人绒毛膜促性腺激素注射日血清激素水平对体外受精-胚胎移植临床的影响

目的探讨控制性超排卵(controlled ovarian hyperstimulation,COH)中人绒毛膜促性腺激素(human chorionic goadotrophin,HCG)注射日孕激素(P)、雌二醇(E2)水平及P/E2对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)临床结局的影响。方法回顾性分析采用黄体中期长方案治疗的322个完整IVF-ET周期的临床资料。结果按血清P值分为A1组(<2.86nmol/L),B1组(2.86～9.54nmol/L),C1组(>9.54nmol/L),3组间妊娠率差异无统计学意义(P>0.05)。按E2水平分为A2组(<1500pg/ml)、B2组(1500～3000pg/ml)、C2组(>3000pg/ml),随E2增高获卵数增多,Gn用量逐渐减少,各组间差异有统计学意义(P<0.05);3组间胚胎着床率和临床妊娠率差异无统计学意义(P>0.05);B3组(P/E2≥1.2)胚胎着床率和妊娠率显著低于A3组(P/E2<1.2)(P<0.05)。结论在长方案IVF-ET治疗中注射HCG日血清E2水平与获卵数和Gn用量有关,P/E2比值是预测IVF-ET临床结局有价值的指标,而P和E2值不能预测妊娠结局。

精子DNA损伤与辅助生殖技术结局

精子DNA损伤发生的机制包括染色质包装异常、氧化应激和细胞凋亡等。此外,冷冻保存和体外制备技术均能影响精子DNA的完整性。精子DNA损伤与精液参数、精子的受精能力和受精后的胚胎发育潜能、辅助生殖技术(ART)结局及后代遗传风险密切相关。对近年有关精子DNA损伤的机制、冷冻保存和精子制备、精子DNA损伤与精液参数及其与ART结局关系的相关文献进行综述。

低获卵与体外受精-胚胎移植临床结局的关系

目的探讨体外受精-胚胎移植(IVF-ET)/卵胞浆内单精子注射(ICSI)过程中获卵数≤5患者的临床结局。方法回顾性分析2008年7月～2011年12月在我院生殖中心行IVF/ICSI获卵数≤5患者的临床资料,共216个移植周期。按年龄分为<35岁组(A组)、35～39岁组(B组)和≥40岁组(C组),选择同期年龄<35岁、获卵数6～15枚的患者共409个移植周期作为A组对照组;将35岁以上高龄低获卵患者按超促排卵方案分为长方案组、短方案组和拮抗剂组,对各组的临床资料及临床结局进行分析。结果 A组与C组的临床妊娠率(38.3%vs.19.4%)及早期流产率(16.1%vs.50.0%)有显著性差异(P<0.05);A组与对照组的临床妊娠率(38.3%vs.41.6%)及早期流产率(16.1%vs.10.0%)间无显著性差异(P>0.05)。不同促排卵方案组间临床妊娠率(29.0%vs.26.1%vs.25.9%)及早期流产率(33.3%vs.33.3%vs.40.0%)间无显著性差异(P>0.05)。结论 IVF/ICSI过程中,<35岁的低获卵患者仍可获得较满意的临床结局;不同超促排卵方案并不能改善高龄低获卵患者的临床结局。

精子DNA完整性研究及其临床意义

精子DNA完整性检测反应了精子DNA的损伤程度,其发生机制可能与精子细胞发生过程中的凋亡发生异常、染色质组装异常或氧化应激反应有关。目前常用的精子DNA完整性检测方法有单细胞凝胶电泳法、原位标记法、精子染色质结构分析法、吖啶橙试验、精子染色质扩散试验和8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)测定法等。精子DNA完整性检测对揭示男性不育的病因、预测辅助生殖结局以及指导临床治疗具有重要意义。

蛋白激酶C对生殖细胞及受精过程的影响

蛋白激酶C(PKC)是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,是细胞内多种信号转导通路的重要成分,参与细胞周期的调控、生长、增殖、分化与凋亡等多种生理过程。研究证明,PKC亚型存在于精子和卵母细胞中,参与受精过程。因此,了解PKC的生理作用对探讨弱精子症发生的分子机制、卵母细胞成熟及受精过程具有重要意义。

