社区获得性尿路相关性血流感染病原菌及预后分析

目的鉴定社区获得性尿路相关性血流感染患者病原种类和药敏情况,同时分析患者预后情况,为临床早期诊疗提供参考。方法回顾性分析2016年5月至2020年12月于安徽医科大学附属巢湖医院诊治的77名社区获得性尿路相关性血流感染患者的临床资料。通过血培养和药敏实验,鉴定患者病原种类和药敏特征;根据出院时患者生存情况分为生存组69例、死亡组8例,采用单因素和多因素logistic回归模型分析探索获得性尿路相关性血流感染患者死亡的危险因素。结果77例患者中,62例(80.5%)患者至少合并1种基础疾病,其中29例患有糖尿病。共分离出77株非重复致病菌,革兰阴性菌67株(87.0%),分别为大肠埃希菌48株(62.3%)、肺炎克雷伯菌12株(15.6%)、奇异变形杆菌4株(5.2%)、克氏柠檬酸杆菌1株(1.3%)、弗氏柠檬酸杆菌1株(1.3%)、铜绿假单胞菌1株(1.3%);革兰阴性菌对亚胺培南、厄他培南的敏感性为100%,大肠埃希菌对阿米卡星、头孢替坦、哌拉西林他唑巴坦的敏感性分别为98.2%、92.9%、96.4%,肺炎克雷伯菌对阿米卡星、头孢替坦、哌拉西林他唑巴坦的敏感性分别为91.2%、92.5%、98.2%;分离出革兰阳性菌10株(13.0%),分别为粪肠球菌5株(6.5%)、屎肠球菌2株(2.6%)、金黄色葡萄球菌1株(1.3%)、人葡萄球菌人亚种1株(1.3%)、沃氏葡萄球菌1株(1.3%),所有革兰阳性菌对万古霉素、利奈唑胺敏感性为100%。单因素分析结果显示两组患者在年龄、是否合并糖尿病、降钙素原及血乳酸水平之间的差异有统计学意义(均有P<0.05);多因素logistic回归分析显示年龄(OR=1.534,95%CI:1.027~1.888),合并糖尿病(OR=3.136,95%CI:1.157~8.529)及降钙素原水平(OR=6.986,95%CI:4.078~10.173)是患者住院期间死亡的独立危险因素。结论本院社区获得性尿路相关性血流感染患者主要致病菌为大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,并对抗菌药物表现出的中度耐药性,高龄、高降钙素原与合并糖尿病能明显增加患者病死率,临床医师需采取及时有效的防治措施。

恩替卡韦联合聚乙二醇干扰素-α2b治疗代偿期乙型肝炎肝硬化患者疗效研究

目的探讨应用恩替卡韦(ETV)联合聚乙二醇干扰素-α2b(Peg-IFN-α2b)治疗乙型肝炎肝硬化患者的近期疗效。方法2019年3月~2021年3月安徽医科大学附属巢湖医院诊治的代偿期乙型肝炎肝硬化患者78例,被随机分为对照组40例和观察组38例,分别给予ETV或ETV联合Peg-IFN-α2b治疗24 w,然后两组均继续接受ETV治疗,随访至48 w。常规检测肝功能指标、血清肝纤维化指标、血清HBV标志物定量和HBV DNA载量。结果在随访24 w末,观察组血清白蛋白水平为(45.7±3.2)g/L,显著高于对照组【(38.5±4.3)g/L,P<0.05】;观察组血清IV-C、HA、PⅢP和LN水平分别为(154.3±11.7)μg/L、(130.9±17.5)μg/L、(110.6±16.2)μg/L和(152.7±14.3)μg/L,均显著低于对照组【分别为(200.7±12.4)μg/L、(161.8±18.7)μg/L、(157.4±17.3)μg/L和(200.9±16.3)μg/L,P<0.05】;观察组血清HBsAg水平为1363.8(623.1,2767.6)IU/ml,显著低于对照组【2119.6(1144.9,5094.3)IU/ml,P<0.05】,而血清HBsAg阴转率为15.8%,显著高于对照组的0.0%(P<0.05)。结论联合应用ETV和Peg-IFN-α2b治疗代偿期乙型肝炎肝硬化患者可改善血清肝纤维化指标,提高血清HBsAg阴转率,可能有助于病情恢复。

