新型维甲酸衍生物诱导NB4细胞分化的初步研究

目的:本研究探讨10种新型维甲酸衍生物对白血病细胞株NB4的抑制增殖和诱导分化活性。方法:维甲酸类衍生物作用于NB4细胞后,通过MTT法检测细胞的增殖。瑞氏染色法在倒置相差显微镜下观察加药处理前后细胞形态学变化。NBT还原实验法分析细胞的分化指标。FCM检测分析细胞周期和细胞表面分化抗原变化。结果:维甲酸衍生物作用3 d后,抑制细胞增殖作用呈剂量依赖效应。10种维甲酸衍生物(10-5mol/L)的诱导分化活性表现在油镜下观察NB4细胞向粒系分化成熟的改变,NBT阳性细胞率增加,细胞表面分化抗原CD11b表达量增加,CD13表达则减少。通过对细胞周期的分析,发现G0/G1期细胞表达量增加,呈G1期阻滞。结论:维甲酸衍生物2a-03,4a-02和5a-02显示有较强的诱导NB4细胞分化的活性。

维甲酸类衍生物诱导K562细胞分化的活性筛选

目的探讨维甲酸类衍生物对白血病细胞株K562细胞的抑制增殖和诱导分化活性,以寻找新的具有抗瘤活性的药物。方法在体外通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)试验法检测其对细胞生长抑制的作用;瑞氏染色法观察细胞形态学改变;硝基四唑氮蓝(NBT)还原实验法分析细胞的分化指标;利用流式细胞术检测细胞表面分化抗原及细胞周期的变化情况。结果维甲酸类衍生物作用3 d后,细胞增殖抑制率最高可达到57.74%,IC50为2.82E-05;油镜下观察发现细胞形态学趋向成熟,NBT还原实验也表明维甲酸类衍生物具有诱导K562细胞株分化成熟的作用;细胞周期分析显示细胞表面分化抗原CD11b表达量增加,G0/G1期细胞增加,而S期减少。结论维甲酸类衍生物对K562细胞具有诱导分化并对其克隆生长有抑制作用,其中以2a-03、4a-01、4a-02和5a-02的作用较为突出,进一步研究开发有一定的价值。

骨髓小粒中幼稚细胞簇对骨髓增生异常综合征的诊断价值

目的 探讨骨髓小粒中幼稚细胞簇的出现对骨髓增生异常综合征 (MDS)的诊断价值。方法 对 5 1例MDS和5 0例其他血液病以及 5 0例急性白血病患者骨髓小粒中幼稚细胞簇的阳性率进行分析比较。结果 MDS患者骨髓小粒中幼稚细胞簇的阳性率明显高于其他血液病患者 (P <0 0 1) ,但是低于急性白血病患者 (P <0 0 5 )。结论 骨髓小粒中幼稚细胞簇的检查对MDS的诊断具有重要的参考价值。

多重聚合酶链反应用于人血小板抗原-2、-4、-5系统基因分型的研究

目的建立用于检测人血小板抗原(HPA)-2、-4、-5系统基因型的多重聚合酶链反应(PCR)。方法在一个反应体系中同时扩增HPA-2、-4、-5系统特异性目的基因片段。用琼脂糖凝胶电泳确定HPA-2、-4、-5系统基因型;再用多重PCR对75名健康的单采血小板者进行HPA-2、-4-、5系统基因分型,分型结果与PCR-序列特异性引物(PCR-SSP)获得的结果进行比较。结果HPA-2、-4、-5系统分型的结果为:70名为2 a/2 a型,5名为2 a/2b型;73名为4 a/4 a型,2名为4 a/4b型;66名为5 a/5 a型,9名为5 a/5b型。未发现2b/2b、4b/4b及5b/5b纯合子个体。多重PCR结果与PCR-SSP方法获得的结果一致。结论多重PCR具有操作简便、快速、准确等特点,可以用于血小板血型抗原基因分型。

习惯性流产夫妇外周血淋巴细胞R显带法染色体核型分析

目的探讨习惯性流产与染色体异常的关系。方法用RPMI1640培养基,采用微量全血培养法,对129对习惯性流产夫妇外周血淋巴细胞染色体进行了分析。结果 258例习惯性流产中,检出异常核型12例,占受检人数的4.6%,其中男性5例,女性7例,这些异常核型中,7例为染色体平衡易位,2例为超二倍体(47,XYY 1例;47,XXX 1例),3例为变异核型(1例Yp+,1例Yq-和1例2q+)。结论习惯性流产与染色体异常有关。习惯性流产夫妇外周血淋巴细胞染色体异常率为4.6%,其中平衡异位是引起习惯性流产的主要染色体核型。

