目的探究妊娠小鼠子宫内膜中AMP依赖的蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)表达对胚胎着床调控作用的实验研究。方法使用ICR小鼠建立1~8天正常妊娠小鼠、1~5天假妊娠小鼠模型、阴性对照(NC)组和AMPK抑制剂(Dorsomorphin)组。...目的探究妊娠小鼠子宫内膜中AMP依赖的蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)表达对胚胎着床调控作用的实验研究。方法使用ICR小鼠建立1~8天正常妊娠小鼠、1~5天假妊娠小鼠模型、阴性对照(NC)组和AMPK抑制剂(Dorsomorphin)组。免疫组织化学染色检测小鼠子宫内膜中AMPK蛋白的表达位置,逆转录实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测子宫内膜中AMPK及子宫着床处相关指标黏蛋白1(Muc1)、同源框蛋白A10(HoxA10)和心脏神经嵴衍生物表达蛋白2(Hand2)的mRNA水平,Western blotting检测子宫内膜中AMPK蛋白水平,统计妊娠小鼠胚泡数量。结果妊娠第1~5天,AMPK蛋白及mRNA表达逐渐增加(F=683.50,678.20,均P<0.05),且主要表达于子宫内膜管腔细胞和腺上皮细胞。与妊娠第5天相比,妊娠第6天小鼠子宫AMPK蛋白及mRNA表达减少(t=25.98,68.41,均P<0.05),且主要表达于初级蜕膜化区(PDZ)和次级蜕膜化区(SDZ),妊娠第6~8天,AMPK蛋白及mRNA在子宫内膜中表达逐渐增加(t=86.00,54.05;29.96,127.60,均P<0.05)。与假妊娠第1天比较,假妊娠第2~5天,AMPK mRNA及蛋白的表达减少(t=38.97,30.05,33.00,13.98;22.71,26.90,53.81,65.00,均P<0.05),且主要表达于腺体和管腔上皮细胞。与NC组小鼠(18.20±3.19)相比,Dorsomorphin组小鼠(9.40±2.41)平均胚泡数量减少(t=8.73,P<0.05),子宫着床处Muc1 mRNA(5.97±0.32 vs 1.10±0.15)表达增加,HoxA10(0.20±0.10vs 1.03±0.06)及Hand2(0.23±0.15 vs 0.97±0.12)mRNA表达减少(t=32.15,3.46,2.65,均P<0.05)。结论小鼠子宫内膜组织中AMPK在胚胎着床中发挥重要作用,抑制该蛋白表达将不利于胚胎着床。展开更多
文摘目的探究妊娠小鼠子宫内膜中AMP依赖的蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)表达对胚胎着床调控作用的实验研究。方法使用ICR小鼠建立1~8天正常妊娠小鼠、1~5天假妊娠小鼠模型、阴性对照(NC)组和AMPK抑制剂(Dorsomorphin)组。免疫组织化学染色检测小鼠子宫内膜中AMPK蛋白的表达位置,逆转录实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测子宫内膜中AMPK及子宫着床处相关指标黏蛋白1(Muc1)、同源框蛋白A10(HoxA10)和心脏神经嵴衍生物表达蛋白2(Hand2)的mRNA水平,Western blotting检测子宫内膜中AMPK蛋白水平,统计妊娠小鼠胚泡数量。结果妊娠第1~5天,AMPK蛋白及mRNA表达逐渐增加(F=683.50,678.20,均P<0.05),且主要表达于子宫内膜管腔细胞和腺上皮细胞。与妊娠第5天相比,妊娠第6天小鼠子宫AMPK蛋白及mRNA表达减少(t=25.98,68.41,均P<0.05),且主要表达于初级蜕膜化区(PDZ)和次级蜕膜化区(SDZ),妊娠第6~8天,AMPK蛋白及mRNA在子宫内膜中表达逐渐增加(t=86.00,54.05;29.96,127.60,均P<0.05)。与假妊娠第1天比较,假妊娠第2~5天,AMPK mRNA及蛋白的表达减少(t=38.97,30.05,33.00,13.98;22.71,26.90,53.81,65.00,均P<0.05),且主要表达于腺体和管腔上皮细胞。与NC组小鼠(18.20±3.19)相比,Dorsomorphin组小鼠(9.40±2.41)平均胚泡数量减少(t=8.73,P<0.05),子宫着床处Muc1 mRNA(5.97±0.32 vs 1.10±0.15)表达增加,HoxA10(0.20±0.10vs 1.03±0.06)及Hand2(0.23±0.15 vs 0.97±0.12)mRNA表达减少(t=32.15,3.46,2.65,均P<0.05)。结论小鼠子宫内膜组织中AMPK在胚胎着床中发挥重要作用,抑制该蛋白表达将不利于胚胎着床。
