立体定向方法建立大鼠红藻氨酸颞叶癫癎模型及其脑电活动的实验研究

目的探讨采用立体定向技术建立大鼠颞叶癫癎模型的方法,并对发作后的脑电活动进行研究。方法用立体定向方法在20只SD大鼠的右侧海马注射红藻氨酸,用视频监测大鼠的行为学变化;在双侧海马、额叶皮质、杏仁核置入深部电极,对大鼠脑电活动进行长期记录。结果根据Racine行为学分级法,Ⅴ级6只,Ⅳ级10只,Ⅲ级3只,Ⅱ级1只;深部电极描记出起源于海马并向额叶皮质、杏仁核等传导癫疒间样波;病理变化提示长期癫疒间发作会导致海马锥体细胞逐渐缺失、坏死。结论用立体定向技术建立大鼠红藻氨酸颞叶癫疒间模型是一种可靠、经济和实用的方法。起源于海马并向额叶皮质、杏仁核等传导的癫疒间样波是颞叶癫疒间模型的神经电生理基础。

人脑组织匀浆液诱导大鼠骨髓间质干细胞分化为神经细胞

目的 研究人脑组织匀浆液诱导大鼠骨髓间质干细胞向神经元细胞分化能力。方法 从大鼠骨髓分离培养骨髓间质干细胞,经体外增殖,用人脑组织匀浆液诱导骨髓间质干细胞向神经元样细胞分化,应用免疫细胞化学方法对分化的细胞进行鉴定。结果 大鼠骨髓间质干细胞可在体外增殖,经人脑组织匀浆液诱导,骨髓间质干细胞可向神经元样细胞分化,且分化率较高,2 4小时为4 5 % ,4 8小时为78.2 % ,72小时为88.3%。分化后的细胞表达神经元标志物-神经微丝(NF)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)。结论 人脑组织匀浆液可诱导大鼠骨髓间质干细胞向神经元细胞分化,从而为骨髓间质干细胞脑内移植与及其分化,以及神经功能的修复提供了基础。

神经干细胞原代培养及GABA能神经元的诱导分化

目的 探讨神经干细胞（NSC）的原代培养及γ-氨基丁酸（GABA）能神经元的诱导分化、鉴定。方法 取出生1—3dSD大鼠全脑，分离、培养NSC并诱导分化了GABA能神经元，用免疫荧光染色进行鉴定。结果培养24h后，由单细胞发展成2～4细胞神经球，随时间延长球体增大，神经球均有Nestin阳性细胞；用含10％血清分化液分化1d后，神经球开始贴壁，伸出细长突起，部分可和周边神经球伸出的突起连接。神经球周边见大量散在贴壁的双极或多极细胞，免疫荧光染色可见NSE、GABA阳性细胞。加了分化液的实验组GABA阳性细胞分化率为（30．25±2．12）％，而对照组分化率为（1．14±．39）％。结论 成功从新生大鼠脑组织中分离、培养了NSC，并能较大比率分化GABA能神经元。

立体定向技术发展史

自1947年以来,适用于人类的立体定向技术的发展共经历了5个阶段:有框架立体定向技术之初期(1947-1972年)、有框架立体定向技术之计算机时代(1973年至20世纪末)、无框架立体定向技术之神经外科导航时代(1987年至今)、无框架立体定向技术之功能神经外科导航时代(20世纪末期至今),以及立体定向技术与机器人时代(2000年至今)。近70年间,随着人类科学技术水平的不断提高与进步,立体定向技术已覆盖神经外科乃至所有临床医学领域。

融合功能磁共振的神经导航结合皮层电极扫描在功能区难治性癫痫手术中的应用

目的探讨融合功能磁共振的神经导航结合皮层电极扫描在功能区难治性癫痫手术中的疗效。方法对11例难治性癫痫患者,于手术前分别进行运动、感觉、语言及视觉的磁共振脑功能成像扫描,将信息输入导航数据库,神经导航指引手术入路,术中配合皮层电极扫描切除病灶,尽可能减少功能区的损伤。结果1例于术后第1d出现癫痫发作。术后2周、1月和3月随访,10例患者未见发作,1例于术后1月、3月时各发作1次。术后病理:脑皮层发育不良5例;海绵状血管瘤2例;灰质异位症2例;钙化灶1例;少突胶质星形细胞瘤1例。随访4～7个月,11例均无明显功能障碍。结论功能磁共振神经导航联合皮层电极扫描辅助治疗功能区难治性癫痫手术定位准确,损伤小,疗效明显。