p62基因过表达慢病毒载体的构建及表达

目的构建p62基因过表达慢病毒载体及其表达系统,并在人单核细胞白血病细胞(THP-1)中稳定表达,为在细胞水平研究p62基因的作用提供途径与方法。方法采用聚合酶链式反应(PCR)扩增p62基因片段,将扩增产物连接至线性化pcDNA3.1-Flag-PCDH10真核表达慢病毒载体;PCR鉴定重组质粒,将构建成功的重组质粒和包装质粒共转染至人胚胎肾细胞293(HEK 293T);用重组慢病毒感染人单核细胞白血病(THP-1)细胞,氨苄霉素筛选阳性细胞克隆株;Western blot和实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测高表达p62基因的THP-1细胞株(过表达组)和转染不含p62基因空质粒(对照组)的THP-1细胞株;感染肺炎克雷伯菌(Klebsiella Pneumoniae,K.p.)后,RT-qPCR检测THP-1细胞中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β和趋化因子1(Cxcl1)表达水平。结果通过PCR成功获得p62基因片段并连接到pcDNA3.1-Flag-PCDH10病毒载体上,并且PCR检测显示p62-pcDNA3.1-Flag-PCDH10重组质粒构建成功;挑选慢病毒感染THP-1细胞后抗氨苄青霉素细胞株,Western blot检测结果显示药筛存活的THP-1细胞较对照组细胞P62蛋白表达增多(P<0.001),且RT-qPCR检测显示p62 mRNA表达增高(P<0.001),说明成功构建高表达P62蛋白的THP-1细胞株;感染K.p.后,高表达P62的THP-1细胞中TNF-α、IL-1β和Cxcl1表达水平增高(P<0.01)。结论经三质粒包装系统可以成功构建p62-pcDNA3.1-Flag-PCDH10慢病毒载体及高表达P62蛋白THP-1细胞株,为后续p62基因的研究提供了基础。

GGT/Alb比值对慢性HBV感染者肝纤维化的无创诊断价值

目的评价GGT/Alb比值对慢性HBV感染者肝纤维化程度的无创诊断价值。方法回顾分析2018年1月—2020年3月安徽医科大学附属巢湖医院经肝穿刺活检的慢性HBV感染者资料。根据肝穿刺病理检查结果,将322例患者按照肝纤维化程度分为S0~1(183例)、S2(68例)、S3(35例)、S4(36例)。收集患者的血常规、病毒学、血生化等临床指标。正态分布的计量资料多组间比较采用单因素方差分析,非正态分布的计量资料多组间比较采用Kruskal-Wallis H秩和检验;计数资料采用χ2检验。采用Spearman等级相关分析评估3种无创模型GGT/Alb比值、APRI评分和FIB-4指数与肝纤维化程度的相关性。绘制GGT/Alb比值的受试者工作特征曲线(ROC)评价其诊断价值。结果随着肝纤维化程度的加重,患者的Alb(F=7.351)、HBV DNA(χ2=2.820)和PLT(F=6.182)逐渐降低,而年龄(χ2=3.145)、GGT(χ2=6.149)、GGT/Alb比值(χ2=7.064)、APRI评分(χ2=9.022)和FIB-4指数(χ2=8.254)逐渐升高,差异有统计学意义(P值均<0.05)。Spearman等级相关性分析得出,GGT/Alb比值与肝纤维化分期呈正相关(r=0.396,P<0.01),其相关系数高于APRI评分(r=0.327,P<0.01)和FIB-4指数(r=0.370,P<0.01)。ROC曲线结果显示,在显著肝纤维化、严重肝纤维化和肝硬化患者中,GGT/Alb比值的ROC曲线下面积(AUC)(分别为0.680、0.676、0.695)与APRI评分(AUC分别为0.692、0.698、0.728)和FIB-4指数(AUC分别为0.659、0.661、0.684)相当,差异均无统计学意义(P值均>0.05)。GGT/Alb比值分别以0.435、0.465和0.465为截断值,其用于诊断显著肝纤维化、严重肝纤维化和肝硬化患者的灵敏度分别为69.1%、66.2%和69.0%,特异度分别为65.4%、65.9%和67.0%。结论与APRI评分和FIB-4指数一样,GGT/Alb比值是一种简单、实用的肝纤维化无创诊断模型,可以对慢性HBV感染者肝纤维程度的诊断提供参考价值。

