胰腺神经内分泌肿瘤的临床分期与外科治疗

胰腺神经内分泌肿瘤（pancreaticneuroendocfineneoplasms，pNENs）是一类起源于肽能神经元和神经内分泌细胞的异质性肿瘤。随着影像技术的发展和诊治水平的提高，pNENs的发病率逐年上升。美国2017年SEER数据库分析显示NENs的发病例在过去的30年增加了6．4倍，其中胰腺的发病率约为0．8／10万人。

术前内镜引流在疑似可切除的肝门部胆管恶性肿瘤患者外科治疗中的价值

目的探讨术前内镜引流在疑似可切除的肝门部胆管恶性肿瘤患者外科治疗中的价值。方法我院在2010．1—2014．12期间，对收治入院的肝门部胆管恶性肿瘤患者进行全面的术前影像学评估，将评估后的病人分成3组：肿瘤可切除组；肿瘤肯定不能切除组；肿瘤疑似可切除组。可切除组采用手术治疗，肯定不能切除组采用内镜治疗（内镜治疗不成功者采用PTCD），对疑似可切除组采用术前内镜引流，1—2天后再行剖腹探查手术，术中探查能够切除肿瘤者则予以切除，不能切除者则直接关腹。本文主要对疑似可切除这一组病人（共17例）的临床资料进行回顾性分析和总结。结果本组17例中，男11例，女6例，年龄46～63岁，平均年龄52岁。术前Bismuth分型：Ⅱ型2例，Ⅲ型11例，Ⅳ型4例。术前影像学评估均不能确定肿瘤能否切除，外科手术前1～2天行内镜鼻胆管引流术（ENBD，11例）或内镜下塑料支架置入术（ERBD，6例）。术中探查提示：胆囊癌侵及肝门部胆管3例，均行姑息性胆囊切除术；肝癌侵及肝门部胆管4例，行左半肝切除联合右肝管空肠R—Y内引流术1例，3例行肿瘤活检术；原发性胆管癌10例，行根治性切除2例，姑息性切除2例，余6例仅行肿瘤活检。7例病人术后1～2周将鼻胆管引流改为塑料支架引流。全组1患者出院时均无胆道外引流管，黄疸有效缓解率为100％。结论对疑似可切除的肝门部胆管恶性肿瘤患者术前I一2天先行内镜引流，既可增加该类病人外科手术切除的机会，也可有效避免对术中明确不能切除的患者实施“U”型管外引流，从而最大限度地提高该类病人的生活质量。

5-Aza-dC对胰腺癌细胞系Panc-1中TFPI-2基因甲基化水平及表达的影响

目的探讨甲基化酶抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-A2a-dc)对胰腺癌细胞系Panc-1中抑癌基因组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)甲基化水平及基因表达的影响。方法用不同浓度5-Aza-dC处理胰腺癌细胞系Panc-1。用甲基化特异性PCR(MS-PCR),反转录聚合酶链(RT-PCR)及蛋白印迹实验(Western blot)检测药物处理前后Panc-1细胞TFPI-2基因的甲基化状态,mRNA及蛋白表达的改变。结果 MSP检测Panc-1细胞TFPI-2基因药物作用后异常甲基化得到逆转,RT-PCR检测到不同浓度5-Aza-dC处理后TFPI-2基因mRNA重新表达,相对表达量分别为(0.211±0.087),(0.327±0.068),(0.609±0.017),Western blot检测TFPI-2基因蛋白重新表达,相对表达量分别为(0.429±0.121),(0.675±0.044),(1.132±0.124),以上作用呈时间、剂量依赖性(P<0.05),差异具有统计学意义。结论胰腺癌细胞系Panc-1中抑癌基因TFPI-2启动子高甲基化可能是导致该基因表达下调甚至失活的主要原因。5-Aza-dC能够较成功的逆转胰腺癌细胞Panc-1中TFPI-2基因的高甲基化状态,并能恢复TF-PI-2基因的mRNA及蛋白重新表达。