局灶性皮质发育不良继发难治性癫痫的外科治疗进展

局灶性皮质发育不良(Focal Cortical Dysplasias,FCDs)是一种先天性皮质发育不良,也是儿童和成人难治性癫痫的一种常见病因。随着结构及功能神经影像学技术的发展,该类癫痫发作逐渐被证实为难治性癫痫患者需行手术治疗的重要原因之一。各种具有特征性表现的FCDs的病理分型可以帮助我们对其作为癫痫病因的理解。而对FCDs及相关的癫痫起源灶的全切除可以为绝大多数癫痫患者带来理想的治疗效果。

蛋白酶体抑制剂诱导多巴胺能神经元变性及诱导型一氧化氮合酶变化

目的探讨蛋白酶体(proteasome)功能下降在帕金森病(PD)发病机制中的作用,以及模型大鼠脑内黑质部位诱导型一氧化氮合酶(iNOS)是否参与蛋白酶体抑制剂Lactacystin诱导的多巴胺能神经元变性。方法将30只健康雄性SD大鼠分为5组(生理盐水对照组,1d组、3d组、1周组、3周组),每组6只。将蛋白酶体抑制剂Lactacystin立体定向注射至大鼠黑质部位,记录大鼠在不同时间点的行为学改变,并用免疫组化方法观察生理盐水对照组及不同时间点组(1d、3d,1周、3周)大鼠黑质区多巴胺能神经元变性及iNOS变化。结果Lactacystin注射1周后大鼠开始出现自发性活动减少,阿朴吗啡可诱导出旋转行为;3周后,30min旋转次数为258.90±11.56;实验3周组黑质部位TH阳性细胞减少。1d后iNOS阳性细胞明显增多,3d时达高峰,1周后开始下降,3周时基本消失。结论蛋白酶体功能下降可能是多巴胺能神经元变性的始动因素,而iNOS上调可能是多巴胺能神经元变性的重要过程。

神经电生理监测技术和显微外科技术在听神经瘤手术中应用

目的研究神经电生理监测技术和显微外科技术联合应用在听神经瘤切除中的作用，探讨对面听神经功能的保护作用。方法听神经瘤113例。经枕下．乙状窦后入路显微外科切除肿瘤．术中进行脑神经肌电图、脑干听觉诱发电位监测，并在术末行面神经电刺激判断面神经的保留情况．经随访评价术后面神经功能情况。结果在电生理监测下经枕下．乙状窦后入路显微切除113例听神经瘤，肿瘤全切除102例（90．3％），次全切除6例（5．3％），大部切除5例（4．4％）。术后1周至出院前，根据House．Brackman面神经功能分级对面神经功能进行评估：Ⅰ、Ⅱ级86例（76．1％），Ⅲ、Ⅳ级12例（10．6％），Ⅴ、Ⅵ级15例（13．3％）。面神经解音Ⅱ保留98例（86．7％），听神经解剖保留40例（35．4％）。同时，当术末电刺激小于或等于4mA时预示术后面听神经功能恢复尚可。结论神经电生理监测辅助应用于听神经瘤显微外科手术中可提高肿瘤全切除率以及面神经解剖保留率和功能保留率。同时，术末电刺激可为术后神经功能恢复进行预后评估。

胶质母细胞瘤肿瘤干细胞的分离培养与生物学特性研究

目的从人脑胶质母细胞瘤中分离培养脑肿瘤干细胞(brain tumor stem cells,BTSC),并研究其生物学特性。方法利用无血清培养基和悬浮培养方法,从6例人胶质母细胞瘤标本中分离培养BTSC,并通过单克隆形成实验观察脑肿瘤干细胞球(brain tumor sphere,BTS)的形成过程。将BTSC接种于含血清培养基,观察其在体外的分化特点。将BTSC子代分化细胞更换培养条件,观察其在无血清培养基中的逆向分化现象。应用细胞免疫荧光染色对BTSC及其分化细胞进行鉴定。结果在人胶质母细胞瘤中成功分离出BTSC,其在无血清培养基中呈悬浮球状生长,具有很强的自我更新和增殖能力;免疫荧光显示其表达CD133。BTSC在含血清培养基中发生贴壁分化,分化后的子代细胞可表达CD133、神经元特异性烯醇化酶(NSE)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)。BTSC子代分化细胞在无血清条件下培养,能够再次增殖形成BTS,呈逆向分化现象。结论人胶质母细胞瘤中存在BTSC,其具有自我更新、无限增殖、多向分化以及逆向分化等生物学特性。

