中心实验室的实践和探索

为深化高等医学院校教学改革，加强实验室建设与管理，提高基础课实验教学质量，我校于2001年对人体解剖学、生物学、组织胚胎学、病理解剖学、寄生虫学和微生物学6个学科的实验室进行合并重组，创建了形态学中心实验室（以下简称中心实验室）。创建中，我们对有限资源合理配置，实验了对中心实验人员、用房、仪器设备管理的统一管理、统一调配、统一使用、统一规划、统一建设。经过近几年的努力，如今中心实验室已具雏形，开始显现出明显优势，我们申报的安徽省高校基础课实验教学示范中心、省级教学研究项目、中央地方共建实验室项目等，均获立项资助。

形态学中心实验室建设与管理体会及有关问题探讨

对原有人体解剖学、生物学、组织胚胎学、病理解剖学、寄生虫学和微生物学 6个学科实验室合并重组、对有限资源合理配置 ,提高整体水平与效益 ;通过创建中心实验室。创建形态学中心实验室 ,①有效地避免了低水平重复建设 ,使有限的投入发挥了更大的效益 ;②实现了实验教学资源的合理配置与共享 ;③有利于实验室标准化、规范化管理 ;

虚拟切片在形态学实验教学中的应用

实验教学是医学高等教育的重要组成部分。近年来，各高校对实验教学日益重视，对实验教学经费的投入力度也不断加大。虚拟切片系统始于1998年，美国爱荷华州立大学建立了虚拟切片教学网站。2002年Heidger等采用部分虚拟切片、保留部分真实切片结合的办法进行实验教学和临床应用^[1]。2003年Blake等采用渐进式虚拟切片，最终彻底取代真实切片的方法进行教学^[2]。美国威斯康辛医学院直接使用虚拟切片进行实践教学。因此应用虚拟切片进行形态学实践教学已是大势所趋。现将笔者应用虚拟切片开展实验教学的做法和体会总结如下。

医学形态学虚拟实验微课程网络平台建设和实施

"微课程"作为一种技术支持下的改变教学流程的新兴教学模式,已成为教育技术里最火热的关键词。本文旨在探讨将医学形态学虚拟切片实验教学借助"微课程"模式进行改革,实现医学院校形态学实验"微课程"网络资源的建设和实施。

医学形态学实验精品课程的建设与实践

本文通过对师资队伍、教学体系、教学内容、教材建设、网站建设等方面的建设和实践,探讨了医学形态学实验课程精品课程的创建及意义,为培养具有创新精神和实践能力的医学人才提供了良好的实验教学技术平台。

医学形态学信息化实验教学平台的构建

为解决传统医学形态学授课方式存在的问题,提升教学质量,某医科大学形态学中心实验室构建了医学形态学信息化实验教学平台,该平台包括虚拟仿真实验平台、微课程和精品课程与科普示范平台。实践表明,该平台的构建有利于开展课程内容的整合、解决医学标本共享问题和构建形态学标准化考试平台。

曲张大隐静脉平滑肌细胞、弹性纤维和胶原纤维的形态学变化

目的 观察曲张大隐静脉的平滑肌细胞、弹性纤维以及胶原纤维组织学的变化 ,探讨静脉曲张与平滑肌细胞、弹性纤维及胶原纤维之间的关系。方法 曲张大隐静脉 7例 ,正常大隐静脉 4例 ,进行HE染色和Weigert染色后在光学显微镜下观察。结果可见曲张大隐静脉内腔增大 ,管壁增厚 ,平滑肌细胞形态异常 ,排列不规则 ,弹性纤维断裂呈不连续分布 ,数量明显减少 ,胶原纤维增生 ,排列紊乱。结论 平滑肌细胞结构的破坏及结缔组织成分的异常与静脉曲张的发生密不可分。

曲张大隐静脉平滑肌细胞形态学改变

目的探讨大隐静脉曲张与平滑肌细胞(SMC)形态学改变之间的关系。方法临床术中收集正常及曲张大隐静脉标本,制作石蜡切片进行HE染色观察SMC一般组织学变化;制作超薄切片置透射电镜下观察SMC超微结构变化。结果光镜下曲张大隐静脉内膜增厚,SMC数量增多;中膜增厚,SMC形态异常,排列紊乱;电镜下SMC形态不规则,胞浆中粗面内质网、核糖体和线粒体丰富,肌丝少。结论大隐静脉曲张的发生和发展与SMC细胞形态学改变密不可分。