安徽地区高黏液表型肺炎克雷伯菌分子流行病学研究

分析比较2017年9月及2018年9月安徽地区高黏液表型肺炎克雷伯菌的耐药性、毒力基因、荚膜基因和ST型分布,为制定菌株防治措施提供依据。通过黏液丝实验筛选菌株137株;琼脂平板稀释法检测抗菌药的最低抑菌浓度;聚合酶链式反应检测毒力基因及荚膜血清型;多位点序列分型技术进行分子分型;分别比较菌株毒力基因rmpA或者rmpA2的阳性组与阴性组毒力基因携带率。137株菌主要来自痰标本,在70~79岁分离率最高;菌株对于庆大霉素和左氧氟沙星的耐药率有所升高;两个年度中均以aerobactin携带率最高;2017年以K2、ST65型为主,2018年以K1、ST23型为主;rmpA阳性组rmpA2携带率和70~79岁感染率高于阴性组,rmpA2阳性组kfu携带率和70~79岁感染率高于阴性组。应综合菌株表型及基因来鉴定菌株类型以便及时治疗。

重症新型布尼亚病毒感染的临床特征及死亡危险因素探讨

目的探讨重症新型布尼亚病毒感染患者的临床特征及死亡危险因素。方法回顾性分析2020年4月至2021年9月在安徽医科大学附属巢湖医院治疗的86例重症新型布尼亚病毒感染患者的临床资料,按照患者治疗后是否存活分成存活组(77例)和死亡组(9例),分析临床特征,采用单因素与多因素分析其死亡危险因素。结果86例患者临床特征表现为发热、肌肉震颤、恶心、呕吐、腹泻、腹痛、黑便、抽搐、呼吸衰竭、昏迷等,肌酸激酶(creatine kinase,CK)明显升高;单因素分析发现,存活者年龄≥60岁、存活者心肌损伤者、肝功能损伤者、呼吸衰竭者占比明显更低(P<0.05),病毒载量明显更低(P<0.05);Logistic多元回归分析发现,年龄≥60岁(OR=4.155)、心肌损伤(OR=12.756)、呼吸衰竭(OR=5.369)、病毒载量(OR=8.718)是影响死亡的独立危险因素(P<0.05)。结论重症新型布尼亚病毒感染后以持续发热、肌肉震颤、恶心呕吐等临床特征,CK明显升高,而年龄≥60岁、心肌损伤、呼吸衰竭、病毒载量是影响死亡的独立危险因素,临床需重点观测,防止病情恶化,减少死亡风险。

专科护理小组在提升结核病患者护理安全中的作用

目的:分析并研究专科护理小组在提升肺结核患者中的护理安全性。方法:本研究成立住院患者的静脉治疗管理小组、跌倒坠床管理小组和皮肤管理小组,对于各个小组的职责进行明确,并且确定小组的运行方式,定期做好相关的汇报工作。结果:实施专科护理小组一年以后,我院的不良事件发生率得到了明显的降低,专业小组发展趋势具有可行性。结论:成立护理专业小组可以有效提高结核病患者护理安全性,也能够促进护理专业的良性发展,在对结核病患者进行护理时,做到安全有效并且具有科学性,值得推广使用。