脑肿瘤干细胞的增殖活性与病理级别的相关性研究

目的检测增殖细胞核标记物Ki-67与脑肿瘤干细胞(BTSCs)标记物CD133、Nestin在60例脑胶质瘤组织中的表达,探讨BTSCs的增殖活性与病理级别的相关性。方法采用免疫组织化学SP法检测CD133、Nestin和Ki-67在60例胶质瘤组织中的表达;采用免疫荧光双染法检测Ki-67、CD133和Nestin之间的共表达情况。计算两种方法中CD133+细胞、Nestin+细胞和Ki-67+细胞所占的百分率,并将Ki-67+细胞与CD133+细胞、Nestin+细胞和肿瘤病理分级分别进行相关性分析。结果按照WHO 2000的神经系统肿瘤分类分级标准所有标本分为Ⅱ级18例,Ⅲ级23例,Ⅳ级19例,在不同的病理级别组中,CD133+、Nestin+和Ki-67+细胞的表达有明显差异,并且免疫荧光双染相比免疫组化单染更能代表BTSCs的增殖活性研究。在免疫荧光共表达中,随着病理级别的升高,CD133+/Ki-67+细胞(F=30.668,P=0.000)或Nestin+/Ki-67+细胞(F=15.316,P=0.000)的百分比差异都有显著性,并且同时均与CD133+/Nestin+BTSCs的表达成正相关。结论Ki-67+指标与肿瘤级别成正相关,可以作为预后判断的指标,同时与BTSCs标记物CD133、Nestin的表达之间也有明显的相关性,并且,免疫荧光双染得出的BTSCs的增殖活性与病理级别的相关性研究更有统计学意义。

青少年网络游戏成瘾的功能性磁共振成像研究

目的探讨利用功能性磁共振成像来确定与网络游戏成瘾相关脑区的功能定位。方法12例网络游戏成瘾青少年患者,根据不同个体的网络游戏成瘾内容编制相应的网络游戏视频录像作为刺激内容,同时编制生活视频录像作为对比刺激。实验时通过计算机播放并将图像传递给被试者进行刺激,同步使用3.0Tesla磁共振成像系统进行平面回波序列的fMRI检查,采集后的数据使用AFNI进行处理分析,将功能性图像叠加在标准化的解剖图像上。随机抽取相同年龄段的无网络成瘾倾向的青少年志愿者12名,采用上述相同的实验方法进行fMRI检查,并与网络游戏成瘾者进行对比。结果网络游戏成瘾青少年和正常无网络成瘾倾向的青少年对生活视频录像和网络游戏视频录像刺激均出现相应的脑区激活,但是网络游戏成瘾青少年对网络游戏内容表现的更加敏感,在双侧枕叶、颞叶、顶叶、扣带回、隔区、前额叶、海马、尾状核等部位出现的激活远远超过对照组。结论网络游戏成瘾青少年对网络游戏内容刺激出现很强的脑区激活,其中枕叶、颞叶与网络游戏的画面刺激相关,顶叶(颞顶枕联合皮质)与信息的加工和整合相关,而扣带回、隔区、前额叶、海马和尾状核等可能参与了网络游戏成瘾的形成,上述脑区共同构成了网络游戏成瘾的"奖赏系统"。

骨髓间充质干细胞趋脑胶质瘤性迁移机制的实验研究

目的探讨骨髓间充质干细胞(MSC)向脑胶质瘤选择性迁移的可能机制。方法从大鼠骨髓组织中分离培养MSC。选取第3～4代MSC,与胶质瘤细胞共培养或利用胶质瘤细胞条件培养基进行诱导培养,倒置相差显微镜下观察培养后MSC的细胞形态学变化;采用细胞免疫荧光染色方法检测培养后MSC表达内皮细胞标志物KDR、Ⅷ因子的情况。结果与胶质瘤细胞共培养和利用胶质瘤细胞条件培养基诱导培养后的MSC在形态上均表现出内皮细胞特征,细胞免疫荧光染色显示KDR、Ⅷ呈阳性表达。结论胶质瘤细胞能够诱导MSC分化为血管内皮细胞样细胞,这可能与MSC的趋胶质瘤性迁移的特性密切相关。

网络成瘾综合征的研究现状及展望

网络成瘾综合征是最近十余年来出现的一种新的行为成瘾,对其机理还处于心理学研究阶段,尚未进行有关神经生物学方面的研究。本文结合目前国内外对网络成瘾综合征的研究进展,对网络成瘾综合征的研究现状、诊断标准、成瘾机理和治疗方法等进行综述。

