EZH2与α-SMA在风湿性心脏瓣膜病合并心房颤动患者心肌组织中的表达变化研究

目的:探讨风湿性心脏瓣膜病合并心房颤动(AF)患者心肌组织中组蛋白-赖氨酸N-甲基转移酶EZH2与α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达变化研究。方法:将20例风湿性心脏瓣膜病接受瓣膜置换手术患者,于体外循环前切取的右心耳组织作为研究对象,分为两组:AF组(n=10)和窦性心律(SR)组(n=10),分别应用Masson染色观察心肌组织中胶原沉积情况,应用免疫组化、qRT-PCR、Western blot法检测心肌组织中EZH2与α-SMA表达变化。结果:Masson染色提示AF组与SR组相比,AF组中胶原沉积明显增多,胶原容积分数增加(P<0.05);免疫组化检测显示AF组与SR组相比,AF组EZH2与α-SMA蛋白表达增加(P<0.05)。同时,Western blot检测显示AF组与SR组相比,AF组EZH2与α-SMA蛋白表达增加(P<0.05)。qRT-PCR显示AF组与SR组相比,AF组EZH2与α-SMA mRNA表达增加(P<0.05)。结论:EZH2与α-SMA在房颤组织中高表达,提示EZH2与α-SMA可能促进风湿性心脏瓣膜病合并心房颤动发生发展。

化学合成microRNA-29a inhibitors和mimics对SD大鼠心肌成纤维细胞活化增殖的影响

目的探讨微小RNA-29a(miR-29a)inhibitors和mimics对大鼠心肌成纤维细胞活化增殖的影响。方法取SD大鼠心肌组织,以组织块酶消化法分离细胞,通过差速贴壁离心法收集、培养SD大鼠心肌成纤维细胞。应用Lipofectamine^(TM)2000 Reagent分别向大鼠心肌成纤维细胞瞬时转染miR-29a inhibitors和miR-29a mimics 24 h和48 h后,实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-29a、Ⅰ型胶原前胶原A1(Col1A1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的RNA水平的表达,MTT法检测细胞增殖活性。结果与正常对照组和阴性对照组比较,在瞬时转染miR-29a inhibitors的心肌成纤维细胞中,miR-29a的表达水平下调;而在转染miR-29a mimics的心肌成纤维细胞中,miR-29a的表达水平上调。CoilA1在miR-29a inhibitors组中表达水平升高,而在miR-29a mimics组中则表达水平降低。α-SMA在miR-29a inhibitors组中表达水平升高,在miR-29a mimics组中则表达水平降低。瞬时转染miR-29a mimics 24、48 h后,与空白对照组和其阴性对照组相比较,心肌成纤维细胞活力明显下降;而瞬时转染miR-29a inhibitors 24、48 h后,心肌成纤维细胞活力则明显增强。结论 miR-29a mimics可明显抑制心肌成纤维细胞增殖活性,而miR-29a inhibitors则显著提高心肌成纤维细胞的增殖活性,提示心肌纤维化的形成可能与miR-29a表达下调有关,其潜在的分子作用机制有待进一步研究。

HDAC3在H9C2细胞缺血再灌注损伤中的表达及干预机制

目的探讨组蛋白去乙酰化酶3(HDAC3)在大鼠H9C2心肌细胞缺血再灌注损伤中的表达及其部分机制研究。方法将H9C2细胞分为以下3组:正常对照组、缺血/再灌注(I/R)组、I/R+曲古霉素(TSA)组。MTT法检测细胞增殖活力;检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)水平;Western blot法测定细胞内HDAC3蛋白表达水平;实时荧光定量PCR检测HDAC3 mRNA表达情况。结果 MTT法检测结果显示:与正常对照组比较,I/R组、I/R+TSA组抑制率均显著提高,并且I/R组显著高于I/R+TSA组;I/R组LDH活性明显高于正常对照组,I/R+TSA组显著低于I/R组;Western blot检测显示:I/R组、I/R+TSA组HDAC3的表达明显高于正常对照组,I/R+TSA组显著低于I/R组;实时荧光定量PCR检测I/R组、I/R+TSA组HDAC3的mRNA表达明显高于正常对照组,I/R+TSA组显著低于I/R组。结论HDAC3表达上调可能在H9C2细胞缺血再灌注损伤中起到重要作用。