C反应蛋白与白蛋白比值对发热伴血小板减少综合征患者的预后意义

目的:我们的研究是为了探索影响发热伴血小板减少综合征(SFTS)预后不良的危险因素,并探讨以炎症为基础的比值指标在SFTS患者中的预测意义。方法:回顾性收集2019年6月至2023年4月从安徽医科大学附属巢湖医院共纳入了152例SFTS病毒RNA阳性的确诊患者。根据患者治疗后是否存活将患者分为两组,生存组124例和死亡组28例。收集患者刚入院时第一次的采血数据,利用多因素logistic回归分析SFTS患者进展至死亡的独立危险因素。采用ROC曲线分析来评估NLR、CAR在识别SFTS患者预后不良的预测准确性。结果:多因素logistic回归分析发现年龄大、有出血表现、APTT延长和CAR是影响SFTS患者预后的危险因素,ROC曲线分析表明:CAR的AUC为0.770 (95%CI: 0.689~0.851;P < 0.001)。CAR的最佳截断值断值是0.1,灵敏性和特异性分别为82.1%和65.5%。结论:年龄大、有出血症状、APTT延长以及CAR高水平是SFTS患者死亡的重要危险因素,而较高的CAR可能会对预测SFTS患者的疾病进展与临床预后有一定的参考价值。

针对性护理质量管理模式对肺结核患者遵医行为及护理质量的影响

目的:探讨针对性护理质量管理模式对肺结核患者遵医行为及护理质量的影响。方法:选择2021年1月至2021年12月治疗的肺结核患者86例作为研究对象,采用随机数字表法将其分成对照组(n=43)和实验组(n=43)。对照组采取临床常规护理,实验组给予针对性护理质量管理模式,比较两组患者出院后1个月的遵医行为、护理效果以及护理满意程度。结果:实验组的肺结核患者出院后1个月的遵医行为优于对照组,且有统计学意义(P<0.05),实验组的护理质量以及满意度高于对照组(P<0.05)。结论:将针对性护理质量管理模式用于肺结核患者护理中护理效果好,可有效提高其遵医行为,提升了患者的护理质量以及满意度,值得推广应用。

安徽省某医院脓毒血症病原菌分布特点及耐药情况

为临床医师在抗菌药物的经验性应用中提供一定的参考依据,本研究选取脓毒血症患者作为研究对象,探讨安徽医科大学附属巢湖医院住院患者病原菌分布特点及耐药情况。方法 回顾性分析本院于2018年1月至2023年5月间收治的576例诊断为脓毒血症患者分析其临床数据,如病原菌分布特征、主要病原菌的药敏试验结果和耐药特征。结果 脓毒血症中血培养阳性率为47.22%(272/576),共分离出病原菌286株,其中革兰阴性菌200株(69.93%)、革兰阳性菌85株(29.72%)、真菌1株(0.35%);病原菌以革兰阴性菌为主,革兰阴性菌主要为大肠埃希菌占45.10%(129/286)和肺炎克雷伯菌占18.88%(54/286);革兰阳性菌主要为凝固酶阴性葡萄球菌占13.99%(20/286)、金黄色葡萄球菌占6.99%(20/286)和链球菌占5.94%(17/286)。药敏试验显示,革兰阴性菌主要对碳青霉烯类、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星等敏感,对氨苄西林、头孢唑啉等有较高的耐药性。革兰阳性菌主要对利奈唑胺、替加环素、万古霉素等敏感,对大环内酯类、青霉素等具有较高的耐药性。结论 通过对脓毒血症患者血培养分离出的病原菌进行鉴定,得出主要病原菌依次为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌,病原菌的种类较多,不同的菌株具有不同的耐药特征,总体来说对亚胺培南、哌拉西林他唑巴坦、阿米卡星、厄他培南、利奈唑胺、替加环素、万古霉素等有较高的敏感性。各地应对病原菌的耐药情况进行动态监测和分析,为本地区临床用药提供依据,以减少病人的病死率。