同步EEG-fMRI的研究方法及其在难治性癫痫致痫灶术前定位中的应用

20世纪80年代起,由于术前评估手段的快速发展和临床的广泛应用,通过手术治疗难治性癫痫的例数显著增加。对难治性癫痫致痫灶的术前精确定位是手术能否成功的关键;近年来,同步脑电图-功能性磁共振(Simultaneous EEG-fMRI)作为一种无创的术前定位方法逐渐应用于临床,在进行功能性磁共振扫描的同时描记脑电数据,根据EEG出现癫痫波的时间点作为时间相关曲线对fMRI数据进行分析,通过测定发作间期痫样放电的血流动力学效应来定位致痫灶,可以将解剖定位与功能定位相结合,为临床医师提供一种新的、精确度较高的定位方法。

人脑胶质瘤中Skp2的表达与肿瘤恶性程度及预后关系的研究

目的探讨人脑胶质瘤中Skp2蛋白的表达与肿瘤恶性程度及预后的关系。方法收集胶质瘤石蜡标本52例,其中低恶性度胶质瘤25例,高恶性度胶质瘤27例,采用免疫组化法检测瘤组织内Skp2、Ki-67的表达情况。同时,对病人的生存时间进行随访。结果①Skp2在低、高恶性度肿瘤表达的阳性率分别为56%和81.5%。两组间差异显著(P<0.01)。②Skp2和Ki-67在胶质瘤中的表达呈显著正相关(r=0.818,P<0.01),在Skp2表达阳性的胶质瘤细胞中其Ki-67的标记指数明显高于相应Skp2表达阴性者(P<0.05)。③Kaplan-Meier生存分析显示,Skp2高表达组(Skp2LI>15%)累积生存率显著降低(P<0.05)。结论Skp2蛋白的过表达可能参与了胶质瘤的恶性进程。检测胶质瘤的Skp2蛋白水平可能有助于评价肿瘤的生物学行为和预后。

脑肿瘤干细胞与肿瘤微血管的相关性研究

脑胶质瘤是人体血管活性最强的肿瘤,其生长浸润依赖于肿瘤内新生血管的形成。最近研究表明:脑肿瘤干细胞与微血管的关系甚为密切,两者相互支持和促进,在脑肿瘤的形成和发展过程中起着重要作用。本文就脑肿瘤干细胞、脑肿瘤微血管及两者之间相关性的研究进展进行综述,并对脑肿瘤治疗的新靶标——脑肿瘤干细胞壁龛作一展望。

骨髓基质细胞向脑胶质瘤迁移的趋化机制研究进展

骨髓基质细胞作为载体治疗颅脑疾病是近年来神经科学研究热点之一,但是其向病灶的趋化机制还不清楚。趋化因子和其受体以及黏附分子参与粒细胞向炎症灶的趋化过程,基质水解酶参与肿瘤细胞外渗出血管的浸润转移过程。近来的研究显示骨髓基质细胞表达众多趋化因子受体和黏附分子,及分泌基质金属蛋白酶,与其生物学功能相关。

尼古丁依赖者的磁共振研究进展

本文综述了近年来应用磁共振了解尼古丁依赖的神经生物学联系和结果最新进展。研究结果表明吸烟者在局部的大脑结构和神经化学基础区别于非吸烟者,同时在与吸烟相关的刺激以及执行认知任务时大脑激活也是不相同的,从而为寻找有效的治疗措施提供理论基础。

HAUSP调控网络在肿瘤的研究进展

HAUSP(又称为USP7)是泛素特异性修饰酶家族(ubiquitin specific processing enzymes,USP)成员之一,能催化水解泛素分子C-末端的肽链连接,发挥去泛素化作用,参与调节多种癌蛋白、抑癌蛋白的细胞内水平以及亚细胞定位,影响转录因子活性,在肿瘤的发生、发展中有着重要作用。本文旨对HAUSP调控网络在肿瘤中的研究进展进行综述。

原发性舌咽神经痛的显微神经外科治疗

目的探讨舌咽神经痛的发病机制、不同临床术式选择及疗效、并发症之间的关系。方法对22例舌咽神经痛的病人,采用枕下乙状窦后入路,进行手术探查,选择性对14例病人进行微血管减压,8例进行舌咽神经根、迷走神经根上部1～2根丝切断术。结果 3例微血管减压术术后的病人出现短暂性声音嘶哑、饮水呛咳,6个月内好转消失;1例一直有咽喉部不适;8例神经根切断的病人术后均有声音嘶哑、饮水呛咳症状,4例6个月后症状减轻。术毕疼痛均消失,平均随访5年以上无复发。结论根据责任血管能否移开,神经根能否充分游离减压情况,选择性进行微血管减压以及舌咽神经根、迷走神经根丝切断术是治疗舌咽神经痛安全、有效的治疗方法。