有吸烟史的口腔白斑病患者microRNA异常表达及癌变相关生物信息学分析

目的研究有吸烟史的口腔白斑病(oral leukoplakia,OLK)患者病损组织microRNA(miRNA)的异常表达,并对差异miRNAs进行癌变相关生物信息学分析。方法利用人miRNA OneArray?v5.1微阵列芯片检测吸烟组(n=6)和非吸烟组(n=4)OLK石蜡标本间差异表达的miRNA,并运用生物信息学方法从中筛选出与OLK癌变密切相关的目标miRNA,随后对目标miRNA的靶基因进行基因本体数据库(gene ontology,GO)富集分析和KEGG通路分析以预测其可能的作用机制。结果吸烟组与非吸烟组OLK组织中共检出174个差异表达的miRNAs(P<0.05),其中,39个miRNAs在吸烟组表达上调(log2(FC)≥0.585),135个miRNAs表达下调(log2(FC)≤-0.585)。运用生物信息学方法从中筛选出8个与OLK癌变密切相关的目标miRNAs,包括:hsa-miR-6857-5p、hsa-miR-6745、hsa-miR-15a-5p、hsa-miR-363-5p、hsa-miR-6867-3p、hsa-miR-95-3p、hsa-miR-3607-5p、hsa-miR-9500。对上述目标miRNAs的靶基因行GO富集分析,结果显示大部分基因参与调控细胞增殖、凋亡、刺激反应等生物学活动。KEGG通路分析发现上述基因高度相关的作用通路为癌信号通路、PI3K-Akt及FoxO信号通路。结论吸烟可通过改变OLK组织miRNA表达水平进而改变特定基因功能促进白斑癌变进程。

米诺环素凝胶辅助治疗牙周炎的临床研究

目的评价并比较米诺环素凝胶和派丽奥的缓释性能和临床疗效。方法将11位患者的22颗患牙随机分为两组:①龈下刮治和根面平整术(SRP)+米诺环素凝胶(实验组);②SRP+派丽奥(对照组),分别在治疗前和治疗后4周检查龈沟出血指数(SBI)、探诊深度(PD)、松动度(MOB)和龈沟液量4项临床指标;在牙周袋内用药后收集患牙龈沟液,测量牙周袋内的药物浓度。结果治疗后,实验组与对照组各临床指标相比差异无统计学意义;在牙周局部使用米诺环素凝胶后,第1天药物浓度为3.334 mg/L,以后释放速度逐渐下降,到第7天浓度为1.857 mg/L,使用派丽奥后,第1天的浓度为3.341 mg/L,到第7天降至0.714 mg/L,两种药物均可维持1周的有效药物浓度。结论米诺环素凝胶局部使用后可在牙周袋内缓慢释放,在辅助治疗牙周炎方面与派丽奥有相同的疗效,具有一定的临床应用价值。

重度牙周炎患者种植时机的选择和短期疗效观察

目的：观察重度牙周炎患者行系统牙周治疗后进行种植修复的短期临床疗效。方法：选择因牙周炎失牙需种植修复的重度牙周炎患者42例,先进行牙周系统治疗,感染控制后行种植治疗,并针对骨量不足等问题进行干预;共植入种植体80个,术后3~6个月永久修复。观察患者修复后义齿使用情况,记录修复后即刻和1、3个月种植体周围组织状况。结果：所有患者经牙周系统治疗后,PD、BOP、PLI均下降（P〈0.05）;种植修复后1、3个月的PD、m SBI、m PLI分别与修复后即刻比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）;观察期内所有种植体行使功能良好,周围软组织健康,无明显炎症。结论：重度牙周炎患者行种植治疗可获得良好的短期临床效果,术前完善的牙周系统治疗和严格的菌斑控制是治疗成功的关键。

光动力疗法联合龈下刮治和根面平整术治疗重度慢性牙周炎的疗效观察

目的比较光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)辅助龈下刮治术及根面平整术(scaling and root planing,SRP)和单独使用SRP治疗重度慢性牙周炎的临床疗效。方法对34例重度慢性牙周炎患者做自身对照,每个病人选取PD≥7 mm的位点,一共300个,随机分为实验组(SRP/PDT)和对照组(SRP)。实验组在龈下刮治术及根面平整术后做一次光动力治疗(光敏剂为26.7 mmol·L-1亚甲基蓝,660 nm激光),对照组仅行SRP。术前、术后1个月、3个月检查实验组及对照组的牙周探诊深度(probing depth,PD)和探诊出血(bleeding on probing,BOP)。结果实验组和对照组术前PD和BOP差异无统计学意义(P>0.05),术后1个月和3个月的结果显示,两组PD和BOP较术前均有改善,且实验组的PD和BOP改善效果均优于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论对重度慢性牙周炎患者应用PDT辅助SRP治疗较单独使用SRP效果更佳。