左卡尼汀联合辅酶Q10治疗特发性少、弱精子症临床疗效评估:一项双盲、随机对照研究

目的:探讨左卡尼汀(LC)联合辅酶Q10(Co Q10)治疗特发性少、弱精子症(i OAT)的临床疗效。方法:将262例i OAT患者按照Excel软件随机数字排序分为4组,LC组:62例,口服左卡尼汀口服溶液10 ml/次,2次/d;Co Q10组:63例,口服Co Q10片剂,20 mg/次,3次/d;联合用药组:63例,按照上述剂量联合服用LC和Co Q10;对照组组:74例,服用不含抗氧化作用的安慰剂(维生素B1)。治疗3个月后比较各组治疗前、后精子浓度、活动率、前向运动精子百分率、DNA碎片百分率、顶体反应发生率及妊娠结局。结果:联合用药组的活动率及前向运动精子百分率均显著高于其他各组及自身治疗前(P<0.05);精子DNA碎片百分率则显著低于对照组和自身治疗前(P<0.05);临床妊娠率显著高于对照组(30.0%vs 6.8%,P<0.008)。各组间的精子顶体发生率及流产率无统计学差异(P>0.05)。结论:LC联合Co Q10可显著提高i OAT患者的精子质量,并能改善i OAT患者的临床结局。

全胚冷冻后冻融周期移植的临床结局分析

目的:分析全胚冷冻对体外受精/卵泡浆内单精子注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)临床结局的影响。方法:回顾性分析2012年9月至2013年8月我院生殖医学中心489个移植周期的临床资料,其中214个全胚冷冻后首次冻融移植周期(F-ET)为A组,275个新鲜移植周期为B组,并根据移植胚胎发育阶段将各组进一步分为囊胚移植组(A1组,B1组)和卵裂胚移植组(A2组,B2组),比较各组的临床结局。结果:A1组临床妊娠率和胚胎种植率(71.1%、53.0%)显著高于A2、B1和B2组(分别为:57.3%、34.0%;55.0%、42.1%;52.9%、32.7%)(P<0.05),B1组的胚胎种植率高于B2组(P<0.05)。结论:全胚冷冻可明显提高首次冻融移植周期临床妊娠率和胚胎种植率,冻融囊胚移植可获得比冻融卵裂胚移植更好的临床结局。

冻融周期囊胚移植的临床价值

目的探讨冻融囊胚移植、冻融卵裂期胚胎复苏后行囊胚移植的临床价值。方法回顾性分析2012年9月至2013年8月在该院生殖医学中心接受冻融胚胎移植治疗患者共518个周期的临床资料,按移植冻融胚胎类型分为3组。A组:冻融囊胚移植,共129个周期;B组:卵裂期胚胎复苏后行囊胚培养后移植,共123个周期;C组(对照):冻融卵裂胚移植,共266个周期。比较各组的临床结局及A、B两组间新鲜周期胚胎和冻融周期的囊胚形成率和取消率。结果 A、B组的生化妊娠率、临床妊娠率和胚胎种植率(70.5%、61.2%、42.3%;67.5%、58.2%、40.2%)显著高于C组(53.0%、42.5%、23.1%)(P<0.05);3组间流产率、异位妊娠率、多胎妊娠率差异无统计学意义(P>0.05)。新鲜周期第3天优质胚胎与冻融胚胎复苏后的囊胚形成率(62.5%vs.57.7%)差异无统计学意义(P>0.05),均显著高于新鲜周期第3天非优质胚胎的囊胚形成率(20.3%)(P<0.05)。结论冻融周期行囊胚移植可以获得较满意的临床结局;冻融卵裂期胚胎行囊胚培养后可获得较高的囊胚形成率和临床结局。