Fibroscan测定慢性乙型肝炎患者肝硬度值与肝组织活检病理学分期的相关性研究

目的:观察瞬时弹性超声成像(Fibroscan)测定慢性乙型肝炎患者肝硬度值与肝组织活检病理学分期的相关性。方法:选取2016年1月至2018年1月我院收治的196例慢性乙型肝炎病例作为本次研究对象,均接受肝穿刺活检,确定肝纤维化分期,并以Fibroscan检测患者肝硬度值(Liver stiffness Measurement,LSM),分析LSM与肝纤维化分期相关性。结果:Fibroscan检测LSM分期S0灵敏度为92.31%(12/13),特异度100.00%(183/183),准确性99.49%(195/196),Kappa值为0.96;S1灵敏度为100.00%(54/54),特异度97.18%(138/142),准确性97.96%(192/196),Kappa值为0.95;S2灵敏度为97.18%(69/71),特异度99.20%(124/125),准确性98.47%(193/196),Kappa值为0.97;S3灵敏度为93.33%(42/45),特异度100.00%(151/151),准确性98.47%(193/196),Kappa值为0.96;S4灵敏度为92.31%(12/13),特异度98.91%(181/183),准确性98.48%(193/196),Kappa值为0.88;轻度纤维化组ALT、AST水平、Knodell评分及LSM明显低于中重度纤维化组(P<0.05);Fibroscan检测的LSM为肝组织活检病理学分期独立危险因素(P<0.05),其与Knodell评分、肝组织活检病理学分期呈正相关性(P<0.05)。结论:Fibroscan测定慢性乙型肝炎患者LSM,可为肝纤维化分期的评估提供参考,代替部分肝组织活检,对早期诊断肝硬化具有重要价值。

2型糖尿病对乙型病毒性肝炎肝硬化患者肝功能的影响及其相关性分析

目的分析2型糖尿病(T2DM)对乙型病毒性肝炎肝硬化患者肝功能的影响及其相关性。方法筛选标准应排除1型糖尿病(T1DM),原发性高血压,慢性肾脏病及其他先天性脏器疾病。回顾性分析150例确诊乙型病毒性肝炎肝硬化患者病历资料,其中一部分患者患有T2DM,研究T2DM对乙型病毒性肝炎肝硬化患者肝功能的影响及其相关性。结果随着乙型病毒性肝炎肝硬化病情的加重(Child-Pugh分级提高),T2DM对肝功能损害呈加重趋势(P<0.05)。T2DM对肝功能损害与血清白蛋白呈负相关(r=-0.393,P<0.01),与丙氨酸氨基转移酶(r=0.275,P=0.01),天冬氨酸氨基转移酶(r=0.290,P<0.01)及Child-Pugh分级(r=0.418,P<0.01)呈正相关,均差异有统计学意义(P<0.05)。结论 T2DM可加重乙型病毒性肝炎肝硬化患者肝功能受损程度,这对未来指导科学研究,及临床早期防治糖尿病合并肝硬化患者有较大意义。

肺炎克雷伯菌肝脓肿小鼠模型的制备与评价

目的构建稳定且可靠的肺炎克雷伯菌肝脓肿(KPLA)小鼠模型,为该疾病的后续研究提供依据。方法选择肺炎克雷伯菌(KP)临床分离菌株181608为实验菌株,将不同浓度的细菌悬液通过腹腔注射,利用改良寇式法计算半数致死量(LD50),以1/2的LD50浓度注射C57BL/6J小鼠。通过小鼠一般情况、体质量变化、白细胞计数、HE染色以及肝脏菌落计数等指标综合评价该模型。结果根据改良寇式法计算出KP在C57BL/6J小鼠中的LD50约为104 CFU/ml。小鼠感染细菌24 h取肝脏脓肿部位的细菌培养结果为阳性,通过菌落形态、拉丝试验阳性和质谱结果鉴定致病菌为KP。HE染色结果提示小鼠感染后肝脏出现大面积坏死以及炎性细胞的大量浸润。随着感染时间的延长,小鼠精神状况变差,加之进食量的减少,体质量逐渐降低。检测造模小鼠的白细胞数高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。除此之外,谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和炎症因子[白细胞介素(IL)-1β、IL-5和肿瘤坏死因子(TNF)-α]在肝脓肿组明显升高,且RT-qPCR结果也显示炎性和趋化因子[IL-1β、IL-6、IL-10和单核细胞趋化蛋白(MCP)-1]的mRNA水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论通过腹腔注射成功建立KPLA小鼠感染模型,为肝脓肿的研究提供稳定和易复制的动物模型。

