六安市健康成人4项凝血指标正常值范围的建立

目的：通过测定六安市健康成年人群的凝血酶原时间（ PT）、活化部分凝血酶时间（ APTT）、纤维蛋白原（ FIB）、凝血酶时间（ TT）,建立六安市实验室血浆凝血指标的正常值范围。方法：使用法国STA-compact全自动血凝仪,采用凝固法对300名健康成年人进行PT、APTT、FIB和TT测定。结果：初步建立六安市健康成人4项凝血指标正常值范围,PT 11.06-14.24 s；APTT 27.57-42.23 s；FIB 1.91-3.99 g/L；TT 14.05-18.47 s。结论：指标正常值范围对疾病的预防、诊断、疗效及预后均有重要的指导意义,各实验室应制定适合的指标正常值范围。

六安市2008年革兰阴性菌耐药性监测

目的:了解六安市2008年临床分离的革兰阴性菌耐药情况。方法:采用国际标准平皿琼脂对倍稀释法,对2008年9月从六安市3家医院临床分离的非重复的102株革兰阴性菌进行体外药敏试验,测定细菌的最低抑菌浓度,并按照美国临床实验室标准化研究所2008年的标准,计算细菌对抗菌药物的敏感率、中介率和耐药率。结果:102株革兰阴性菌中,大肠埃希菌27株,鲍曼不动杆菌25株,铜绿假单胞菌23株,肺炎克雷伯菌18株,嗜麦芽窄食单胞菌7株,其他2株;对碳青霉烯类抗菌药物最敏感,对哌拉西林/三唑巴坦(73.5%)也较敏感,其次较敏感的药物为阿米卡星(67.6%)、磷霉素(62.7%);耐药性高的药物依次是氨苄西林(96.1%)、头孢西丁(83.3%)、氨曲南(81.4%),对头孢哌酮/舒巴坦(51.0%)及头孢吡肟也有明显耐药性(39.4%)。结论:临床上应遵循《抗菌药物临床应用指导原则》合理应用抗菌药物,有指征地使用抗菌药物并应加强细菌耐药性监测,以防止细菌耐药性的蔓延。

从血液中分离出一株少动鞘氨醇单胞菌

2009年7月，本组从1例间断性发热患儿的血液中分离出少动鞘氨醇单胞菌（sphingomonas paucimobilis），本菌临床分离少见，现报道如下。1病例资料患儿，男，11个月，间断性发热20余天，于2009年6月29日收入本院新生儿科住院治疗。

血中PCT和中性粒细胞CD64水平与肾病综合征患者激素治疗效果及并发症的关系

目的探讨血中PCT和中性粒细胞CD64水平与原发性肾病综合患者激素治疗效果及并发症的关系。方法选择2015年9月至2016年9月65例原发性肾病综合征患者作为研究对象,所有原发性肾病综合征患者均采用激素治疗,检测患者血中PCT和CD64水平与肾病综合征治疗效果及临床并发症的关系。结果根据PCT和中性粒细胞CD64水平中位数分为高水平组和低水平组,结果发现PCT和中性粒细胞CD64高水平和低水平组患者血清中血肌酐、蛋白、尿蛋白以及病理类型对比无差异,高水平PCT患者激素敏感为15例明显低于低水平组21例,高水平中性粒细胞患者激素敏感为14例,高水平PCT患者急性肾衰竭、感染、血栓分别为8、10、6例,明显高于低水平组患者,高水平中性粒细胞CD64水平急性肾衰竭、感染、血栓分别为7、11、6例明显高于低水平组患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论血清中PCT和中性粒细胞CD64水平与肾病综合征患者激素治疗效果及临床预后明显相关。

