基于纯种分离技术对古井贡酒桃花曲微生物进行分离鉴定的研究

根据大曲微生物的特性和生长特点,模拟大曲的微生态环境以不同的培养基和培养条件对微生物进行分离、纯化,用细菌16S r RNA、真菌ITS-5.8S r RNA目的基因扩增、序列同源性分析鉴定、构建大曲中霉菌和酵母菌基于ITS-5.8S r RNA的系统发育树,确定并应用纯种分离技术分离大曲微生物各种菌株。结果表明,古井贡酒大曲微生物表现出高度的多样性,窖泥中微生物很大一部分来源于大曲。

工科类院校生物工程专业综合实验教学改革与实践初探

以学校办学定位为指导,培养具备较强创新能力和动手能力的应用型人才为理念,对生物工程专业综合实验进行了教学改革与实践。通过对专业实验室的建设和管理,建立高素质的实验指导教师,精心设计实验内容,有效提升专业综合实验效果。

生物工程专业《生物学概论》教学改革与探索

在分析《生物学概论》课程特点的基础上,结合安徽工程大学生物工程专业培养方案,从教学内容、教学方法、教学手段等几个方面提出了改进方法,以期构建更适合本专业的教学体系,增强该课程的教学活力。

酿酒酵母代谢木糖工程菌的构建

通过PCR方法从休哈塔假丝酵母基因组DNA中克隆得到木糖还原酶(XR)基因XYL1和木糖醇脱氢酶(XDH)基因XYL2,将其分别连接到酵母表达载体pYES2上,得到重组表达载体pYES2-XYL1和pYES2-XYL2,从pYES2-XYL1上克隆得到含半乳糖启动子的XYL1,将其连接到pYES2-XYL2序列的下游,得到重组表达载体pYES2-XYL1-XYL2,通过电转化方法将pYES2-XYL1-XYL2转入酿酒酵母宿主菌INVSc1。在初始pH为5.5,温度为33℃,前5h转速为150r/min,后变为50r/min的条件下,乙醇产量为33.45g/L。

匍枝根霉淀粉发酵产纤维素酶的条件研究

以匍枝根霉TP-02(Rhizopus stolonifer TP-02)为出发菌株,首次利用淀粉水解液为主要碳源,快速合成纤维素酶。从碳源、氮源、培养温度、初始p H、装液量和接种量等方面研究该菌株的产酶条件。获得最佳培养基和培养条件为:10%淀粉水解液,麸皮浸出汁5%,NH_4Cl 0.5%,KH_2PO_40.5%,MgSO_4·7H_2O 0.4%,CaCl_20.4%,酵母粉0.6%;发酵温度30℃,装液量80 m L/(250 m L),初始p H 5.0,接种量8%。通过摇瓶实验优化培养基和培养条件后,获得滤纸酶活为9.66 IU/m L。研究中进一步利用该培养基在5 L发酵罐中发酵至60 h时酶活达到最大值,其中滤纸酶活、外切酶活、内切酶活和β-葡萄糖苷酶分别为16.51、15.39、11.48和6.17 IU/m L。与以往纤维素类物质为碳源发酵产纤维素酶相比,淀粉水解液发酵获得的纤维素酶酶系组成有了较大的变化,特别是关键的外切酶活有了大幅度提高,而发酵时间缩短了将近1倍。

杏鲍菇产漆酶培养条件优化及其对菲的降解特性研究

在单因素实验的基础上,采用Box-Behnken实验设计方法,以漆酶酶活为响应值,对杏鲍菇发酵产漆酶培养条件进行优化,并经实验验证模型的可行性。最终得到优化后的产酶条件为:转速131r/min,装液量32mL,温度27.6℃;在此条件下杏鲍菇对菲具有较高的降解率,培养12d后,菲降解率达82.86%。

匍枝根霉纤维素酶发酵条件优化及分批发酵动力学模型的构建

以滤纸酶活为检测指标,通过单因素实验和均实验设计优化匍枝根霉产纤维素酶培养条件,并以此为基础进行分批发酵,并利用Logistic方程和Luedeking-Piret方程构建动力学模型。优化结果表明:滤纸酶活在发酵时间为84 h时达到13.16 IU/mL,比优化前提高了149%,其中,内切酶活、外切酶活和β-葡萄糖苷酶活高值分别为45.81 IU/mL、0.537 IU/mL和12.45 IU/mL且所建模型拟合良好。