梗死相关血管晚期再灌注对实验性心肌梗死心肌细胞凋亡的影响

目的探讨犬急性心肌梗死后梗死相关血管晚期再灌注对梗死周边缺血区心肌细胞凋亡以及凋亡相关基因bcl-2、bax及其相关蛋白表达的影响。方法健康成年杂交犬28只,全身麻醉下常规开胸暴露冠状动脉后随机分为三组:假手术组(n=8)、急性心肌梗死组(n=10)和晚期再灌注组(n=10)。假手术组仅行左冠状动脉前降支下穿过丝线而不结扎冠状动脉,急性心肌梗死组行左冠状动脉前降支高位永久结扎,晚期再灌注组在高位结扎左冠状动脉前降支6 h后松解结扎线予以6 h的再灌注处理。共有23只犬模型制作成功。各组犬均于术后12 h处死,采集心肌标本。使用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的原位缺口末端标记法检测心肌细胞凋亡,逆转录聚合酶链反应法检测心肌细胞bcl-2和bax mRNA表达水平,免疫组织化学染色和蛋白印迹法分析bcl-2、bax在心肌细胞中的表达情况。结果晚期再灌注组心肌细胞凋亡指数较急性心肌梗死组明显减少(P<0.05),且两组心肌细胞凋亡指数均高于假手术组(P<0.01)。急性心肌梗死组和晚期再灌注组bcl-2和bax mRNA的表达均明显高于假手术组(P<0.01),且晚期再灌注组bax mRNA的表达明显低于急性心肌梗死组(P<0.05),而bcl-2 mRNA两组间差异无显著性。与假手术组相比,急性心肌梗死组和晚期再灌注组bcl-2蛋白的表达均明显升高(P<0.01),其中在晚期再灌注组的表达略高于急性心肌梗死组,但差异无显著性;晚期再灌注组bax蛋白的表达明显高于假手术组(P<0.01),但明显低于急性心肌梗死组(P<0.05)。结论急性心肌梗死后晚期再灌注可以减少梗死周边缺血区心肌细胞凋亡,其机制可能与心肌细胞bax基因及其相应的蛋白表达减少有关。

留学生组织学与胚胎学实验教学中的五个结合

组织学与胚胎学是一门实践性很强的形态学课程,实验教学占有举足轻重的地位,对培养医学生理论联系实际、动手能力、分析解决问题能力、科学思维方法以及严谨的工作态度均具有重要意义[1].近几年来形态学中心实验室承担了留学生组织学与胚胎学实验教学任务,面对留学生的实验教学环境,除了加强师资队伍培训,认真进行备课和试讲外,我们充分利用数码互动显微镜系统、虚拟切片系统等教学硬件优势,注重倡导教学态度重于知识,教学方法重于内容,教学活动以学生兴趣、能力和需要为优先考虑的教学理念,对留学生全英文组织学与胚胎学实验教学方法进行积极探索和实践,采取以下五个结合,进行多样化教学,多方位实践.现总结如下.

人胎海马的组织形态学发育

目的:观察胎儿海马组织形态的发育变化规律。方法:收集引产胎儿29例,取海马组织HE染色和硫堇染色方法,观察人胎海马的组织形态学发育。结果:第17W开始可明显辨别海马各区及其皮质分层,锥体细胞层内细胞开始出现少量尼氏体。随胎龄增长,细胞体积逐渐增大,细胞密度进一步减小;尼氏体增多变深。结论:表明17W以前的胚胎海马细胞未分化或刚刚开始分化为神经元,神经细胞尚未成熟,可作为海马移植的一个关键阶段。