重组弓形虫14-3-3抗原用于弓形虫血清抗体的检测

目的 探讨重组弓形虫信号转导蛋白14- 3- 3(Toxo14- 3- 3)在弓形虫病免疫诊断中的价值。方法 根据弓形虫Beverly株猫肠上皮细胞增殖阶段的14- 3 -3编码基因,设计合成引物,自RH株速殖子基因组克隆Toxo14- 3 -3的ORF,克隆pET 28a质粒,转化大肠杆菌,获得表达产物并纯化融合蛋白,以此抗原包被反应板进行ELISA检测,并与粗制抗原及市售试剂进行比较。结果 对400份血清标本的平行检测,Toxo14 -3 -3抗原、粗制抗原和市售试剂盒的阳性率分别为2 5%、3 0%和3 .25%,三者之间差异无显著性(P>0 .05);三者之间的符合率为99 0%、98.8%和99 .0%,差异无显著性(P>0. 05 )。结论 重组Toxo14 -3- 3抗原检测弓形虫血清抗体具有潜在价值。

p53、Bcl-2蛋白在结直肠癌中的表达及其与预后的关系

目的探讨p53、Bcl-2蛋白在结直肠癌组织中的表达及其与预后的关系。方法应用免疫组化SABC法检测120例手术切除的结直肠癌肿瘤组织中p53、Bcl-2蛋白的表达,并对所有手术后病例进行随访,分析5年生存率与p53及Bcl-2阳性表达的关系。结果结直肠癌肿瘤组织中p53、Bcl-2蛋白表达阳性率分别为63.3%、46.7%。p53、Bcl-2蛋白阳性表达均与患者年龄、性别、肿瘤Dukes分期、生长部位、淋巴结是否转移无关(P>0.05),与肿瘤分化程度有关(P<0.05);Spearman相关性分析表明,在结直肠癌肿瘤组织中p53和Bcl-2的表达呈负相关;患者术后的5年生存率与Bcl-2蛋白表达呈正相关(P<0.01);与p53表达呈负相关(P<0.05)。结论 p53在结直肠癌组织中高表达,而Bcl-2蛋白低表达,且两者成负相关。p53和Bcl-2与患者术后5年生存率均有关,提示检测p53和Bcl-2的表达,对临床判断术后患者的预后有指导意义。

128株多重耐药鲍曼不动杆菌的分布及耐药性分析

目的:了解六安市人民医院2012年临床分离多重耐药鲍曼不动杆菌(AB)的分布及对常见抗菌药物的耐药状况。方法:对2012年临床科室送检标本中培养分离出的128株多重耐药AB及其药敏结果进行回顾性分析。结果:多重耐药AB主要来自重症监护治疗病房、神经外科、急诊内科和神经内科等科室,标本类型主要为痰液、分泌物和导管,其对氨苄西林/舒巴坦的耐药率最低,为57.5%,其他依次升高为妥布霉素(75.6%)、庆大霉素(78.7%)和哌拉西林/他唑巴坦(76.4%),对碳青霉烯类如亚胺培南、氟喹诺酮类和不含酶抑制剂的三代头孢如头孢他啶的耐药率几乎达到100%。结论:多重耐药AB对多种抗菌药物均表现严重的耐药现象,开展细菌耐药性监测工作和掌握细菌耐药性变迁,对于指导临床合理使用抗菌药物和有效控制医院感染具有重要意义。

金黄色葡萄球菌杀白细胞素的研究进展

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin-resistant staphylococcus aureus,MRSA）普遍存在,是导致医院和社区感染的重要病原菌。MRSA最早出现在医院内呼吸道感染中,随着时间的推移,逐渐向院外扩散,社区相关性MRSA（communityassociated MRSA,CA-MRSA）成为院外感染的重要病原菌。有研究者发现,几乎所有CA-MRSA存在杀白细胞素（pantonvalentine leucocidin,PVL）[1-4]。

甲状腺细针穿刺细胞学分析在甲状腺结节诊断中的应用

目的:探讨甲状腺细针穿刺细胞学(fine-needle aspiration biopsy,FNAB)在甲状腺结节诊断中的应用价值。方法:对比分析94例甲状腺结节患者的FNAB与组织病理学检查结果。结果:94例甲状腺结节患者FNAB检测为良性病变81例,其中非肿瘤60例,腺瘤21例(病理证实乳头状腺瘤2例,滤泡状腺瘤19例);恶性病例9例,其中乳头状腺癌3例,未分化癌2例,腺癌4例(病理证实乳头状腺癌4例,髓样癌1例,未分化癌3例,滤泡状腺癌1例);未确定性4例(病理证实甲状腺滤泡状腺癌3例,甲状腺滤泡状腺瘤1例)。结论:FNAB对甲状腺结节的良恶性鉴别具有重要意义,对桥本甲状腺炎和亚急性甲状腺炎有确诊意义,准确掌握FNAB可提高甲状腺常见病的确诊率。