肺结核住院患者营养状况及其对疗效的影响

目的探讨肺结核住院患者的营养风险情况及不同营养风险状况对治疗效果的影响。方法对73例肺结核住院患者采用营养风险筛查表评估营养风险状况,记录患者的临床治疗情况,包括痰菌转阴、住院时间及住院费用信息。结果肺结核住院患者的营养风险筛查表评分平均为(3.0±1.1)分,其中≥3分者占64.4%。有营养风险患者的痰菌转阴率显著低于无营养风险患者,而住院时间和费用均显著高于风险的患者(P<0.05)。结论半数以上的肺结核住院患者有营养风险,并联系着痰菌转阴率下降、住院时间延长和住院费用增加。

乙肝肝硬化并发自发性腹膜炎30例临床分析

目的:分析乙肝肝硬化并发自发性腹膜炎的临床治疗方法和效果。方法在我院2012年10月~2013年10月接收治疗的乙肝肝硬化并发自发性腹膜炎患者中,随机选取30例,并将其平均分成对照组和观察组两组,其中对照组患者实施常规的药物治疗;观察组患者则在此基础上加用奥曲肽、双歧杆菌四联活菌片联合治疗。最后对比分析其临床治疗效果。结果观察组患者的临床治疗总有效率为86.7%,对照组则为66.7%,其差异显著,比较具有统计学意义(P<0.05)。结论采用奥曲肽、双歧杆菌四联活菌片联合治疗乙肝肝硬化并发自发性腹膜炎,其效果显著,可对患者临床各项指标进行有效改善,值得推广。

巢湖地区新布尼亚病毒感染患者的临床特点和病重相关危险因素分析

目的了解安徽省巢湖地区新布尼亚病毒感染患者的临床特点和病重相关危险因素。方法回顾性分析2012年4月~2015年11月安徽医科大学附属巢湖医院确诊的发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒(severe fever with thrombocytopenia syndrome bunyavirus,SFTSV)(简称"新布尼亚病毒")感染住院病例,采用描述流行病学方法对确诊的病例流行特征、临床特点进行分析,并用单因素Logistic回归分析与病情严重程度相关危险因素。结果安徽省巢湖地区2012-2015年共报告57例发热伴血小板减少综合征(severe fever with thrombocytopenia syndrome,SFTS),病死率为19.3%,且该地区SFTSV感染的病例呈逐年上升趋势,而农民及高龄是重症组的高危因素;4~9月为该病流行季,发病月份主要集中在5~6月份;经单因素Logistic回归分析,发现意识障碍(OR=14.236,95%CI:1.324~152.091)、血尿(OR=2.583,95%CI:1.114~5.990)和空腹葡萄糖升高(OR=34.838,95%CI:2.113~569.427)对病情严重程度具有预测作用。结论患者一旦出现意识障碍、血尿及空腹葡萄糖升高时,提示其病情危重,应引起医护人员的足够重视。

镓在抗菌方面的研究进展

抗生素发现"黄金时代"的结束以及日趋严重的抗生素耐药性问题给我们留下一个戏剧性的、缺乏新型药物来防治耐药病原体感染的难题。这使得从现有非抗生素药物中筛查抗菌活性药物成为一种新尝试。近期研究表明:美国食品药品监督管理局(FDA)批准的、本来用于治疗高血钙的药物硝酸镓具有良好的抗菌活性。不同于其他抗生素,镓的药理性质依靠化学拟态,它可以在目标酶分子中取代铁,从而干扰、扰乱细菌含铁蛋白的功能及细菌代谢,无论是在体外实验还是在体内实验中,镓对多种病原体,包括多重耐药病原体都表现出杀菌活性。因此一些含镓制剂有望被开发成有潜力的非传统抗菌药物,帮助治疗多重耐药细菌感染。

抗菌药物相关性脑病研究进展

抗菌药物相关性脑病(AAE)是一种临床极易忽视的医源性疾病,随着抗菌药物广泛应用于临床各科室,该病发病率有上升趋势。然而,特别是非感染科和神经内科医生对该病的了解甚少。本文通过回顾国内外该病的研究,从流行病学、临床表现、病理生理特点及发病机制、辅助检查、诊断与鉴别诊断以及治疗等方面进行综述,以期为临床AAE的诊治提供参考,降低该病发生的风险。

