天麻糖复合物抗衰老作用的实验研究

天麻糖复合物是从兰科植物天麻的根茎中提取的水溶性物质,经柱色谱将其分为两个组分,分别命名为:Con.1,Con.2;考察灌胃后两个组分对小鼠血清中超氧化物岐化酶活性和过氧化脂质含量的影响,同时探讨两个组分对小鼠和果蝇的抗衰老作用及其机制。结果Con.1 0.1g/kg.d能明显提高小鼠血清中T-SOD活性,降低血清中过氧化脂质降解产物(MDA)含量;Con.1可延长果蝇的平均寿命和最高寿命,因此Con.1具有明显的抗衰老作用。但Con.2影响结果不明显。

蜜环菌糖复合物的糖链降解及其对α-葡萄糖苷酶的抑制作用

目的:对蜜环菌菌索中提取出的水溶性糖复合物糖链进行部分酸降解,从中筛选出对α-葡 萄糖苷酶具有抑制活性的片断。方法:通过柱层析等方法对蜜环菌糖复合物进行纯化;按正交表 设计酸水解条件,将糖链降解成适宜的片断,从中筛选出最佳水解条件;再进行α-葡萄糖苷酶抑 制活性的研究。结果:降解后的糖复合物片断具有α-葡萄糖苷酶抑制活性。结论:结构改造对糖 复合物的生物活性有一定的影响。

蜜环菌糖复合物AMP-2内黄酮类成分分离条件的研究

选用4种大孔树脂对蜜环菌AMP-2进行静态和动态吸附试验,比较其吸附率与解吸率,确定分离AMP-2内黄酮的最佳大孔树脂;通过正交试验L9(34)确定最佳的洗脱条件。研究结果表明最佳大孔树脂为AB-8;最佳参数条件为柱径高比1:10、洗脱浓度60%的乙醇、洗脱体积位200mL;同时发现经过最佳分离方案后所得AMP-2b内的黄酮含量比AMP-2提高近1倍。

桑黄菌质多糖体外抑瘤及抗环磷酰胺致突变的作用

采用MTT法研究桑黄固态发酵菌质多糖(PISPS)对肝癌细胞(HepG-2)、乳腺癌细胞(MCF-7)生长的抑制作用,测定出多糖对细胞生长的最高抑制率为59.18%、55.39%,半数抑制浓度为196.9、162.5μg/mL,且随药物浓度的增加抑制率有增大的趋势,与正常组比较作用较为显著(P<0.05);选用小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验和小鼠精子畸形试验,对多糖的抗环磷酰胺(CP)致突变作用进行评价,结果表明桑黄菌质多糖使环磷酰胺诱发的细胞微核率和精子畸形率明显降低(P<0.01).

蜜环菌菌索多糖抗衰老作用研究

目的:研究蜜环菌菌索多糖(ARP)抗衰老活性。方法:选用黑腹果蝇和D-半乳糖致衰老模型小鼠,观察ARP对果蝇寿命的影响,跳台法与迷宫法测定衰老小鼠学习记忆能力,称小鼠体重,测定脾脏、胸腺指数,取血清、肝、脑组织测定SOD、MDA、GSH-Px、NO。结果:ARP可显著延长果蝇寿命,明显改善衰老模型小鼠的学习记忆能力,增加其体重,拮抗胸腺、脾脏的萎缩,显著提高SOD、GSH-Px活性并降低MDA、NO含量。结论:ARP可通过调节机体免疫功能、清除自由基等方面发挥其延缓衰老的作用。

桑黄胞外多糖药理活性的初步研究

目的与方法:MTT法测定桑黄胞外多糖(PIEP)对肿瘤细胞增殖反应的影响,研究其体外抗肿瘤活性;采用小鼠骨髓嗜多染红细胞微核实验和小鼠精子畸形实验,研究PIEP抗环磷酰胺(CP)致突变作用;通过测定创伤小鼠血清﹑肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,探讨其抗脂质过氧化作用。结果:PIEP能明显抑制肿瘤细胞的增殖,对肝癌细胞HepG-2、乳腺癌细胞MCF-7的半数抑制浓度(IC50)分别为194.42、261.56μg/ml;300、600mg/kgbw剂量的PIEP的微核抑制率可达44.78%和49.63%,各剂量组对CP诱发的精子畸形率也有显著抑制作用(p<0.01);PIEP还能明显增强创伤小鼠SOD活性,降低MDA含量。结论:PIEP有明显的抗肿瘤活性和抗脂质过氧化作用,对由环磷酰胺引起的体细胞和生殖细胞的基因突变有着明显的拮抗作用。