生长因子在牙周组织再生中的有效释放方式

生长因子在牙周组织再生过程中起重要的作用,是组织修复的基本调节者,但其在体内半衰期短,直接应用达不到预期的效果。为此,国内外众多学者正致力于寻找一种能够使生长因子持续高效发挥作用的方法,其中,制备生长因子缓释微球,利用智能控释载体材料,使生长因子缓慢而持续地释放;采用基因工程技术,通过载体将生长因子的目的基因整合入目的细胞,也能使生长因子在细胞和组织中持续局限性地表达。这两种方法均有望解决生长因子不能有效发挥其生物学作用这一难题。本文就建立生长因子缓释和控释系统以及基因工程技术等研究进展作一综述。

牙周风险评估系统对牙周炎患者支持治疗期临床疗效的评价

对60例慢性牙周炎患者18个月的支持治疗期进行回顾性研究,参照牙周风险评估系统(PRA)提供的复诊时间,其中规律复诊者(RC)23例,不规律复诊者(EC)37例,比较两组失牙数、探诊深度、探诊出血率和复发危险度的变化。结果显示RC组疗效较好,表现为未失牙,EC组失2颗牙;RC组探诊深度平均减少1.11 mm,EC组减少0.80 mm;RC组探诊出血率平均减少42.72%,EC组减少34.10%;RC组21.7%的患者由高复发危险度变为中复发危险度,EC组为13.5%。RC组的探诊深度和探诊出血率比EC组改善明显(P<0.05)。

结扎诱导牙周炎大鼠脑内炎性及β淀粉样蛋白变化的实验研究

目的探讨结扎诱导的实验性牙周炎大鼠脑内的炎性变化及β淀粉样蛋白的变化。方法18只SD大鼠随机分为3组(n=6):空白对照组、慢性牙周炎组和慢性牙周炎+腹腔注射TAK-242组,通过结扎大鼠双侧上颌第一磨牙牙颈部辅以接种牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)的方法建立大鼠牙周炎模型。在建模成功后的第2个月行标本取材,通过Micro-CT分析大鼠牙槽骨破坏的情况;通过实时荧光定量PCR检测大鼠牙龈组织和海马组织中白介素(IL)-6、IL-1β和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及大鼠海马组织中Toll样受体4(TLR4)、白细胞分化抗原14(CD14)和NF-κB的mRNA表达;通过ELISA评估大鼠海马组织中IL-6、IL-1β和TNF-α及β淀粉样蛋白-40(Aβ_(40))和Aβ_(42)的蛋白表达。结果结扎大鼠双侧上颌第一磨牙牙颈部辅以接种牙龈卟啉单胞菌可成功建立大鼠实验性牙周炎模型,PCR和ELISA结果显示实验性牙周炎可上调大鼠海马组织中炎症因子(IL-6、IL-1β和TNF-α)的表达水平,ELISA结果显示实验性牙周炎大鼠海马组织中Aβ_(42)的含量升高;但腹腔注射TAK-242预处理可降低已经上调的炎症因子及Aβ_(42)的表达,这一作用是通过下调TLR4/NF-κB信号通路实现。结论结扎诱导辅以牙龈卟啉单胞菌接种建立的大鼠实验性牙周炎可诱导脑部炎症及促进脑内Aβ_(42)的沉积,炎症可能在牙周炎与阿尔茨海默病等系统性疾病的相关性中发挥重要作用。