FHIT和svivin蛋白在胆管癌中的表达及临床意义

目的:探讨FHIT和survivin蛋白在胆管癌中的表达情况及其临床意义。方法:运用免疫组织化学方法,检测57例胆管癌组织和23例癌旁正常胆管组织中FHIT和survivin蛋白表达情况,并研究其表达与临床特征的关系。结果:FHIT蛋白表达在胆管癌组织中低于癌旁正常胆管组织(P=0.000);survivin蛋白在胆管癌组织中的表达高于癌旁正常胆管组织(P=0.000)。FHIT蛋白表达与胆管癌组织的分化程度和TNM分期有关;survivin蛋白表达与胆管癌组织的分化程度、TMN分期和淋巴结转移有关。此外,研究发现在胆管癌组织中FHIT和survivin蛋白的表达呈负相关(P=0.003,r=-0.381)。Kaplan-Meier生存分析表明:FHIT蛋白阳性表达患者组的总体生存时间长于阴性表达患者组(P=0.000);survivin蛋白的阳性表达的患者总体生存时间短于阴性表达患者组(P=0.000)。结论:FHIT蛋白的低表达和survivin蛋白的高表达对胆管癌的发生可能存在协同作用。

TFPI-2基因CpG岛甲基化与胰腺癌的关系

目的:检测胰腺癌组织组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)基因CpG岛甲基化的状态,并分析甲基化改变与胰腺癌的关系。方法:应用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测45例胰腺癌组织、相应癌旁组织中TFPI-2基因的甲基化状态。结果:胰腺癌组织中TFPI-2基因的甲基化阳性率为71.1%(32/45),明显高于癌旁组织的31.1%(14/45)(P<0.01)。8例正常胰腺组织中均未发生甲基化。TFPI-2基因甲基化阳性率还与胰腺癌的临床分期、组织分化程度、肿瘤直径有相关性(P<0.05)。结论:TFPI-2基因在胰腺癌组织中出现异常甲基化,可能与胰腺癌的发生发展关系密切。

c-AMP/PKA信号通路在γ-氨基丁酸抑制胆管癌细胞株QBC939生长中的作用研究

目的探讨c-AMP/PKA信号通路在γ-氨基丁酸(GABA)抑制胆管癌细胞株QBC939生长中发挥的作用。方法分别以GABA、GABA+8Br(c AMP激动剂)、GABA+H89(PKA拮抗剂)孵育胆管癌细胞株QBC939 48 h,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法及Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测细胞的增殖及凋亡,ELISA法检测c AMP、蛋白激酶A(PKA)表达情况,Western blot法检测PKA I/PKA II蛋白表达。结果 MTT及流式细胞术检测结果显示8Br协同GABA所导致的增值抑制(20.30%±0.57%vs 16.11%±0.73%,t=8.977,P<0.05)和凋亡效应(32.62%±2.45%vs 28.38%±1.53%,t=2.929,P<0.05),而H89拮抗此效应;ELISA检测结果显示GABA明显上调c AMP及PKA的含量,8Br协同GABA增加c AMP含量(26.08±0.15 vs 25.88±0.06,t=8.565,P<0.05),H89拮抗GABA所导致PKA的含量(933.13±3.13 vs 947.71±6.51 t=2.512,P<0.05);Western blot检测结果显示,GABA较对照组能明显下调PKA I(0.0878±0.003 vs.0.1521±0.003,t=29.687,P<0.05),上调PKA II蛋白的表达(0.2042±0.012 vs 0.1461±0.072,t=8.152,P<0.05)。结论 GABA可能通过c AMP/PKAII信号通路发挥抑制胆管癌细胞株QBC939生长的作用。

胰腺神经内分泌肿瘤诊治热点探讨

胰腺神经内分泌肿瘤（pancreatic neuroendocrine neoplasms,p NENs）是一类起源于肽能神经元和神经内分泌细胞的异质性肿瘤,是一种较少见的消化道肿瘤,国外报道其发病率为0.32/10万人,约占胰腺恶性肿瘤的1%~2%左右。随着诊断技术的进步及筛查的提高,近年来显示出上升趋势[1],目前国内尚缺乏p NENs的全国流行病学数据。