桑黄胞内多糖的抗突变和抗氧化作用

背景与目的:探讨桑黄胞内多糖抗环磷酰胺致突变作用。材料与方法:选用小鼠50只,随机分为阴性对照组(0.86%生理盐水)、阳性对照组(环磷酰胺,CP)和桑黄胞内多糖不同剂量实验组(150、300、600mg/kg),采用小鼠骨髓嗜多染红细胞微核实验和小鼠精子畸形实验,研究桑黄液态发酵胞内多糖的抗环磷酰胺致突变作用,并检测小鼠血清和肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。结果:150、300、600mg/kg剂量的桑黄胞内多糖的微核抑制率分别为24.25%、53.36%和63.43%;各剂量组精子畸形率分别为(60.33±4.16)‰、(50.00±4.08)‰、(46.75±2.98)‰,CP组为(94.80±6.49)‰,各剂量组与CP组间的差异具有统计学意义(P<0.01);桑黄胞内多糖能明显增强小鼠SOD活性,降低MDA含量;小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率与SOD活性呈明显负相关(r血清=-0.998,r肝=-0.979,P均<0.05),与MDA含量呈明显正相关(r血清=0.997,r肝=0.989,P均<0.05)。结论:桑黄胞内多糖对由环磷酰胺引起的体细胞和生殖细胞的基因突变有着明显的拮抗作用。其机制可能与通过提高机体抗氧化防御系统的功能,防止有害自由基对细胞内生物大分子的损伤,抑制脂质过氧化的产物有关。

天麻多糖与蜜环菌多糖抗眩晕症作用研究

目的研究天麻多糖(GEP)与蜜环菌多糖(AMP)抗眩晕症效果。方法由机械旋转使小鼠产生眩晕后,通过迷宫实验与跳台实验测定各组眩晕小鼠逃避电击所用时间,并观察眩晕小鼠的进食量。结果GEP与AMP活性相似,均能显著缩短眩晕小鼠逃避电击所用的时间(P<0.01),增加眩晕后小鼠的进食量。结论GEP与AMP对机械旋转所致眩晕症均具有一定疗效。

蜜环菌壳聚糖对果蝇寿命和D-半乳糖致衰老小鼠的影响

提取蜜环菌壳聚糖(AMC)并分析其理化性质;观察AMC对果蝇寿命和D-半乳糖致衰老小鼠的影响,分析小鼠学习记忆行为、血清中SOD的活性、MDA的含量及胸腺系数和脾脏系数的变化情况。结果得到的AMC,含量为95%,脱乙酰度92%,粘均分子量为85000,其具有显著的抗衰老作用。

丹皮多糖2b对体外非酶糖化反应及终产物生成的抑制作用

建立体外非酶糖化系统,即加入200mmolL-1Glc,40gL-1牛血清白蛋白,另加0.01%NaN3抗菌,再加入PSM2b使其终浓度分别为1,0.5,0.1,0.01mgmL 1。37℃保温,温孵2周后测定对非酶糖化反应抑制率(IR1),8周后测定对AGEs产物生成的抑制率(IR2)。研究丹皮多糖2b(PSM2b)对体外非酶糖化反应和终产物AGEs的生成均有较高抑制作用。其IR1和IR2最高分别为23.51%和56.51%。PSM2b对非酶糖化引起的糖尿病微血管病变有改善作用。

天麻多糖的降血压作用

目的从天麻中提取出天麻多糖(PGB),研究PGB对高血压模型大鼠的降血压作用。方法水提醇沉法提取出天麻粗多糖,DEAE-52纤维素柱分离纯化得PGB。用两肾一夹(2K1C)方法制作高血压模型(RHR)大鼠,以卡托普利(10mg/kg·d)为阳性对照组,以服用自来水为阴性对照组,以天麻多糖低、中、高3个浓度(50、100、200mg/kg·d)给药30d后测定大鼠心率与血压的变化,尿量的变化,以及血清中一氧化氮(NO)、血浆内皮素(ET)和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平的变化。结果天麻多糖PGB能明显降低RHR大鼠的收缩压和舒张压(P<0·05),尤其是中、高剂量组(P<0·01),并且在剂量范围内呈剂量依赖性;对大鼠心率及尿量没有明显作用;血清NO含量(51·9±9·8vs对照组40·7±10·2)μmol/L,血浆ET含量下降(164±25vs对照组209±10)μmol/L,AngⅡ含量下降(247±20vs对照组310±37)μmol/L,P值均<0·01。结论天麻多糖对RHR大鼠具有良好的降压作用,其作用机制与促进内源性舒血管物质的生成及抑制内源性缩血管物质的释放,最终恢复二者拮抗效应的平衡有关。

羧甲基壳聚糖抗衰老作用的研究

目的观察羧甲基壳聚糖（CMC）对黑腹果蝇寿命的影响及其对D-半乳糖致亚急性衰老小鼠的抗衰老作用. 方法用含CMC（1%、2%、4%）的培养基喂养果蝇,观察其寿命;同时用不同剂量的CMC（100、200、400 mg/kg）对D-半乳糖模型小鼠灌胃,测定小鼠的学习记忆成绩、血清中超氧化物歧化酶（SOD）的活性和丙二醛（MDA）的含量并分析胸腺系数和脾脏系数的变化情况. 结果 100、200 mg/kg CMC均能显著延长果蝇的平均寿命和最高寿命（P＜ 0.05～0.01）;CMC还能显著改善衰老小鼠的学习记忆能力（P＜ 0.05～0.01）,提高小鼠血清中SOD活性,减少 MDA含量,增大胸腺系数和脾脏系数（P＜ 0.01）. 结论 CMC可能通过消除氧自由基、增强机体免疫功能而具有抗衰老的作用.