抗核抗体谱在自身免疫性疾病中的临床应用

目的探讨抗核抗体谱在自身免疫病中的应用价值。方法 ANA检测采用间接免疫荧光法,ENA多肽抗体谱用免疫印迹法。结果 729例患者中,有58例自身免疫病患者,其中SLE 31例,混合性结缔组织病12例,干燥综合征13例,硬皮病和皮肌炎各1例。所有自身免疫病患者的ANA均为阳性,但SLE患者的ENA抗体谱中可显示抗nRNP、抗Sm、抗SSA、抗SSB、抗dsDNA等抗体阳性;而干燥综合征患者仅抗SSA或抗SSB抗体阳性;皮肌炎患者仅显示抗Jo-1抗体阳性;硬皮病患者仅显示抗Scl-70抗体阳性。结论 ENA抗体谱对各种自身免疫病的诊断具有重要意义。

室内质控正常值血浆的制备与应用评价

目的:探讨室内质控正常值血浆的制备及应用。方法:自制正常值质控血浆,应用法国生产的Stago compact型全自动血凝仪,进行凝血四项测定。结果:自制质控血浆作为室内正常值质控品,效果满意,且在-20℃冰箱可稳定保存4个月。结论:自制正常值质控血浆完全能代替原装进口正常水平质控物作为室内质控品。

慢性阻塞性肺疾病急性加重期血清CRP与动脉血气联合检测的临床意义

目的:探讨C反应蛋白(C reaction protein,CRP)和动脉血气检测在慢性阻塞性肺疾病急性加重期(acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease,AECOPD)的临床意义及临床应用价值。方法:45例确诊为AECOPD患者分别于治疗前、后测定动脉血气与血清CRP水平,并与35例正常对照者比较。采用免疫比浊法测定CRP,i-STAT血气分析仪进行血气分析。结果:AECOPD患者治疗前、后CRP水平均显著高于正常对照组(P<0.01);PaO2治疗后较治疗前显著上升(P<0.01);PaCO2治疗后较治疗前显著下降(P<0.01)。结论:CRP升高不仅可以提示慢性阻塞性肺疾病(COPD)的急性加重,联合动脉血气检测还是AECOPD一个良好的疗效观察和预后判断指标。患者的严重感染合并低氧血症、CO2潴留提示COPD患者病情严重并很可能预后不良。CRP与动脉血气联合检测不仅是患者病情判断的指标,也为临床疗效评估提供一定的实验室依据。

嗜麦芽窄食单胞菌对磺胺类抗菌药物耐药机制的研究进展

嗜麦芽窄食单胞菌在正常情况下寄生于人体呼吸道和肠道内,为条件致病菌,过去由于其致病率低,临床上未能引起重视,但当机体免疫力低下、不合理使用抗菌药物或免疫抑制剂以及各种侵入性治疗操作时就容易引起交叉感染,是最重要的院内感染菌之一。该菌对多种药物天然耐药,在治疗时又容易引起获得性耐药,磺胺类抗菌药物是治疗其比较有效的药物,但最近几年由于大量使用,嗜麦芽窄食单胞菌对磺胺类抗菌药物的耐药性逐年上升,给临床治疗带来麻烦,引起临床的高度重视。

不同类型病原菌所致血流感染病人体内炎症因子水平变化的研究

目的:分析早期感染指标降钙素原(PCT)和C反应蛋白(CRP)水平在血流感染(BSI)病人体内的变化情况,探讨二者在诊断BSI方面的临床应用价值。方法:选择BSI病例(BSI组)及同期住院非BSI但有其他部位感染病例(非BSI组),各43例。比较2组在早期发生感染时(未经治疗前)PCT和CRP水平情况,并绘制ROC曲线,评价PCT及CRP早期诊断BSI的临床价值。结果:血培养结果显示,BSI病人中感染革兰阳性菌15例,占34.9%;革兰阴性菌28例,占65.1%;其中,革兰阳性菌以链球菌为主,革兰阴性菌以大肠埃希菌为主;早期发生感染时(未经治疗前)BSI组PCT和CRP水平均明显高于非BSI组(P<0.01);PCT和CRP水平均明显高于革兰阳性菌病人(P<0.01);不同细菌感染时,PCT和CRP的ROC曲线下面积分别为0.976和0.886,特异度分别为96.4%和78.6%,灵敏度分别为86.7%和94.55%。结论:针对BSIPCT和CRP检测具有早期诊断价值,且可初步判断病原菌类型,指导临床经验性用药,但具体用药方案需根据血培养的明确结果进行选择从而提高临床治疗效果。