胰腺癌Panc-1细胞TFPI-2基因甲基化状态与其体内体外侵袭能力的关系

目的:探讨甲基化酶抑制剂5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-aza-2-deoxycytidine,5-Aza-dC)对胰腺癌Panc-1细胞体内体外侵袭能力及裸鼠皮下移植肿瘤组织TFPI-2基因甲基化状态及表达的影响。方法:用不同浓度的5-Aza-dC处理胰腺癌Panc-1细胞。Transwell法测定各组Panc-1细胞的体外侵袭能力。将用药物处理过的各组Panc-1细胞分别接种于裸鼠皮下,观察各组成瘤率及肿瘤大小。用MSP及RT-PCR检测裸鼠移植瘤组织TFPI-2基因甲基化状态及TFPI-2基因mRNA表达情况。结果:与对照组相比,药物处理组Panc-1细胞体外侵袭能力明显下降,裸鼠成瘤率明显降低,第八周时,肿瘤体积明显低于对照组(P<0.05)。与对照组相比,TFPI-2基因异常甲基化状态在药物处理组裸鼠移植瘤组织中得到逆转,药物处理组移植瘤TFPI-2基因mRNA重新表达,并呈剂量依赖性(P<0.05)。结论:甲基化酶抑制剂5-氮杂-2'-脱氧胞苷可能在一定程度上抑制人胰腺癌Panc-1细胞系的体内体外侵袭和生长能力,其机制可能与逆转TFPI-2基因高甲基化状态从而恢复其表达有关。

胰腺实性假乳头状瘤43例诊疗及预后分析

目的探讨胰腺实性假乳头状瘤的诊断,治疗方法及预后。方法回顾分析2005年1月至2015年12月我院收治的43例胰腺实性假乳头状瘤行手术治疗病例的临床资料并随访其预后。结果男性5例,女性38例;年龄16～70岁,平均32. 4岁,多数患者因腹痛就诊。手术治疗包括胰十二指肠切除术6例,胰体尾加脾切除术15例,保脾胰体尾切除术6例,中段胰切除术5例,肿瘤局部剜除术11例。术后出现并发症13例(30. 2%),其中7例胰漏,2例切口液化,1例早期上消化道出血。32例获得随访,随访15～142个月,所有病人术后无复发、转移及死亡。结论胰腺实性假乳头状瘤好发于年轻女性,手术治疗效果较好。

功能保留性胰腺手术在胰腺神经内分泌肿瘤外科治疗中的应用

目的 探讨功能保留性胰腺手术在胰腺神经内分泌肿瘤（pNENs）外科治疗中的应用价值.方法 回顾性分析安徽医科大学附属省立医院2002年1月至2015年12月收治的28例采用功能保留性胰腺手术治疗的pNENs患者的临床资料.结果 28例患者中18例行胰腺肿瘤剜除术,8例行胰体尾切除术,2例行中段胰切除术;总平均手术时间为（197±68）min,术中出血量为（106±99）ml;术后出现胰瘘7例,腹腔积液4例,切口感染1例,肺部感染2例,均经非手术治疗痊愈,无围手术期死亡病例;术后平均住院时间为（13±6）d.结合术后病理及临床症状,24例为功能性pNENs（其中23例为胰岛素瘤,1例为胃泌素瘤）,4例为无功能性pNENs.肿瘤分级：G1级19例,G2级9例;TNM分期均为I期,无血管、神经侵犯及淋巴结转移.术后随访4~144个月,除2例失访外其余均生存,无糖尿病或低血糖发生.结论 功能保留性胰腺手术治疗pNENs是安全、可行的,尤其对分化良好的功能性pNENs.