培养方式对蜜环菌胞内多糖合成与抗眩晕症活性影响的研究

对蜜环菌在不同液态培养方式下胞内多糖的合成、组成以及抗眩晕症活性进行比较。结果显示,蜜环菌在摇床培养条件下形成菌丝球,菌丝多糖(AMP)和生物量在第8d达到最高产量,分别为124.32mg/L和10.85g/L,蜜环菌在静置培养条件下形成菌索,菌索多糖(ARP)与生物量在20d时达到最高,分别为588.40mg/L和37.17g/L,静置培养对蜜环菌胞内多糖的合成有利;两种多糖在多糖含量、蛋白质含量、糖醛酸含量以及皂苷含量等组成成分上基本一致;AKTA-purifier快速层析纯化系统(FPLC)检测显示,AMP与ARP有四个相同的多糖组分,ARP另多出一个组分;抗机械旋转所致小鼠眩晕症试验表明AMP与ARP活性相似,均能显著缩短眩晕小鼠逃避电击所用的时间(P<0.01),增加小鼠眩晕后的进食量,因而对机械旋转所致眩晕症具有一定疗效。

桑黄胞内多糖抗衰老作用的研究

研究了桑黄胞内多糖(PHPS)对果蝇寿命的影响和对D-半乳糖致小鼠衰老模型的抗衰老作用。结果表明,PHPS能延长果蝇平均寿命和最长寿命,提高衰老小鼠血清﹑脑﹑肝组织中超氧化歧化酶(SOD)活性,降低小鼠血清﹑脑﹑肝组织中丙二醛(MDA)的含量,增加胸腺的重量和改善小鼠学习记忆行为。说明PHPS具有一定的抗衰老、抗氧化作用。

丹皮多糖的相对分子质量对抑制体外非酶糖化反应的影响

目的探讨丹皮多糖的相对分子质量与其生物活性的关系。方法运用正交设计方法,以酸浓度、水解温度、水解时间为因素,分别设置4个水平,对PSM2b-A进行降解和结构改造,经快速色谱纯化系统分离,选择相对分子质量适宜的片段,以抑制体外非酶糖化反应(NEG)为模型,进行活性检测。结果当H2SO4浓度为0.5mol.L-1时,50℃保温6h和80℃保温2h降解得到的2个片段F1和F2都有明显抑制体外NEG反应的作用,抑制率分别达到35.26%和27.56%。且F1的抑制率高于PSM2b和阳性对照氨基胍。结论相对分子质量与PSM2b-A抑制体外NEG活性关系明显,降低PSM2b-A的相对分子质量可以提高其抑制NEG反应的活性。

丹皮多糖2b主要成分的相对分子质量的测定

目的测定丹皮多糖2b(PSM2b)主要成分的相对分子质量,为建立对照品的标准提供依据。方法PSM2b经Sepharose 4B柱分离,冷冻干燥后得到丹皮多糖的两个成分PSM2b-A和PSM2b-B,采用HPLC法检测均一性和相对分子质量;并分别以0.7%N a2SO4溶液和超纯水作为流动相进行比较。结果PSM2b-A为均一性的糖蛋白,是PSM2b的主要成分。流动相为0.7%N a2SO4溶液时,其相对分子质量为3.596 2×105,分散度指数(D)为4.15。流动相为超纯水时,其相对分子质量为4.758 5×105,分散度指数为1.03。结论采用HPLC法测定丹皮多糖主要成分的相对分子质量时,不同流动相测定的结果有差异,流动相采用超纯水比0.7%N a2SO4溶液更为适合。

亮菌多糖抗小鼠辐射损伤作用的研究

目的观察亮菌多糖（ATS）对辐射损伤的保护作用。方法将小鼠随机分为空白对照组（0．9％生理盐水）、辐射模型组、阳性对照组（参芪片）和ATS多糖不同剂量实验组（80、160和320mg／kg）。以γ射线照射小鼠全身，引起辐射损伤后观察各组小鼠30d存活率、白细胞（WBC）数、精子畸变率、骨髓微核（MN）细胞数、骨髓DNA含量和免疫器官重量及血清和肝组织中的超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）含量等。结果ATS能提高受照小鼠存活率（P〈0．05）及SOD活性（P〈0．05）、升高WBC数（P〈0．05）和骨髓DNA含量（P〈0．05），抑制小鼠精子畸变率（P〈0．05）和骨髓MN细胞数的增加（P〈0．05），并使受照小鼠胸腺、脾脏重量回升（P〈0．05），还能增加内源性脾结节数（P〈0．05），降低MDA含量。结论ATS对γ射线所致小鼠辐射损伤有较好的保护作用。