GPI-B7-1分子膜表面修饰瘤苗抗肿瘤作用的研究

目的:研制抗肿瘤免疫治疗的新疫苗。方法:用含目的基因的质粒pcDNA3.1(+)/GPI-B7-1转染QK10341细胞,提取膜蛋白GPI-B7-1,经Western blotting鉴定后,用蛋白转化法锚定在肿瘤细胞SKOV3膜上,取正常健康人外周血中非贴壁的淋巴细胞,进行淋巴细胞扩增和CTL功能检测,并检测细胞培养液中IL-2、TNF-α和IFN-γ水平,FCM检测CTL的Fas表达水平。结果:与野生型SKOV3细胞比较,用GPI-B7-1修饰的SKOV3细胞能够更有效地刺激淋巴细胞增殖、诱导特异CTL杀伤活性(P<0.01),还可诱导CTL表达的Fas水平升高等活性增强以及分泌的IL-2、IFN-γ和TNF-α等细胞因子水平均显著上升(P<0.05)。结论:B7-1基因在肿瘤细胞中表达可增强其免疫原性,在体外有效诱导T细胞活化,显著增强T细胞杀伤肿瘤细胞的活性;对防治肿瘤侵袭具有一定作用。

肾癌细胞冻融抗原负载树突状细胞瘤苗的活化

目的:探索体外诱导DCs活化的方法和制备肾癌树突状细胞(DCs)瘤苗。方法:制备肾癌细胞冻融抗原;取健康人新鲜血分离外周血单个核细胞(PBMC),应用GM-CSF+IL-4刺激,诱导PBMC为iDCs,然后进行分组,采用不同因子刺激iDCs转化为mDCs,其中A组:冻融抗原负载;B组:TNF-α+冻融抗原负载;C组:IL-1β+冻融抗原负载;D组:TNF-α+IL-1β+冻融抗原负载。结果:各组均可诱导iDCs的成熟,并高表达CD86、CD80和HLA-DR;相对于其它组,D组DCs更显著上调CD83和CD54表达(P<0.05)和IL-12分泌(P<0.01),且D组mDCs更有效地刺激淋巴细胞增殖(P<0.05)。结论:TNF-α+IL-1β与肾癌细胞冻融抗原协同可有效促进DCs成熟、增强诱导淋巴细胞活化的能力。

通过肿瘤致敏的DCs活化的CD8^+ T细胞可有效地杀死肿瘤细胞(英文)

目的:探索肿瘤裂解物负载的DCs诱导活化的初始T细胞介导细胞免疫及活化的T细胞杀死肿瘤细胞的能力。方法:应用黏附法分离外周血中的淋巴细胞和单核细胞,应用GM-CSF +IL-4刺激单核细胞并诱导为iDCs,然后进行分组,应用相应的细胞因子等刺激iDCs转化为mDCs,其中肿瘤裂解物冲击DCs组:冻融抗原负载+TNF-α+IL-1β;无肿瘤裂解物冲击组: TNF-α+IL-1β。再分别用上述DCs与淋巴细胞进行混合培养以刺激混合淋巴细胞中的T细胞转化为细胞毒性T细胞,并进行分组,肿瘤裂解物冲击DCs组:肿瘤裂解物冲击DCs +IL-2 +IL-7;无肿瘤裂解物冲击DCs组:无肿瘤裂解物冲击DCs +IL-2 +IL-7;对照组: IL-2 +IL-7。结果:成功获得iDCs,并高表达CD86、CD80和HLA-DR;相对于其它组,肿瘤裂解物冲击DCs组mDCs更显著上调CD83,且更有效地刺激淋巴细胞增殖;肿瘤裂解物冲击DCs组的CTLs也高表达CD95(Fas)且TNF -α和IFN-γ的表达水平显著提高(P<0.05)。结论:肿瘤裂解物冲击DCs可有效促进T细胞活化、增殖;并显著增强相应CTLs的杀死靶细胞的能力,这为发展DCs +CTLs的免疫治疗肿瘤提供了一种新而且简便的生物治疗模式。

STC1在胃癌组织与外周血液中表达的意义

目的:研究外周血液与胃癌组织中斯钙素1(STC1)的表达情况。方法:分别在I-IV型的胃癌74例患者中,应用RT-PCR法检测外周血和肿瘤组织中STC1mRNA表达情况,应用免疫组化法检测肿瘤组织中STC1蛋白表达情况。结果:74例胃癌患者,48例外周血液中STC1mRNA阳性;肿瘤组织STC1mRNA与STC1蛋白全部表达。外周血中STC1mRNA与肿瘤淋巴结转移数、肿瘤大小和病理TNM分期有(r分别为0.637、0.519、0.541,P<0.05、P<0.01、P<0.05)显著正相关。结论:STC1在胃癌的发生发展过程中具有抑制免疫系统功能等重要作用;外周血中STC1mRNA检测可试用作为肿瘤微转移的1个新指标。