贝伐珠单抗诱导小鼠蛋白尿的形成机制

目的贝伐珠单抗在肿瘤靶向治疗中已广泛应用,蛋白尿作为其不良反应之一在一定程度上影响了临床疗效。文中探索抗血管生成剂贝伐珠单抗诱导小鼠蛋白尿形成的机制。方法 24只健康清洁级小鼠随机数字表法分为对照组、贝伐珠单抗低、中、高剂量组[贝伐珠单抗用量分别为10、35、60 mg/(kg·w)]。贝伐珠单抗组小鼠静脉注射不同剂量贝伐珠单抗,对照组静脉注射相同体积的等渗盐水。4周末收集24 h尿液,测尿蛋白总量,随后眼球取血,检测生化值,最后处死小鼠,留取肾组织,观察肾小球病理变化,并行免疫组化、Western blot及Real time-PCR方法检测。结果与对照组24 h尿蛋白量(0.23±0.02)比较,贝伐珠单抗低剂量组蛋白表达(0.29±0.07)升高,但差异无统计学意义(P>0.05);贝伐珠单抗中、高剂量组小鼠24 h尿蛋白量表达升高[1.14±0.13、1.43±0.10],差异有统计学意义(P<0.05);贝伐珠单抗低、中、高剂量组两两比较的差异有统计学意义(P<0.05)。4组血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)差异无统计学意义(P>0.05)。光镜下观察对照组小鼠肾组织结构正常,贝伐珠单抗低剂量组未见明显病理改变,贝伐珠单抗中、高剂量组小鼠肾小球内皮细胞萎缩,呈空泡状改变。免疫组化显示对照组及贝伐珠单抗低剂量组血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、podocin表达中或强阳性,贝伐珠单抗中、高剂量组呈弱阳性或阴性。同时Western blot法测定肾组织中VEGF、podocin蛋白的表达量:与对照组VEGF表达(0.76±0.09)比较,贝伐珠单抗低剂量组和贝伐珠单抗中剂量组VEGF表达(0.81±0.10、0.64±0.08)无明显差异(P>0.05),而贝伐珠单抗高剂量组(0.39±0.05)明显降低(P<0.01)。与对照组podocin蛋白表达量(0.67±0.07)比较,贝伐珠单抗中剂量组、贝伐珠单抗高剂量组(0.43±0.10、0.19±0.04)明显下降(P<0.05),贝伐珠单抗低剂量组(0.67±0.03)差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组VEGF、podocin mRNA表达(1.23±0.25、1.17±0.19)相比,贝伐珠单抗低剂量组VEGF、podocin mRNA(1.07±0.61、1.12±0.09)表达无明显变化(P>0,05),贝伐珠单抗中、高剂量组VEGF、podocin mRNA表达(0.82±0.38、0.71±0.18;0.47±0.64、0.42±0.09)均明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论贝伐珠单抗可损伤肾小球滤过膜,导致蛋白尿形成,其部分机制可能与下调VEGF、podocin蛋白及其mRNA表达有关。