γ-氨基丁酸抑制胆管癌细胞生长的机制

目的探讨γ-氨基丁酸（GABA）通过环磷酸腺苷／蛋白激酶A（cAMP／PKA）通路抑制胆管癌细胞株QBC939生长的分子机制。方法分别以GABA、GABA＋环磷酸腺苷（cAMP）激动剂（8Br）、GABA＋蛋白激酶A（PKA）拮抗剂（H89）孵育胆管癌细胞株QBC93948h，采用噻唑蓝（UYr）法及膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素／碘化丙锭（AnnexinV—FITC／PI）流式细胞术检测细胞的增殖及凋亡，酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测cAMP、PKA表达，Westernblot法检测蛋白激酶AI（PKAI）、蛋白激酶AⅡ（PKAⅡ）及细胞外调节蛋白激酶（ERK）表达。构建人胆管癌裸鼠皮下种植瘤模型，随机分为对照组和GABA治疗组，用药5周后观察肿瘤体积，Westernblot法检测种植瘤PKAI、PKAⅡ及ERK的表达。结果MTr及流式细胞术检测结果显示8Br协同GABA所导致的增殖抑制和凋亡效应，而H89拮抗此效应；EHSA检测结果显示GABA明显上调cAMP及PKA的含量，8Br协同GABA增加cAMP含量，H89拮抗GABA所导致PKA的含量；Westernblot检测结果显示，GABA较对照组能明显下调PKAI（0．0878±0．0030比0．1521±0．0030，t=29．687，P〈0．05），上调PKAⅡ（0．2042±0．0120比0．1461±0．0720，t=8．152，P〈0．05）蛋白的表达，且下调ERK蛋白的表达（0．3683±0．0070比0．4687±0．0100，t=13．647，P〈0．05）；与对照组比较，治疗组的种植瘤体积明显缩小[（0．500±0．020）cm^3比（0．320±0．030）cm^3，t=15．354，P〈0．05]，PAKI、ERK蛋白表达下降，PKAⅡ表达上升。结论GABA抑制胆管癌细胞株Qac939生长可能由cAMP／PKA信号通路介导，通过下调PKAI及上调PKAⅡ的表达发挥调控作用，而下调ERK蛋白的表达可能发挥抗肿瘤作用。

5-Aza-dC和TSA对胰腺癌Panc-1细胞TFPI-2基因甲基化水平及表达的影响

目的探讨甲基化酶抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-dC)及组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古菌素A(TSA)对胰腺癌Panc-1细胞系中TFPI-2基因甲基化水平及基因表达的影响。方法 Panc-1细胞经5-Aza-dC和TSA单独或联合处理后,应用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP),逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),蛋白印迹法(Western Blot)检测细胞TFPI-2基因启动子区甲基化状态和mRNA及蛋白表达情况。结果 Panc-1细胞经5-Aza-dC单独处理或与TSA联合处理后,TFPI-2基因启动子区高甲基化状态产生逆转,表现为非甲基化,原本不表达TFPI-2 mRNA及蛋白的Panc-1细胞重新表达,TFPI-2mRNA相对表达量为0.821±0.050和0.887±0.042,蛋白表达量为0.613±0.092和0.712±0.059,两者作用效果相似。经TSA单独处理的Panc-1细胞TFPI-2基因启动子区仍为异常高甲基化状态,原本不表达的TFPI-2基因未见重新表达。结论 Panc-1细胞中TFPI-2基因启动子区高甲基化可能是导致该基因失活的主要原因;5-Aza-dC单独作用或与TSA联合作用均能逆转TFPI-2基因的高甲基化状态,使该基因重新表达,但TSA对受抑制的TFPI-2基因无逆转作用。

胰腺神经内分泌肿瘤47例诊治分析

目的 总结胰腺神经内分泌肿瘤（pNENs）的诊断及治疗经验.方法 回顾性分析安徽医科大学附属省立医院2002年1月至2013年12月收治的47例pNENs患者临床资料.采用电话和门诊复诊的方式进行随访,随访截止时间为2014年1月31日.采用Kaplan-Meier法对患者生存情况进行分析,并分析影响患者生存期的因素.结果 47例患者中男性13例,女性34例,年龄16～74岁,中位年龄45岁.无功能性pNENs 17例,功能性pNENs 30例.B超、CT、MRI检查的肿瘤检出率分别为71.8％ （28/39）、92.7％ （38/41）、75.0％ （6/8）.46例行根治性手术,1例行姑息性手术.病理类型包括胰腺神经内分泌瘤41例,神经内分泌癌6例.肿瘤分级G1、G2、G3级分别为22、19、6例,TNM分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期分别为32、11、4、0例.肿瘤侵犯血管15例,侵犯神经18例;检查淋巴结15例,其中转移性5例.术后出现胰瘘9例,腹腔积液4例,切口感染4例.随访2～144个月,患者1、3、5年的总体生存率分别为94.9％、88.4％、84.4％;G1、G2、G3级5年生存率分别为100％、73.3％、60.0％;TNM分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期5年生存率分别为100％、70.0％、33.3％.肿瘤分级、TNM分期、淋巴结转移、神经侵犯、血管侵犯等因素与pNENs患者预后相关.结论 CT是诊断pNENs首选的影像学检查方法,外科手术是首选的治疗手段.手术切除患者可获得长期生存,肿瘤分级及分期,淋巴结转移,血管、神经侵犯与pNENs患者预后密切相关.