微创隧道技术结合树脂充填在治疗多牙位牙龈退缩伴非龋性颈部病损中的应用

目的评价微创隧道技术(TUN)联合上皮下结缔组织移植术(CTG)和树脂充填治疗多牙位牙龈退缩伴非龋性颈部病损(NCCL)的临床疗效及美学效果。方法选择2019年10月至2020年10月在安徽医科大学附属口腔医院牙周黏膜科就诊的多牙位MillerⅠ/Ⅱ/Ⅲ类牙龈退缩伴冠根部NCCL患者11例(共30颗牙位)临床资料,予以TUN+CTG结合树脂充填治疗,比较术前及术后1年时的牙龈退缩深度(RD)、角化龈的宽度(KTW)、探诊深度(PD),测算根面覆盖率,并在患者术后1年时进行根面覆盖美学评分(RES),对其美学效果进行评判。结果与术前比较,术后1年时RD和KTW均较术前改善(P<0.05),PD差异无统计学意义(P>0.05);根面覆盖率达(88.89±15.98)%,完全根面覆盖率达66.67%;RES测评为(8.367±0.490)分,患者对外观较满意。结论TUN+CTG结合树脂充填可以有效治疗多牙位牙龈退缩合并冠根部NCCL,效果满意。

抗牙龈卟啉单胞菌卵黄抗体的制备、纯化和生物学特性鉴定

目的:制备特异性抗牙龈卟啉单胞菌(Pg)的鸡卵黄免疫球蛋白(Ig Y)并检测其生物学特性。方法:厌氧培养牙龈卟啉单胞菌,将甲醛灭活的菌体经翅膀下浅层肌肉免疫150日龄罗曼母鸡3次,每次间隔10 d。取鸡蛋用两步硫酸铵沉淀法提取Ig Y,BCA法测定蛋白质含量,ELLSA法检测纯化后Ig Y的特异性和抗体效价变化,并进行SDS-PAGE和Western blotting分析。观察抗Pg-Ig Y对红细胞凝集的抑制作用。结果:经3次免疫后,抗体滴度最高可达25 600,纯化后每个鸡蛋可得约70 mg Ig Y抗体;SDS-PAGE分析,纯化的Ig Y有1条主要蛋白带,相对分子质量(Mr)为180 k D,纯度为65%;Western blotting分析,该Ig Y抗体可识别抗原Pg。每孔3.125μg Pg-Ig Y可有效抑制Pg的红细胞凝集活性;1 mg/m L Pg-Ig Y可有效抑制Pg生长。结论:本研究得到的Ig Y特异性强,产量和纯度高。

氯化锂介导经典Wnt/β-catenin信号通路在大鼠脂肪干细胞增殖和成骨中的作用

目的探讨在体外生长环境下不同浓度氯化锂对脂肪干细胞(ADSCs)增殖和成骨分化的作用及其可能的机制。方法①从3周龄SD大鼠腹股沟脂垫分离出脂肪组织,使用0.1%Ⅰ型胶原酶消化后置于含10%胎牛血清DMEM培养,以0、2.5、5、10、20、40 mmol/L浓度的氯化锂作用ADSCs24、48、72 h,用MTT法测定氯化锂对细胞增殖的作用;②ADSCs加入含0、2.5、5、10、20、40 mmol/L氯化锂的成骨培养液中培养7 d后测定细胞中碱性磷酸酶(AKP)的活性;③用RT-PCR法检测成骨诱导3 d后,不同浓度氯化锂作用7 d时ADSCs中β-catenin、糖原合成激酶3β、AKP的表达。结果在体外环境培养下,低浓度氯化锂(2.5、5、10 mmol/L)促进干细胞增殖,高浓度氯化锂(20、40 mmol/L)抑制细胞增殖。5、10 mmol/L氯化锂促进ADSCs中AKP的活性,但是40 mmol/L具有明显抑制AKP活性的作用。同时,氯化锂能上调β-catenin和AKP的表达。结论氯化锂在体外对大鼠ADSCs增殖有双重影响,并且促进AKP活性和ADSCs成骨分化,具有剂量依赖性。5 mmol/L浓度的氯化锂可作为促进大鼠ADSCs增殖和成骨分化的最适浓度。

脂肪间充质干细胞的免疫学特性及其在组织工程中的应用

脂肪间充质干细胞(ADSCs)具有多分化潜能,且来源广泛、分离简单,同时具有低免疫原性,这为异源性组织工程器官的构建提供了可能。现就ADSCs的免疫学特性及其在组织工程中的应用进展作一综述。