卵母细胞玻璃化冷冻的临床应用价值

目的探讨卵母细胞玻璃化冷冻技术在辅助生殖技术(ART)中应用的可行性、安全性及临床价值。方法回顾性分析行冻融卵母细胞单精子注射⁃胚胎移植(ICSI⁃ET)113个周期患者的临床资料(冻卵组),并按1∶3比例随机抽取同期行新鲜周期ICSI⁃ET共339个周期作为对照组,分析卵母细胞玻璃化冷冻原因,比较两组受精情况及临床妊娠结局。结果卵母细胞冷冻的原因包括取卵日男方无活精子、男方取精失败、家庭意外及女方获卵数较多(≥25枚)等。冷冻卵母细胞复苏率为85.73%,冻卵组无可移植胚胎周期率显著高于对照组,卵裂率、第3天(D3)优质胚胎率显著低于对照组(P<0.05);两组间受精率、D3可移植胚胎率、种植率、临床妊娠率、活产率差异均无统计学意义(P>0.05)。结论卵母细胞玻璃化冷冻可获得与新鲜卵母细胞相近的临床结局,并可作为取卵日无可用精子的补救措施及女性生育力的保存方法。

雄性生殖细胞冷冻保存研究进展

随着单精子及精子细胞卵胞浆内显微受精技术的发展,雄性生殖细胞冷冻保存技术已成为辅助生殖技术的重要内容,为男性因素不育患者的临床助孕提供了物质保障基础。目前,雄性生殖细胞冷冻方法包括程序化冷冻和玻璃化冷冻;冷冻保护剂可有效降低细胞的冷冻损伤,根据其特性分为渗透性保护剂和非渗透性保护剂两大类;冷冻载体中冷冻环、冷冻叶片等应用较广泛。雄性生殖细胞冷冻的效果与冷冻方法、冷冻保护剂和冷冻载体等密切相关。

干细胞向雌性生殖细胞分化的研究进展

干细胞是一类具有自我更新和多向分化潜能的细胞。根据其来源不同,干细胞可分为胚胎干细胞、成体干细胞以及诱导性多能干细胞。生殖细胞系负责跨代传递遗传和表观遗传信息,以确保新的正常个体产生。人类辅助生殖技术(ART)虽可解决部分难治性不孕不育患者的生育问题,但尚不能解决由于卵巢早衰生殖细胞缺乏导致的不孕,如果在体外可以将干细胞定向诱导分化为生殖细胞,则可能通过ART帮助卵巢早衰患者获得健康后代。雌性配子发育经历了多个严格、复杂的过程,包括原始生殖细胞(PGC)特化、增殖、迁移到生殖嵴并最终分化为成熟的卵母细胞。然而具体过程尚不明确。近年来学者已建立了干细胞向雌性生殖细胞分化的体外模型,并取得了长足进步。

卵泡中晚期添加HMG对体外受精-胚胎移植结局的影响

目的：探讨促排卵过程中添加人绝经期促性腺激素（HMG）对体外受精-胚胎移植（IVF-ET）结局的影响。方法回顾性分析在解放军105医院生殖中心接受IVF-ET治疗的406例不育患者的临床资料，研究对象均于月经第3～5天行重组人促卵泡激素（r-FSH）促超排卵，当卵泡最大直径达14 mm时，A组（257个周期）每天添加HMG 75～150 U（r-FSH＋ HMG组），B组（149个周期）继续使用r-FSH至HCG注射日。按添加 HMG当日的血清黄体生成素（LH）水平，将A组再分为A1组：LH＜1 U/L ，99个周期；A2组：1 U/L≤L H≤2 U/L ，96个周期；A3组：L H＞2 U/L ，62个周期。比较各组的临床结局。结果 A组促性腺激素（Gn）用量、Gn时间、受精率及妊娠率显著高于B组，流产率显著低于对照组，差异有统计学意义（P＜0．05）；两组间添加HMG日及 HCG日血清LH水平、获卵数、卵裂率及胚胎种植率差异均无统计学意义（P＞0．05）。各亚组 HMG的添加剂量随HMG日LH水平升高逐渐减少，差异有统计学意义（P＜0．05）；A3组的Gn时间显著低于A1、A2组，而受精率则显著高于A1、A2组，差异有统计学意义（P＜0．05）；A2的妊娠率显著高于A1组，差异有统计学意义（P＜0．05）。A1、A2、A33组间r-FSH用量、HCG日LH水平、获卵数、卵裂率、胚胎种植率及流产率差异均无统计学意义（P＞0．05）。结论卵泡中晚期添加HMG可提高妊娠率，降低流产率，尤其血清LH在1～2 U/L时添加 HMG可获较好的临床结局。