57例Turner综合征的R带染色体分析

目的研究Turner综合征与其细胞染色体异常的遗传学关系。方法外周血淋巴细胞染色体R带分析。结果 57例Turner综合征患者中单体45,X,27例(47.4%),45,X/46,XX嵌合体2例(3.5%),45,X/46,X i(Xq)(q10;q10)嵌合体12例(21.1%),46,X,i(X)11例(19.3%),45,X/46,X,del(X)(peter-q11)4例(7.0%)。结论 X染色体数目异常及结构畸变是导致Turner综合征的主要原因,均不同程度导致女性不孕和智力低下等其它器官功能异常。为了优生优育,应做好产前诊断。

骨髓涂片与骨髓活检诊断骨髓增生异常综合征22例结果分析

目的探讨在骨髓增生异常综合征(MDS)诊断中,骨髓涂片和骨髓活检的异同性。方法对22例MDS患者同步做骨髓涂片和骨髓活检切片,观察骨髓涂片和切片的形态学特征,并对其进行比较分析。结果活检切片对骨髓增生程度的判断明显优于涂片;涂片对红系病态造血的观察优于活检,而活检对原始细胞数量、网状纤维增生、粒系、巨核系病态造血观察优于涂片。结论骨髓涂片与骨髓活检在MDS的诊断、分型中各有优点,结合应用可提高MDS诊断的准确性。

黄芪总苷诱导人白血病NB4细胞凋亡的机制

目的 研究黄芪总苷（TA）对体外培养的人早幼粒细胞白血病细胞株NB4增殖及凋亡机制的影响.方法 将不同浓度的TA与NB4细胞共培养48 h,采用细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒8（CCK-8）检测细胞生长抑制率,以流式细胞仪检测细胞凋亡率及凋亡过程中细胞内核因子κB（NF-κB）和蛋白激酶B（PKB,又称Akt）蛋白浓度的变化.结果 200、400、600、800 ms/L TA均可抑制NB4细胞生长,抑制率分别为（14.54±3.20）%、（24.79±3.98）%、（57.28±4.71）%和（88.28±4.65）%,呈浓度依赖性增加（P〈0.05）.200、400、600、800 mg/L TA组的细胞凋亡率分别为（10.03±3.31）%、（14.87±3.65）%、（23.45±1.90）%和（25.26 4-2.07）%,与对照组[（1.80±1.24）%]相比,差异均有统计学意义（P〈0.05）,且200、400、600 ms/L TA组的细胞凋亡率呈浓度依赖性增加（P〈0.05）;800 mg/L TA组的细胞凋亡率增加不明显,与600 ms/L TA组相比,差异无统计学意义（P〉0.05）,但出现了大量的坏死细胞,坏死率达（45.65±3.16）%.细胞凋亡过程中伴随NF-κB蛋白表达下降,不同浓度TA组与对照组差异均有统计学意义（P〈0.05）,而Akt蛋白的表达无明显变化（P〉0.05）.结论 黄芪总苷可以抑制NB4细胞增殖,并可以通过不依赖Akt的NF-κB信号通路来诱导NB4细胞凋亡.

多重聚合酶链反应-微流芯片检测人血小板抗原系统基因型方法的建立与应用

目的建立人血小板抗原(HPA)-2、4、5系统基因型的检测方法。方法用多重聚合酶链反应和微流芯片检测方法,通过设计9条特异性引物、优化反应体系和反应条件,在一个体系中同时扩增HPA-2、4、5系统特异性的目的基因片段,利用微流芯片快速检测HPA-2、4、5系统基因型;并把分型结果与采用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)获得的结果进行比较。结果对35名健康单采血小板者进行HPA-2、4、5系统分型的结果为:33名为2a／2a型,2名为28／2b型;34名为4a／4a型,1名为4a／4b型;29名为5a／5a型,6名为,5a／5b型。未发现2b／2b、4b／4b及5b／5b纯合子个体。该结果与PCR-SSP方法获得的结果完全一致。结论该方法可快速、准确地用于血小板血型抗原基因分型,尤其适合于大样本检测。