Wnt信号配体与成骨的相关进展

在组织工程领域中,干细胞成骨应用较广泛,其各项功能的实现受到多种信号通路的调控,其中Wnt信号通路被认为是对干细胞的增殖和分化起关键作用的信号通路之一,在骨骼发育和维持骨内生理性稳态方面起着重要作用。Wnt信号配体作为信号通路的重要组成部分,影响着Wnt信号通路的表达。现就不同Wnt信号配体与成骨作用之间的关系做一综述。

富血小板纤维蛋白提取液对牙龈成纤维细胞增殖活性的影响

目的研究富血小板纤维蛋白提取液(platelet-rich fibrin extract,PRFe)及其释放的血小板衍生生长因子(platelet derived growth factor,PDGF)对牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGFs)增殖活性的影响,为其应用于辅助促进牙龈软组织增量提供实验依据。方法通过组织块培养法分离培养牙龈成纤维细胞,将收集的富血小板纤维蛋白(platelet-rich fibrin,PRF)转化为PRFe,电镜观察PRF三维结构并通过ELISA定量测定PRF中PDGF含量,并将PRFe配比为2.5%PRFe、5%PRFe、7.5%PRFe、10%PRFe、12.5%PRFe、15%PRFe,通过CCK8法检测不同浓度PRFe对牙龈成纤维细胞增殖活性的影响,确定最佳PRFe浓度后,流式细胞周期实验检测PRFe对细胞增殖周期的影响,并通过中和其释放的PDGF,观察PDGF对牙龈成纤维细胞增殖活性的影响。结果PRF为三维网状结构,其间含有大量的生长因子,其中PDGF释放在第7天达到峰值;不同浓度PRFe对HGFs增殖活性结果显示,HGFs对PRFe呈浓度依赖性,但在5%PRFe浓度时效果最佳(P<0.05),其后浓度增加对HGFs增殖影响差异无统计学差异(P>0.05);流式细胞周期实验结果表明,5%PRFe可以刺激牙龈成纤维细胞S期分裂增殖;而PDGF中和实验结果表明,中和部分PDGF对牙龈成纤维细胞的增殖呈抑制作用。结论5%浓度的PRFe体外促进牙龈成纤维细胞的效果最佳,PRF所释放的PDGF在促进牙龈成纤维细胞的增殖中起着重要作用。

Miller Ⅲ度牙龈退缩比格犬实验性动物模型的构建

目的构建Miller Ⅲ度牙龈退缩动物模型,为探索Miller Ⅲ度牙龈退缩的治疗奠定基础。方法选择2只成年雄性比格犬,每只犬选择4颗犬齿采取去除颊侧软硬组织显露牙根表面的方法来建立Miller Ⅲ度牙龈退缩动物模型,通过检测造模术后1、2、4、6、8周的垂直向牙龈退缩量(vertical gingival retraction,VGR)、水平向牙龈退缩量(horizontal retraction,HGR)、角化龈宽度(keratosis tissue width,KTW)、牙龈组织厚度(gingival tissue thickness,GTT)、探诊深度(probing depth,PD)评估动物模型是否建立成功。结果经过临床指标的观察,PD造模前后均小于3 mm,无深牙周袋形成;造模前VGR为0 mm,造模后VGR的范围为5~6.38 mm,VGR造模前后对比差异有统计学意义(P<0.05),术后VGR结果按时间点分组进行对比,术后2、4、6、8周各组之间差异均无统计意义(P>0.05);造模前HGR为0 mm,造模后HGR在10.5 mm上下波动,HGR造模前后对比差异有统计学意义(P<0.05),对术后HGR结果按时间点分组进行单因素方差分析,组间对比结果差异无统计学意义(F=0.952,P=0.45);造模前KTW范围为6~9 mm,造模后KTW在2 mm上下波动,KTW造模前后对比差异有统计意义(P<0.05),术后KTW结果按时间点分组进行对比,术后各组之间差异均无统计学意义(P>0.05)。造模前GTT为1.5 mm,造模后GTT的范围为1.5~2 mm,术前及术后GTT结果按时间点分组对比,结果显示术后1周与术后2周对比差异无统计学意义(P>0.05),术后1周与其他各组对比差异有统计学意义(P<0.05)。结论本实验所采用的方法成功构建出Miller Ⅲ度牙龈退缩动物模型,并在创口愈合后能够保持稳定。