急性心肌梗死晚期再灌注后心肌细胞凋亡与Bcl-2、Bax蛋白表达的研究

目的:探讨犬急性心肌梗死后晚期再灌注对梗死周边缺血区心肌细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达的影响。方法:健康成年杂交犬28只,全麻下常规开胸暴露冠状动脉后随机分为3组:假手术组(n=8),急性心肌梗死组(n=10)、晚期再灌注组(n=10)。假手术组仅行左冠状动脉前降支下穿过丝线而不结扎冠状动脉,急性心肌梗死组行左冠状动脉前降支高位永久结扎,晚期再灌注组在高位结扎左冠状动脉前降支6 h后松解结扎线予以再灌注6 h。共有23只犬模型制作成功。各组犬均于术后12 h处死,采集心肌标本。使用TUNEL法检测心肌细胞凋亡,免疫组化染色和Western blotting蛋白印迹分析Bcl-2、Bax在心肌细胞中表达情况。结果:晚期再灌注组心肌细胞凋亡数较急性心肌梗死组明显减少(P<0.05),但两组心肌细胞凋亡数均高于假手术组(P<0.01)。与假手术组相比,急性心肌梗死组和晚期再灌注组Bcl-2蛋白的表达均升高(P<0.01),其中在晚期再灌注组的表达略多于急性心肌梗死组,但无显著差异(P>0.05)。Bax蛋白在晚期再灌注组的表达高于假手术组(P<0.01),但低于急性心肌梗死组(P<0.05)。结论:急性心肌梗死后晚期再灌注可以减少梗死周边缺血区心肌细胞凋亡,其机制可能与心肌细胞表达Bax蛋白减少有关。

链脲佐菌素糖尿病大鼠下颌下腺超微结构观察

目的 观察链脲佐菌素(STZ)糖尿病大鼠下颌下腺超微结构变化。方法 SD雄性大鼠18只,随机分为对照组、实验组及治疗组,用STZ复制糖尿病动物模型,饲养12周后测体重和血糖,取材制片应用透射电镜观察其超微结构变化。结果 与对照组体重[ ( 367 .33±26. 73 )g]和血糖[ (6 .49±0 .79 ) mmol/L]比较:实验组体重[ ( 156. 50±10 .13)g]减轻、血糖[ (27 .79±9 .28)mmol/L]升高,有显著性差异(P<0 .01);治疗组体重[ (354 .67±31 .94)g]、血糖[ (8. 75±2 .56)mmol/L]无显著性差异(P>0 .05)。与对照组比较,实验组下颌下腺电镜下主要变化为为:细胞核固缩,染色质致密;线粒体肿胀或空泡变性、嵴断裂;粗面内质网囊状扩张,断裂成短棒状,脱颗粒等。治疗组无明显改变。结论 糖尿病可导致下颌下腺组织出现一系列超微病理改变,为进一步探讨糖尿病发生机制提供了形态学依据。

凋亡相关蛋白Bcl-2及Bax在糖尿病大鼠下颌下腺内的表达

目的:观察糖尿病大鼠下颌下腺内凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达变化。方法:SD雄性大鼠用链脲佐菌素复制糖尿病动物模型,H-E染色观察下颌下腺形态学变化,免疫组织化学SABC技术检测Bcl-2及Bax蛋白表达变化。结果:糖尿病组大鼠下颌下腺组织萎缩,间质纤维增生。与对照组比较,糖尿病组大鼠下颌下腺导管上皮细胞Bcl-2表达下降,Bax表达显著增加。结论:Bcl-2及Bax表达在糖尿病病理变化过程中出现了一定的变化规律。

医学形态学实验课程体系改革探索与实践

目前,我国高校大学生大多是按照课本设定的内容进行验证性实验,这样培养的学生很少积极主动地思考问题,甚至很少向老师提出问题,缺乏探究真谛的热情,其结果表现为学生知识面狭窄,缺乏想象力和创造力,开展医学形态学综合性、开放设计性实验教学,在一定程度上可以弥补这种不足。原先形态学科的实验是由解剖、组胚、病理、

衰老对大鼠视网膜全层及各层厚度影响的体视学研究

目的应用体视学方法探讨衰老对大鼠视网膜总厚度及各层厚度的影响。方法选择健康青年(3月龄)和老年(24月龄)Long-Evans大鼠各6只,每只大鼠行右侧眼球矢状位连续切片,在视网膜全部组织切片中进行系统随机抽样,HE染色,采用显微成像系统进行视网膜总厚度及各层厚度测量。结果与青年组大鼠比较,系统随机抽样法测量结果显示,老年组大鼠视网膜总厚度及多层厚度均明显变薄,视网膜各层厚度占视网膜总厚度的构成比基本不变。外丛状层厚度减少幅度最显著,达46.2%。结论衰老引起大鼠视网膜总厚度及各层厚度不同程度的变薄,尤以外丛状层变薄最明显,系统随机抽样法更能准确地反映衰老对视网膜各层厚度的影响情况。