巨噬细胞Lamtor2基因敲除小鼠对肺炎克雷伯菌易感性的研究

目的通过建立Lamtor2巨噬细胞条件敲除小鼠感染肺炎克雷伯菌(Kp)模型,初步研究Lamtor2基因生物学功能及其在Kp感染过程中的相关机制。方法将引进的Lamtor2^(flox/+)小鼠自交,Lyz2-Cre小鼠与Lamtor2^(flox/+)进行杂交,获得基因型为Lamtor2^(flox/flox)Lyz2-Cre^(-/-)和Lamtor2^(flox/+)Lyz2-Cre^(+/-)的子代小鼠;将上述两种基因型子代小鼠进行杂交,得到对照组小鼠(Lamtor2^(flox/flox)Lyz2-Cre^(-/-))和Lamtor2条件性基因敲除小鼠(Lamtor2^(flox/floxLyz)2-Cre^(+/-))。提取小鼠脚趾基因组DNA,经聚合酶链式反应(PCR)扩增,通过琼脂糖凝胶电泳鉴定子代小鼠基因型并提取肺泡巨噬细胞,利用qRT-PCR和Western blot验证Lamtor2基因敲除效果。小鼠感染Kp,观察生存状况;体外采用RT-qPCR检测Kp感染肺泡巨噬细胞肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β和Cxcl1表达水平,两组间比较采用t检验;Western blot验证iNOS的表达水平。结果成功建立Lamtor2条件性基因敲除小鼠模型,子代存活且可育;与对照组小鼠比较,实验组小鼠在感染Kp后生存率降低;Lamtor2^(flox/flox)Lyz2-Cre^(+/-)小鼠来源的肺泡巨噬细胞中的TNF-α(t=17.54,P=0.0032)、IL-1β(t=15.37,P=0.0042)和Cxcl1(t=37.82,P=0.0007)表达水平降低,且iNOS表达下降。结论构建了Lamtor2条件性基因敲除小鼠,感染肺炎克雷伯菌后,小鼠的生存率下降;肺泡巨噬细胞iNOS表达降低。

Peg-IFNα-2b单药或联合阿德福韦对前C区/BCP区突变慢性乙型肝炎患者疗效比较研究

目的探讨聚乙二醇干扰素α-2b(Peg-IFNα-2b)单药或联合阿德福韦(ADV)对前C区(PC区)/基本核心启动子区(BCP区)突变慢性乙型肝炎(CHB)患者疗效的差异。方法89例乙肝e抗原(HBe Ag)阳性初治CHB患者,随机接受48周Peg-IFNα-2b+ADV联合治疗或Peg-IFNα-2b单药治疗,并随访24周。每位患者在治疗0、4、8、12、24、36、48、60、72周监测血清乙肝表面抗原(HBs Ag)、HBe Ag、乙肝病毒(HBV)DNA及谷丙转氨酶(ALT)水平。结果 89例患者中,73例(82%)为非野生型(Non-WT)患者,16例(18%)为野生型(WT)患者,基线时WT和Non-WT患者中的单药组和联合组分别在年龄、性别、ALT、HBV DNA、HBe Ag、HBs Ag、基因型构成比、PC/BCP区突变构成比等方面差异无统计学意义。治疗结束时(第48周),Non-WT患者中联合组和单药组HBe Ag血清转换率和联合应答(HBe Ag血清转换+HBV DNA<2 000 IU/ml,并且ALT小于正常值上限)率方面差异无统计学意义。随访结束时(第72周),73例Non-WT患者中,联合组(n=40)和单药组(n=33)HBe Ag血清转换率之比差异无统计学意义(P=0.519),但联合应答率差异之比有统计学意义(35%vs 12%,P=0.028)。结论 PegIFNα-2b联合ADV较Peg-IFNα-2b单药可明显提高PC/BCP区突变HBe Ag阳性CHB患者治疗随访后的联合应答率。