瓜蒌皮总皂苷提取工艺优化及抑制金黄色葡萄球菌活性的研究

为确定瓜蒌皮总皂苷提取的最佳工艺,在对甲醇浓度、固液比、提取时间、提取温度、超声波功率进行单因素试验的基础上,设计4因素3水平的L9(34)正交试验优化超声辅助甲醇提取瓜蒌皮总皂苷的提取条件.结果表明:优化的瓜蒌皮总皂苷的提取条件为甲醇浓度50%、料液比1∶15、超声时间50min、超声功率150W,提取工艺因子的顺序为甲醇浓度>超声时间>料液比=超声功率,瓜蒌皮总皂苷提取率由0.739%提高到0.986%.在此基础上进行皂苷提取物对金黄色葡萄球菌的抑菌试验,结果表明,瓜蒌皮总皂苷对金黄色葡萄球菌有抑菌效果,抑菌圈为15.3mm.

浓香型白酒窖泥中细菌多样性的免培养技术分析

采用免培养(culture independent)技术直接从浓香型白酒窖泥中提取细菌微生物混合基因组DNA(也叫元基因组DNA),利用细菌16S rDNA通用引物扩增窖泥细菌的序列,根据16S rDNA序列对细菌多样性进行初步分析。采用PCR扩增技术、分子克隆技术以及序列同源性分析等方法测定细菌的16S rDNA,通过与基因数据库中相似菌群序列同源性的比较,得到样品菌种多样性,分别构建系统发育树。结果显示,细菌含有几大类群,表现出高度的细菌多样性。共分为Uncultured bacterium、Clostridium、Lactobacillus、Eubacterium和Syntroph-omonas五个细菌分类。

免培养技术对浓香型白酒大曲中细菌多样性的影响

采用免培养(culture independent)技术直接从浓香型白酒大曲中提取细菌微生物基因组DNA,利用细菌16S rDNA通用引物扩增大曲混合微生物的16S rDNA,采用PCR扩增技术、分子克隆技术以及序列同源性分析等方法测定大曲中细菌的16S rDNA基因全序列,通过与基因数据库中相似菌群序列同源性的比较,构建系统发育树。结果显示,成熟的大曲中细菌共分为Lactobacillus,Pantoea,Enterobacter,Klebsiella,Leuconostoc,Erwinias,Pseudomonas,Bacillus licheniformis几大类群,表现出高度的细菌多样性。

浓香型白酒窖泥中可培养细菌的分离鉴定及产酸研究

为系统了解浓香型白酒窖泥中可培养细菌的多样性,采用平板稀释涂布法分离筛选窖泥中可培养菌株。扩增纯培养细菌的16SrRNA基因,测序并与EzBioCloud数据库比对,所有序列已在GenBank中注册。结果共从窖泥中筛选出42株差异性较大的菌株,其中5株与模式茵株相似性低于97%,共包括14个属,以Bacillus、Lysinibacillus、Sporosarcina、Staphylococcus四个属为主;高效液相色谱检测各个茵发酵液结果表明,有机酸包括乙酸、乳酸、酒石酸、苹果酸、柠檬酸、琥珀酸、α-酮戊二酸、草酸;其中尤以乙酸、乳酸的产量较高。

超声波提取黄芪中总黄酮工艺研究

研究比较了超声波法、微波法、乙醇提取法等工艺提取黄芪总黄酮的效果,得出超声波法提取黄芪总黄酮的工艺最佳.以提取温度、提取时间、料液比、乙醇体积分数为考察因素,黄芪总黄酮提取率为考察指标,采用正交试验法优化黄芪总黄酮提取工艺.结果表明,最佳工艺条件为:超声波提取温度为65℃、提取时间30min、料液比为1∶15(g/mL)、乙醇体积分数为65%,总黄酮的提取率为0.418%,是微波提取法的1.31倍,乙醇提取的1.69倍.