富血小板纤维蛋白膜治疗MillerⅢ类牙龈退缩的疗效分析

目的:评估改良冠向复位瓣术(MCAF)联合富血小板纤维蛋白膜(PRF)或上皮下结缔组织移植物(SCTG)在MillerⅢ类牙龈退缩治疗中的临床效果。方法:选择符合MillerⅢ类牙龈退缩诊断标准的12例患者,随机分为实验组(MCAF+PRF)和对照组(MCAF+SCTG),其中6例15颗患牙纳入实验组(PRF组),6例15颗牙纳入对照组(SCTG组)。在术前(基线)及术后8月测量并记录牙龈退缩的量(RD)、牙周探诊深度(PD)、角化龈宽度(KTW)等指标。结果:两组间术前PD、RD、KTW无统计学差异(P>0.05),两组术后8个月RD和KTW较术前均有所改善(P<0.05);两组间术后PD、RD无统计学差异(P>0.05),但平均根面覆盖率实验组(57±20)%,小于对照组的(72±21)%。结论:MCAF+PRF治疗MillerⅢ类牙龈退缩的根面覆盖率虽不及MCAF+SCTG,但同样可以获得良好的根面覆盖效果,改善临床症状;同时,由于PRF的应用,避免了第二术区,减少术后不适感,具有一定临床推广价值。

TUN和MCAF在治疗MillerⅠ/Ⅱ类牙龈退缩中的临床疗效及术后美观对比

目的评估冠向复位瓣术和隧道瓣术结合上皮下结缔组织移植物在治疗MillerⅠ/Ⅱ类牙龈退缩治疗中的临床效果及术后美观对比。方法选择符合MillerⅠ/Ⅱ类牙龈退缩诊断标准的10例患者,随机分为试验组(TUN+CTG)和对照组(MCAF+CTG),其中5例11颗患牙纳入试验组,5例11颗牙纳入对照组。在术前(基线)及术后6月测量并记录牙龈退缩的量、牙周探诊深度、角化龈宽度及患者主观评价和根面覆盖美观评分等指标。结果两组间术前PD、RD、KTW无统计学差异(P>0.05),两组术后6个月RD和KTW较术前均有所改善(P<0.05);两组间术后PD、RD无统计学差异(P>0.05),但CRC实验组(95.2%)略大于对照组的(92.5%)。患者术后2周TUN组疼痛VAS(2.36±0.81)略大于MCAF组(2.0±0.63),而日常活动影响TUN组VAS(2.91±0.7)小于MCAF组(3.36±0.81);术后6个月RES评分两组无统计学差异。结论TUN和MCAF对改善MillerⅠ/Ⅱ类牙龈退缩均有较好临床效果,美学效果较好,且TUN+CTG在一定程度上可以促进术区愈合,舒适度较高。

纤维桩+复合树脂+氧化锆全瓷冠修复根管治疗后后牙楔状缺损的疗效分析

目的:探究纤维桩+复合树脂+氧化锆全瓷冠修复根管治疗后后牙楔状缺损患者的效果及美观满意度。方法:纳入2022年1月-2023年1月在笔者医院就诊的102例后牙楔状缺损患者,根据患者自主选择意愿分为研究组(n=50)和对照组(n=52),对照组行金属桩核+金属烤瓷冠修复,研究组行纤维桩+复合树脂+氧化锆全瓷冠修复。6个月后,对比两组临床疗效,观察两组牙周健康情况(牙龈指数、菌斑指数、龈沟出血指数),检测牙周炎症[肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-4(Interleukin-4,IL-4)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)],调查美观满意度[美国公共健康服务标准(United states public health service,USPHS)]和实用度(咀嚼功能、咬合情况、语言功能),比较两组并发症发生情况。结果:治疗后,研究组治疗有效率达92.00%,高于对照组的76.92%(P<0.05);两组牙周健康相关指数及TNF-α、IL-4、IL-6均较治疗前降低,且研究组降低幅度大于对照组(P<0.05);治疗后,研究组牙齿表面形态、色泽协调性、边缘着色满意度均高于对照组(P<0.05),两组咀嚼功能、咬合情况、语言功能均较治疗前提高,但差异无统计学意义(P>0.05);两组并发症发生率比较治疗组低于对照组(P<0.05)。结论:采用纤维桩+复合树脂+氧化锆全瓷冠修复根管治疗后后牙楔状缺损能够减轻炎症反应,提升患者牙周健康,增加美观满意度及实用度,疗效显著,安全性高。