经阴道彩色多普勒超声技术预测卵巢在体外受精-胚胎移植过程中的反应性

目的探讨经阴道彩色多普勒超声（TV-CDS）预测接受体外受精-胚胎移植（IVF-ET）患者卵巢反应性的价值。方法选择接受IVF-ET的83例不孕症患者,根据获卵数分为低反应组（获卵数≤5个）、正常反应组（获卵数6~15个）和高反应组（获卵数〉15个）。采用TV-CDS测量月经周期第3天（d3）和人绒毛膜促性腺激素（hCG）注射日（hCG日）的卵巢总体积、窦卵泡数（AFC）、卵巢间质血流搏动指数（PI）、阻力指数（RI）、动脉收缩期峰值流速/舒张末期血流速度比值（S/D）、收缩期最大血流速度（PSV）、舒张末期血流速度（EDV）值,分析上述指标对卵巢反应性的预测价值。记录并比较三组间的卵巢间质血流参数和卵子数、获卵数、受精卵数和优质胚胎数。结果高反应组卵巢体积显著大于低反应组和正常反应组,三组间AFC、MⅡ卵子数、受精卵数、优质胚胎数差异均有统计学意义;低反应组与高反应组d3的PI、RI、S/D、PSV和EDV间差异有统计学意义。卵巢体积及AFC与获卵数、MⅡ卵子数、受精卵数呈正相关;d3 PI、RI、S/D与获卵数呈负相关,d3 PSV、EDV与获卵数呈正相关。结论 AFC、卵巢总体积、d3卵巢间质血流对预测卵巢反应性有一定价值。

促性腺激素释放激素激动剂降调节后血清黄体生成素水平对体外受精-胚胎移植结局的影响

目的探讨促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)降调节后月经第3天血清黄体生成素(LH)水平对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)结局的影响。方法回顾分析2006年6月至2010年6月在我院接受IVF-ET治疗288个周期的临床资料。患者均采用GnRH-a长方案进行垂体降调节,按降调后月经第3天血清黄体生成素(LH)水平分为三组,A组:LH≤1U/L,共57个周期;B组:1U/L<LH≤2.5 U/L,共188个周期;C组:2.5 U/L<LH<5 U/L,共43个周期。比较三组促性腺激素(Gn)使用天数、剂量,人绒毛膜促性腺激素(hCG)注射日血清雌二醇(E_2)、LH水平及子宫内膜厚度、获卵数、受精率、卵裂率、优质胚胎率、临床妊娠率及流产率。结果 hCG注射日血清E_2和LH水平在三组间呈递增趋势,各组间血清LH水平有显著性差异(P<0.05),而Gn天数、Gn用量、获卵数、卵裂率在各组间均无显著性差异(P>0.05);A组的优质胚胎率和临床妊娠率显著低于B、C组(P<0.05),C组的流产率显著高于A、B组(P<0.05)。结论 GnRH-a降调节后月经第3天血清LH水平过低可导致hCG注射日E_2和LH水平下降,影响子宫内膜厚度,并导致受精率、优质胚胎率及临床妊娠率下降,流产率上升,但LH过高也可导致流产率增加。

弱精子症患者精子凋亡和线粒体膜电位等相关研究

目的比较正常人与弱精子症患者精子早期凋亡率、线粒体膜电位、活性氧及钙离子含量的差异,探讨其与精子活力的相关性。方法收集50例精液标本,标本洗涤处理后分别行Annexin V-FITC/PI、JC-1、DCFH-DA及Fluo3-AM荧光染色,采用流式细胞术(FCM)分析两组精子早期凋亡率、死亡率、线粒体膜电位、活性氧及钙离子含量。结果与对照组精子比较,弱精子症组精子早期凋亡率显著增加(P<0.01),线粒体膜电位明显降低(P<0.01),两组精子死亡率,精子内活性氧及钙离子含量无统计学意义(P均>0.05);精子早期凋亡率与线粒体膜电位丧失率间呈显著正相关(r=0.789,P<0.01)。结论人精子早期凋亡率增加及线粒体膜电位降低可能是弱精子症的重要病因;线粒体膜电位检测对预测精子早期凋亡具有重要的应用价值。