中药大黄对细脚拟青霉液态发酵菌体生长及产胞内腺苷的影响

目的:研究中药大黄水提液对细脚拟青霉摇瓶液态培养过程中生物量、胞内腺苷的影响。方法:将大黄水提液加入摇瓶基础培养基中接种培养,采用烘干法和HPLC法分别测定生物量和胞内腺苷含量。结果:在摇瓶基础培养基中分别加入30 g/L和35 g/L的大黄水提液能有效提高细脚拟青霉生物量和胞内腺苷产量,最高生物量达到18.7 g/L,最大胞内腺苷含量达到1.8135 mg/g。在最佳添加量下,与对照组相比,细脚拟青霉生物量、胞内腺苷含量分别提高了3.5 g/L和0.3835 mg/g。结论:大黄水提液对细脚拟青霉菌体生长和胞内腺苷的积累具有明显促进作用。

胶体几丁质诱导红曲霉产几丁质酶的研究

本文采用胶体几丁质为底物,研究了红曲霉液态发酵产几丁质酶.研究结果表明:胶体几丁质的添加能有效诱导红曲霉合成几丁质酶.在培养基中添加0.8%(W/V)胶体几丁质的同时,添加0.4%(W/V)葡萄糖,有利于红曲霉的生长以及几丁质酶的合成,发酵48h几丁质酶活力达到最高的0.3504U/mL.

基于神经网络与遗传算法优化γ-氨基丁酸的发酵条件

本文运用BP(back-propagatfon)神经网络优化红曲霉ZL307产γ-氨基丁酸的固态发酵工艺条件,建立了发酵条件与γ-氨基丁酸产量的关系模型,采用遗传算法对此模型进行全局寻优.神经网络结构为4-11-1的模型能较为精确地拟合输入的样本数据,测试样本的输出值与试验结果的相关系数为0.989.遗传算法优化出的最佳工艺参数为温度31.7℃、初始pH 4.6、初始含水量69.8%,接种量13.2%.在优化条件下,γ-氨基丁酸产量为0.518mg/g,含量比优化前提高了19.6%.

Plackett-Burman设计在漆酶发酵培养基主要影响因子筛选中的应用

通过单因素试验和Plackett-Burman设计法,对灵芝菌漆酶发酵培养基主要因子进行了筛选和优化.通过单因素试验得到漆酶发酵培养基组成为:玉米粉20 g/L,葡萄糖10 g/L,麸皮20 g/L,豆粉10 g/L,KH2PO43 g/L和ABTS 0.025 g/L;采用Plackett-Burman试验设计法,从以上6因素中筛选出了对漆酶产量有显著性影响的主效应因素为:玉米粉、麸皮和ABTS,并得到了以漆酶产量为响应值的线性回归方程,为进一步的响应曲面法优化奠定了基础.

超声波辅助提取银杏叶多糖工艺研究

以秋后银杏自然落叶为原料,以银杏叶多糖提取率为考察指标,采用超声波辅助提取法,在单因素试验的基础上,通过正交试验设计对银杏叶多糖的提取工艺进行了优化.确定最佳工艺条件:蒸馏水为提取剂,温度控制在80℃,液料比25 mL/g,超声时间45 min,超声功率250 W.在此工艺条件下,银杏叶多糖的提取率为5.8%.

一支产纤维素酶菌株的鉴定及产酶特性初步研究

本文对从皖南地区采集的森林腐木样本中,筛选获得TZT-01菌株进行鉴定.通过培养,观察菌落和个体染色形态,对其进行16SrDNA序列同源性分析,鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis sp.).对添加诱导物产纤维素酶的特性进行初步研究.

32株银杏内生真菌清除DPPH自由基活性的比较研究

采用液体摇瓶培养的方法,以DPPH自由基清除率为指标,对32株银杏内生真菌发酵液的甲醇提取物抗氧化活性进行初筛,不同菌株清除DPPH自由基活性差异较大,其中4株菌株DPPH自由基清除率显著高于其他菌株,分别为96.68%、96.09%、85.32%和84.48%.在此基础上,对8株DPPH自由基清除率较高菌株菌丝体的甲醇、乙酸乙酯、异丙醇、水4种溶剂提取物的DPPH自由基清除率进行比较,结果表明,甲醇和水提取效果较好,优于乙酸乙酯和异丙醇,其中GCZX015菌株菌丝体甲醇提取物DPPH自由基清除活性最强为93.97%,GCZX018菌株菌丝体异丙醇提取物DPPH自由基清除活性最低,仅为0.11%.

漆酶对直接耐晒蓝B2RL脱色性能的研究

利用灵芝粗漆酶对直接耐晒蓝B2RL染液脱色,采用单因素逐一优化法确定其最适反应条件。结果表明:在pH值7.0、温度50℃、漆酶用量2U/mL、染料质量浓度150mg/L条件下,漆酶对直接耐晒蓝B2RL脱色反应4h后脱色率达到71.72%,反应24h后脱色率达到86.4%,脱色效果明显.研究为漆酶处理偶氮类染料废水提供了理论依据.