乳房肿块患者细针穿刺细胞学检查及临床意义

目的:探讨乳房肿块细针穿刺细胞学定性检查的准确性。方法:对1030例乳房肿块患者的肿块做细针穿刺,穿刺后取得组织制片,瑞氏-姬姆萨染色,显微镜观察作出细胞学诊断,并与术后组织病理学检查结果比较。结果:穿刺细胞学诊断在乳腺肿瘤患者中与组织病理学诊断符合率达到96.86%。结论:细针穿刺细胞学检查可为乳房肿块患者提供安全、快速、准确的诊断。

Chinese1基因型弓形虫棒状体蛋白ROP16的基因克隆表达及生物信息学分析

目的构建弓形虫Chinese 1基因型Tg Ct Wh3(以后均简称Wh3)株棒状体蛋白(rhoptry protein,ROPs)16的原核和真核重组表达质粒及其3D结构。方法参照ROP16序列分别设计引物,采用PCR从弓形虫Chinese 1基因型Wh3株基因组DNA中扩增出编码ROP16的基因片段,克隆至p MD18-T载体;经PCR及测序分析鉴定;阳性克隆的质粒分别亚克隆至原核表达载体p ET-28a和真核表达载体p EGFP-C2,分别转化大肠杆菌BL21和DH5α,PCR和酶切鉴定转化菌落插入的序列;将构建的原核表达菌株经IPTG诱导,SDS-PAGE和免疫印迹分析融合蛋白的表达;将构建的真核重组质粒经脂质体转染293T细胞,观察其在细胞中表达;采用生物信息学方法分析构建了蛋白的3D结构。结果各组均PCR扩增出约2.1 kb ROP16基因的特异片段,序列检测结果均正确;分别亚克隆到原核表达载体p ET-28a和真核表达载体p EGFP-C2中,成功构建了Chinese 1基因型弓形虫棒状体蛋白ROP16的原核表达质粒和真核表达质粒;原核表达质粒在大肠杆菌中表达了ROP16的融合蛋白;真核表达质粒在293T细胞中成功表达,成功构建出ROP16基因的3D结构图。结论以p ET-28a和p EGFP-C2为载体,分别成功构建并表达了ROP16的原核和真核重组质粒,并构建出其3D结构图。

弓形虫微线体分泌蛋白TgMIC10基因的克隆、表达及鉴定

目的克隆、表达及鉴定弓形虫(RH株)微线体分泌蛋白TgMIC10编码基因,为建立一种灵敏检测弓形虫感染的实验方法作准备。方法提取弓形虫速殖子总RNA,设计并合成引物,RT-PCR扩增TgMIC10编码基因,与克隆载体pGEM-T连接,经酶切和PCR鉴定及DNA测序证实后,亚克隆入表达载体pBK-CMV,IPTG诱导表达pBK-TgMIC10阳性重组子转化宿主菌E.coliBL21,Western blot鉴定。结果PCR法扩增出了一597bp左右的DNA片断,将重组质粒pGEM-TgMIC10、pBK-TgMIC10分别作EcoRI和XbaI双酶切,均能得到一个大小与PCR扩增产物一致的插入片断,表明Tg-MIC10基因的克隆和亚克隆均获成功,用IPTG诱导带有重组质粒pBK-TgMIC10的大肠杆菌,产物行SDS-PAGE,可得到一约21kDa融合蛋白,Western-blot法鉴定该蛋白能被弓形虫感染的兔血清所识别。

脓液中分离出星形诺卡菌一例

2009年11月19日,我室从1例＂系统性红斑狼疮＂患者后背穿刺脓液中分离出一株星形诺卡菌,现报到如下。