多重耐药鲍曼不动杆菌表型及耐药基因型的研究

目的对我院临床分离的31株多重耐药鲍曼不动杆菌表型和耐药基因进行分析。方法用纸片扩散法检测鲍曼不动杆菌的药敏结果,用三维试验检测超广谱β-内酰胺酶(ESBL)、头孢菌素酶(AmpC酶),用协同法检测金属β-内酰胺酶(MBL),用聚合酶链反应(PCR)检测耐药基因。结果31株多重耐药鲍曼不动杆菌中,90%对亚胺培南敏感;22%对头孢哌酮-舒巴坦耐药,74%中介;其他抗菌药物的敏感率均在6%以下。2株菌(6%)单产ESBL;93%菌株高产AmpC酶,其中19%菌株同时产ESBL。所有菌株b laTEM、aacA4和gyrA基因均为阳性;96%菌株ampC基因为阳性;2株菌同时携带b laPER和b laOXA-23型基因,另有1株菌b laOXA-23基因阳性。结论同时携带b laTEM、ampC、aacA4和gyrA突变以及b laPER、b laOXA-23等多种耐药基因是鲍曼不动杆菌多重耐药的主要原因。

金黄杆菌临床分离株β-内酰胺酶及耐药性分析

目的了解临床分离的金黄杆菌耐药特性和β-内酰胺酶产生情况。方法琼脂稀释法检测50株金黄杆菌对18种抗生素的MIC,改良的三纸片增效法和四槽、五槽三维试验法检测金黄杆菌金属β-内酰胺酶(MBL)、超广谱β-内酰胺酶(ES-BL)和AmpC酶。结果50株金黄杆菌对亚胺培南、美罗培南的耐药率为92%、88%,氨曲南为92%,阿米卡星和β-内酰胺抗生素的耐药率均大于40%,显示具有高度耐药性。加替沙星、左氧氟沙星和利福平的MIC90分别为4、8、8μg/ml,表现出很强的抗菌活性。环丙沙星、万古霉素、哌拉西林/他唑巴坦和头孢哌酮/舒巴坦也具有良好的抗菌活性。50株金黄杆菌MBL、ES-BL、AmpC酶产酶率分别为68.0%、26.0%、0.0%。脑膜败血性金黄杆菌中产MBL73.7%,同时产MBL和ESBL42.1%,单产ESBL5.3%。产吲哚金黄杆菌MBL产酶率80.0%。结论金黄杆菌具有高度的多重耐药现象和MBL、ESBL高检出率,应该合理使用抗生素,保护易感人群,准确、及时地做好病原学诊断和耐药性监测并给予正确的治疗。

协同法过筛检测金属β-内酰胺酶的研究

目的探讨并建立临床微生物实验室常规检测金属β-内酰胺酶(MBLs)的方法,为临床合理选择抗生素提供依据。方法以EDTA、CuCl2、FeCl2、2-MPA、MPA为酶抑制剂,头孢他啶(CAZ)、亚胺培南(IMP)为底物,在MH平板上用纸片扩散法进行抗生素协同敏感性检测并与聚合酶链反应(PCR)检测金属酶基因结果进行比较。结果协同法检测20株铜绿假单胞菌金属β-内酰胺酶有1例阳性,与PCR法检测结果一致。金属β-内酰胺酶阳性的菌株在2种底物纸片中均与EDTA、2-MPA和MPA纸片有协同作用,其中2-MPA络合效果最好,与CuCl2、FeCl2纸片无协同作用。结论协同法检测革兰阴性杆菌中金属β-内酰胺酶的方法简便、结果可靠、成本低廉,适合于临床微生物学实验室对产金属酶的革兰阴性杆菌的初步鉴定。

脑膜脓毒性金黄杆菌的耐药性及β-内酰胺酶的编码基因

脑膜脓毒性金黄杆菌（Chryseobacterium meningosepticum）为非发酵革兰阴性杆菌，属条件致病菌，可引起脑膜炎、菌血症、心内膜炎、皮肤软组织感染等。临床上脑膜脓毒性金黄杆菌对亚胺培南等多种抗生素耐药，且可产生多种金属β-内酰胺酶（metallo—β-lactamases，MBL）和超广谱β-内酰胺酶（extended—spectrum β—laetamases，ESBL），日益引起临床的重视。

金属β-内酰胺酶基因及其传播机制的研究进展

金属β-内酰胺酶具有水解多种抗生素的能力,编码该酶的基因主要是获得性金属β-内酰胺酶基因,为可移动型基因,迄今已发现包括IMP,VIM型等多种基因型,而且新的基因型和亚型不断出现。金属β-内酰胺酶基因在I类和III类整合子中发现,整合子是其发生水平传播的主要因子,最常见的水平传播方式由整合子通过接合作用完成,整合子及其金属β-内酰胺酶基因的广泛传播与质粒、转座子密切相关。SPM-1型基因可借助于可移动的共同区域(CR)发生转移。

临床分离黄杆菌金属β内酰胺酶及其基因型研究

目的了解临床分离黄杆菌（Chryseobacterium spp）耐药特性和金属β内酰胺酶（metallo-β-lactamase，MBL）的产酶率及其基因型。方法采用琼脂稀释法检测50株黄杆菌对18种抗生素的MIC，三纸片增效法、改良三维试验法进行MBL表型检测，PCR检测及序列分析确定MBL的基因型。接合试验检测耐药基因是否具有可转移性，等电聚焦电泳（IEF）测定β内酰胺酶等电点（pI）。结果50株黄杆菌对碳青霉烯类、氨基糖甙类及多种β内酰胺抗生素呈高度耐药，亚胺培南、美罗培南的耐药率均达82．0％，但利福平和喹诺酮类药物表现出很强的抗菌活性。表型检测33株细菌产MBL，产酶率为66．0％。MBL基因型分析结果，20株产吲哚黄杆菌携带bla IND，其中bla IND-1型9株、bla IND-2型10株、bla IND-LIKE型1株。14株脑膜炎败血黄杆菌中检出17种MBL基因，分别为blaB1 2株、blaB2 5株、blaB3 4株、blaB114株、bla GOB-1bla 1株；GOB-101株。接合试验均为阴性，质粒DNA未检出MBL基因。携带bla IND-1^-的菌株（C-5）经IEF、MBL表型检测及β内酰胺酶初筛均为阴性。结论黄杆菌具有严重的多重耐药现象，同时具有很高的MBL检出率。bla B、bla GOB和bla IND可能位于黄杆菌染色体上，不能通过细菌质粒等可移动基因元件发生不同菌株和菌株间传播。bla IND-1可能存在蛋白质的不表达或低水平表达。