早期卵裂对体外受精-胚胎移植妊娠结局的影响

目的探讨早期卵裂对体外受精胚胎移植(IVF-ET)临床结局的影响。方法回顾性分析2005年1月至2008年12月在我院接受IVF-ET治疗的356个移植周期2,967枚卵裂胚资料。结果将2,967枚卵裂胚分为早期卵裂胚组和非早期卵裂胚组,早期卵裂组优胚率显著高于非早期卵裂胚组(87.4% vs. 62.9%,P<0.01);将356个移植周期分为全部移植早期卵裂胚(A组)、部分移植早期卵裂胚(B组)和无早期卵裂胚移植(C组)三组,A、B组的临床妊娠率(53.3% vs.53.6%)、种植率(36.6% vs. 32.1%)均显著高于C组(25.4% vs. 14.9%,P<0.05),且A组的多胎率显著高于C组(42.5%vs. 19.4%,P<0.05)。结论早期卵裂胚可作为预测胚胎发育潜能的一个有效指标,选择性移植早期卵裂胚有助于提高IVF-ET的临床妊娠率。

细胞外信号调节激酶和p38丝裂原活化蛋白激酶的表达水平对人精子活动力的影响

目的:比较细胞外信号调节激酶(ERK)、P38丝裂原活化蛋白激酶(P38MAPK)的磷酸化和蛋白表达水平在正常精子和弱精子症患者精子中的差异,旨在探讨ERK和P38MAPK表达水平与精子活动力的相关性。方法:收集正常精液(精子浓度≥20×106/ml,a级精子≥25%或a+b级精子≥50%)和弱精子症患者精液(精子浓度≥20×106/ml,a级精子<25%或a+b级精子≤40%)各20份,洗涤后提取精子总蛋白,采用Western印迹方法分别检测ERK、P38MAPK的磷酸化和蛋白表达水平。结果:ERK和P38MAPK在正常精子和弱精子症患者精子中均有表达,ERK、P38MAPK蛋白表达水平和P38MAPK磷酸化水平在弱精子症患者组显著升高(P<0.05),而两组间ERK磷酸化水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论:人精子ERK、P38MAPK蛋白表达水平和P38MAPK磷酸化水平升高可能是精子活动力低下的原因之一。

丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)抑制剂对人精子活动力的影响

丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）属于丝/苏氨酸蛋白激酶,有报道[1]其家族成员细胞外信号调节激酶（extracellular-signal regulated protein kinase,ERK）和p38MAPK定位于精子尾部中段,参与精子活动力的调节;17-β雌二醇可通过PI3K/Akt通路激活ERK,增加精子活动力,

蛋白激酶C(PKC)对人精子活动力的影响及其作用机制

目的探讨人精子蛋白激酶C(PKC)的表达水平对精子活动力的影响及其作用机制。方法收集30份正常精液(精子浓度≥20×106/mL,a≥25%或a+b≥50%)和20份弱精子症患者精液(精子浓度≥20×106/mL,a+b≤40%)分别作为对照组和弱精症组。对照组先后加入PKC激活剂PMA和抑制剂GF109203X,用流式细胞术(FCM)检测精子中PKCβⅠ含量;用Western blot方法检测ERK蛋白和磷酸化表达水平。结果弱精组精子PKCβⅠ含量显著低于对照组(P<0.05);加入PMA后精子ERK磷酸化水平明显升高(P<0.05),加入GF109203X后ERK磷酸化水平明显降低(P<0.05)。结论精子活力低下的原因与PKC的含量降低有关,PKC可通过ERK信号传导途径参与调节精子活动力。