胆管癌组织CIP2A和Survivin蛋白表达及其与预后相关性的探讨

目的:探讨胆管癌组织蛋白磷酸酶2A的癌性抑制因子(CIP2A)和Survivin蛋白的表达情况及其临床意义。方法:采用免疫组织化学方法,检测57例胆管癌组织和23例癌旁正常胆管组织中CIP2A和Survivin蛋白的表达情况,采用SPSS 13.0软件分析CIP2A和Sur-vivin蛋白表达与临床特征的关系以及可能对生存的影响。结果:在胆管癌组织中CIP2A和Survivin蛋白表达均高于癌旁正常胆管组织,差异有统计学意义,P<0.05。胆管癌组织中CIP2A和Survivin蛋白的表达呈正相关;CIP2A蛋白的表达与胆管癌组织的分化程度、TMN分期等均无关,P>0.05;Survivin蛋白的表达与胆管癌组织的分化程度、TNM分期和淋巴结转移有关,P<0.05。Kaplan-Meier生存分析表明,CIP2A和Survivin蛋白阳性表达组患者的总体生存时间短于阴性表达患者组,差异有统计学意义,P<0.05;Cox多因素回归分析显示,CIP2A和Survivin蛋白表达是胆管癌患者预后的独立因素,P<0.05。结论:胆管癌组织中CIP2A和Survivin的表达存在正相关,CIP2A和Survivin蛋白表达可能是胆管癌生存的独立影响因子。

胰体尾癌的诊治:附45例报告

目的:探讨胰体尾癌的临床诊断及治疗效果。方法:回顾安徽医科大学附属省立医院2001年1月—2014年12月收治的45例胰体尾癌患者的临床资料,分析其诊断、治疗及预后。结果:45例患者主要表现为不典型的上腹部疼痛(37/45);CA19-9阳性率71.1%(32/45);胰体尾占位检出率B超为92.5%(37/42),CT为97.8%(44/45)。患者均行手术探查,其中行根治性手术27例,姑息性旁路引流手术3例,其余15例仅行肿瘤活检+无水酒精注射。围手术期并发症主要为胰瘘,其发生率为6.7%(3/45),术后总体的中位生存时间11个月,行根治性切除患者的中位生存时间为15个月,非根治性手术患者的中位生存时间为5个月,差异有统计学意义(χ2=47.1,P<0.05)。结论:胰体尾癌临床症状不典型,早期诊断困难,总体预后差,只有提高早期诊断率和实施根治性手术有利于改善患者的预后。

5-氮杂-2’-脱氧胞苷和曲古菌素A对胰腺癌Panc-1细胞系TFPI-2基因甲基化水平及表达的影响

目的探讨甲基化酶抑制剂5-氮杂-2L脱氧胞苷（5-AzadC）及组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古菌素A（TSA）对胰腺癌Panc-1细胞系中TFPI-2基因甲基化水平及基因表达的影响。方法单独或联合应用5-Aza—dC及TSA处理Panc-1细胞，应用甲基化特异性聚合酶链反应、逆转录聚合酶链反应及蛋白印迹实验检测药物处理前后Panc-1细胞TFPI-2基因启动子区甲基化状态、mRNA及蛋白表达情况。结果经5-Aza-dC单独处理或5-Aza—dC及TSA联合处理Panc-1细胞后，TFPI-2基因启动子区高甲基化状态得到逆转，表现为非甲基化，原本不表达的TFPI-2基因mRNA及蛋白重新表达，两组作用效果相似。经TSA单独处理的Panc-1细胞TFPI-2基因启动子区仍为异常高甲基化状态，原本不表达的TFPI2基因未见重新表达。结论胰腺癌Panc1细胞系中TFPI-2基凶启动子区高甲基化可能是导致该基因失活的主要原因，5Aza—dC单独作用或与TSA联合作用均能逆转TFPI-2基因的高甲基化状态，使该基因重新表达。