靶向沉默HDAC6对乳鼠心房肌成纤维细胞活化增殖的作用

目的探究组蛋白去乙酰化酶(HDAC6)对乳鼠心房肌成纤维细胞活化增殖的影响作用。方法将50只乳鼠(雄性)分别提取心房肌成纤维细胞,应用Western blot法测定HDAC6和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况;运用qRT-PCR技术检测HDAC6和α-SMA mRNA的表达情况;MTT法检测心房肌成纤维细胞的细胞增殖活性;使用LipofectamineTM2000 Reagent向心房肌成纤维细胞中转染小干扰RNA HDAC6(siRNA-HDAC6)后观察对心房肌成纤维细胞增殖的影响。结果转染心房肌成纤维细胞siRNA-HDAC6组HDAC6和α-SMA的蛋白表达明显下降;qRT-PCR技术检测siRNA-HDAC6组中HDAC6和α-SMA的mRNA表达明显下降;转染siRNA-HDAC6明显抑制心房肌成纤维细胞的增殖活性。结论靶向沉默HDAC6可抑制心房肌成纤维细胞活化增殖,提示其在心房纤维化中可能发挥调控作用。

先天性心脏病合并重度肺动脉高压的外科治疗

目的探讨先天性心脏病合并重度肺动脉高压的外科治疗。方法选择先天性心脏病合并重度肺动脉高压患者32例。动脉血氧饱和度0．84～0．94，左向右分流20例，双向分流10例，无分流2例。测肺动脉压65～120（82±14）mmHg（1mmHg=0．133kPa）。所有病例均在体外循环下行心内畸形矫治手术，术前给予吸氧、西地那非等治疗，术中应用乌司他丁及低温肺保护液肺动脉灌注等手段，术后常规应用血管活性药物。结果32例手术顺利，术后肺动脉压下降20～40mmHg。30例治愈出院，2例术后早期死于严重低心排血量综合征及致命性心律失常，病死率为6．25％（2／32）。结论先天性心脏病合并肺动脉高压经围手术期综合治疗后再行手术根治可获得良好的临床效果。

胸腔镜同期双侧肺减容术治疗高龄肺气肿

目的探讨胸腔镜同期双侧肺减容术治疗≥70岁肺气肿的疗效及围手术期处理。方法回顾性分析2008年10月至2011年4月收治20例≥70岁胸腔镜同期双侧肺减容术高龄肺气肿患者的临床资料。术前利用影像学确定“靶区”，采用Endo．GIA切除过度充气的肺组织，术前及术后6个月监测肺功能、动脉血气及6min步行距离（6MWD），对其结果进行分析。结果无手术死亡病例。20例术后住院10-38（18．0±5．5）d，18例术后呼吸困难主观症状明显减轻，呼吸困难指数提高1～2级。术后6个月肺功能第1秒用力呼气容积（FEv，）增加，残气容积（Rv）和肺总量（TLC）均下降，动脉血氧分压（PaO2）、6MWD均增加，差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论同期双侧胸腔镜下肺减容术治疗≥70岁老年性肺气肿能改善患者的肺功能，提高患者的生活质量。术中熟练掌握胸腔镜手术技巧，围手术期积极预防和处理并发症，是保证手术成功和患者早日康复的关键。

“瓣中瓣”二尖瓣置换手术对左室功能的影响

目的探讨“瓣中瓣”二尖瓣置换手术（保留二尖瓣和瓣下结构的瓣膜置换手术）对患者术后左室功能恢复的影响。方法2009年4月至2010年12月收治64例二尖瓣关闭不全并左室增大（直径〉150ram）的患者，其中施行“瓣中瓣”二尖瓣置换手术32例（研究组），行剪除二尖瓣及腱索的瓣膜置换手术32例（对照组）。超声心动图检测并计算两组患者术后左室舒张末期直径（LVED）、左室射血分数（LVEF）、左室短轴缩短率（LVFS），并进行统计学比较。结果术后随访2～14个月，无死亡病例。研究组术后2周、术后6个月LVED[（49．6±33．3）、（46．9±38．6）mm]d＇于对照组[（61．4±34．6）、（57．6±29．8）mm]（P〈0．05），同时LVEF[（55±20）％、（59±25）％]高于对照组[（50±19）％、（51±21）％]（P〈0．05）。结论“瓣中瓣”二尖瓣置换手术较剪除二尖瓣及腱索的瓣膜置换手术更有助于提高左室功能和改善心室重构。