hVEGF165/pcDNA 3.1在小鼠心肌细胞中的表达

目的观察重组质粒人血管内皮生长因子165基因与质粒载体pcDNA 3.1的重组体(hVEGF 165/pcDNA 3.1)在心肌细胞中的表达,为冠心病的基因治疗和细胞移植治疗研究奠定基础。方法体外培养小鼠心肌细胞,脂质体介导hVEGF 165/pcDNA 3.1转染心肌细胞,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、细胞免疫化学方法和免疫印迹法(W estern b lotting)检测其在心肌细胞中的瞬时表达。结果RT-PCR扩增得到与hVEGF 165大小一致的目的条带,细胞免疫化学法检测到心肌细胞胞质中hVEGF蛋白,W estern b lotting在培养的细胞上清液中检测到hVEGF蛋白。结论构建的重组质粒hVEGF 165/pcDNA 3.1能在体外培养的小鼠心肌细胞中表达,可用于冠心病的基因和细胞移植治疗研究。