miR-515-5p靶向RING1增强NSCLC A549/DDP细胞顺铂敏感性分析

目的探讨微小RNA-515-5p(miR-515-5p)对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞顺铂敏感性的影响及机制。方法实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测BEAS-2B、A549及A549/DDP细胞中miR-515-5p的表达情况。A549/DDP细胞分为NC组、miR-515-5p组、si-RING1组及miR-515-5p inh+si-RING1组,CCK-8法检测A549/DDP细胞增殖活性,用WB检测RING1和凋亡相关蛋白的表达情况。用双荧光素酶报告基因系统验证miR-515-5p与RING1的靶向关系。结果miR-515-5p在BEAS-2B、A549及A549/DDP中的表达水平分别为(1.00±0.03)、(0.61±0.03)、(0.31±0.04);A549/DDP细胞转染miR-515-5p mimics后,NC组和miR-515-5p组细胞在24、48、72和96 h时的OD450值分别为(0.61±0.02)、(0.52±0.02),(0.84±0.02)、(0.68±0.04),(1.03±0.03)、(0.79±0.04),(1.08±0.03)、(0.86±0.04);以上指标组间差异均有统计学意义(P<0.05)。miR-515-5p组cleaved caspase-3、cleaved PARP和Bax表达水平显著高于NC组,Bcl-2的表达水平显著低于NC组。A549/DDP细胞转染si-RING1、miR-515-5p inhibitor后,NC组,si-RING1组和miR-515-5p inh+si-RING1组细胞在24、48、72和96 h时的OD450值分别为(0.63±0.02)、(0.49±0.04)、(0.58±0.03)、(0.83±0.03)、(0.62±0.05)、(0.80±0.02)、(1.05±0.04)、(0.76±0.03)、(1.02±0.04)、(1.15±0.05)、(0.86±0.03)、(1.12±0.06);以上指标组间差异均有统计学意义(P<0.05)。si-RING1组cleaved caspase-3、cleaved PARP和Bax表达水平显著高于NC组和miR-515-5p inh+si-RING1组,Bcl-2的表达水平显著低于NC组和miR-515-5p inh+si-RING1组。结论miR-515-5p通过靶向下调RING1的表达增强A549/DDP细胞顺铂敏感性。