安徽省松材线虫抗性育种研究概述

1982年，中国首次发现松材线虫病危害，当时从南京市中山陵地区的枯死黑松(Pinus thunberugii)中分离到松材线虫。现在该病害已扩散到安徽、浙江等省，并且由原来的黑松转移危害马尾松(Pinus massoniana)，这种危害形势对中国有相同树种分布的南方各省，形成了极大的威胁。

安徽省松材线虫抗性候选木选择技术的开发Ⅲ——从2次测定合格苗中选择抗性候选木

为选择出马尾松松材线虫抗性候选木，安徽省松材线虫抗性育种中心从2003-2005年进行了1次接种测定和2次接种测定。2次测定共对298个家系、8035株苗木进行了接种，接种后的平均生存率分别为57．0％、92．6％，不同的接种环境差异明显反映到接种的结果上。从2次测定的合格苗中，2004年选择出84个家系、394株，2005年选择出157个家系、785株，合计241个家系、1178株苗木作为抗性候选木。此外，该中心利用从广西、广东等地引进的种子进行接种测定，独自选择出10个家系、31株抗性候选木。共选择出251个家系、1209株抗性候选木。尝试利用2次测定的家系存活率对各抗性候选木的抗性进行评价，结果表明有13个家系的候选木具有强抗性。利用同工酶分析，2004年将选择出来的3个地域的抗性候选木进行基因频率的计算，试图找出地域间的变异。结果表明，作为遗传多样性指数的杂合体率（He），虽然比湖北省的8个群体的平均值（0．262）低，但是比现在报道的松属的平均值（0．157）高，因此不能得出遗传多样性很低的结论。

马尾松松材线虫抗性育种技术的开发——一次接种测定结果及其成果的早期利用

为选拔出抗性候选木 ,对“选拔母群体”进行了第 1次接种测定。接种 160d后 ,马尾松的接种存活率为 2 0 .8% ,仅次于对照树种火炬松 (3 0 .9% ) ,而湿地松 (1.6% )、黄山松 (1.2 % )、黑松 (4 .4% )的存活率均显著低下。从马尾松的产地来看 ,和县的存活率最高 ,其次为广德 ,滁州最低 ,苗木的抗性存在着产地间的差异。抗性评价结果表明 :抗性程度最高的区组 (指数为 5 )有 8个家系 ,抗性较高的区组 (指数为 4)有 17个家系。如果从这 2 5个家系的母树上进行采种育苗 ,可以将所育成苗木作为暂定有抗性的苗木进行利用。

松材线虫病抗性马尾松苗木的选育

营建现地测定林在松材线虫抗性育种过程中是一项非常重要的部分,分析测定林的生长特性及受害情况能够指导抗性种子园的改良。阐述了采种母树、播种育苗、人工接种测定、测定苗木选拔以及营建测定林。经二次测定后的苗木抗性水平均超过火炬松,4 a生树高年生长量为56 cm,根径、胸高直径等均优于普通马尾松,目前没有出现枯死个体。

马尾松松材线虫抗性候补木的选拔及评价研究

为了选拔马尾松松材线虫抗性候补木，安徽省松材线虫抗性育种中心于2003～2005年间开展了1次及2次接种检定。2003、2004年对抗性候补木选拔母群体中培育的324个家系、约44000株苗木进行了1次检定，平均生存率分别为20.8％、18．6％；2004、2005年对1次检定合格的298个家系、8035株苗木进行了2次检定，平均生存率分剐为57，0％、92．6％。说明不同环境对检定结果有影响。应用2次检定合格的家系生存率来评价抗性强弱，区别出23个抗性强的家系，在抗性苗木生产之前，可以使用23个家系的原母树。

黄山松松材线虫病抗性候补木的选拔及评价研究

[目的]选拔黄山松松材线虫病抗性候补木并进行评价。[方法]于2003年11月在潜山县天柱山林场、青阳县九华山景区、黄山区汤口镇的4片黄山松林分中选择黄山松抗性候选母树63株;2004年春季播种育苗,2005年7月和2006年7月中旬分别进行了1次及2次接种测定。[结果]对抗性候补木选拔母群体培育的63个家系、约13 505株苗木的1次接种检定表明,平均生存率为39.02%;对1次接种测定合格的57个家系、5 250株苗木所作的2次接种测定表明,平均生存率为8.46%。应用2次接种测定合格的家系生存率来评价黄山松松材线虫病抗性强弱,区别出8个抗性强的家系。[结论]在抗性苗木生产之前,可以早期利用该8个家系的原母树;今后还需要通过无性系接种测定,选择出具有较强抗性的家系和单株,营建黄山松无性系抗性种子园。

运用MuPS标记识别马尾松抗松材线虫病个体

运用14个SCAR标记引物对松材线虫病马尾松(Pinus massoniana)抗性候选个体开展MuPS(Multiplex-PCR of SCAR markers)分析。结果表明,120个样品中出现104个不同的MuPS型,区分率86.7%、74.2%的个体完全能够被识别。引物Pmscar157、Pmscar007、Pmscar053的多态位点数出现率非常高,分别占总位点数的13.1%、13.3%、18.4%,而引物Pmscar039、Pmscar499的位点数出现率非常低,分别占总位点数的0.16%、0.48%。因引物重复性高、稳定可靠,可通过获得的MuPS型识别抗性候选个体、管理抗性候选家系。

松树抗病育种研究进展

综述了国内外在松树抗病育种的材料选拔与方法、抗性标准评估、抗性机理以及运用基因工程技术开展抗病育种的研究进展,尤其总结了松材线虫病抗病育种研究的状况。

黄山松外部形态特征变异的研究

对安徽省天柱山、九华山、黄山分布的 65株黄山松 (Pinustaiwanensis)优树的树皮颜色 ,树皮的开裂形状 ,针叶的长、粗 ,树脂道指数 (RDI:ResinDuctIndex)等外部形态进行了调查 ,讨论了产地间的差异 ;另外 ,还调查了采集的球果长、中央直径 ,球果重 ,开果率。结果表明 :黄山松树皮的颜色分 4种类型 ,树皮开裂分 3种类型 ,针叶的长、粗及内部形质 (树脂道配置 )等特性呈现地域性差异 ;黄山地区的黄山松针叶长度比以前报告的要长一些 ,且发现黄山地区的树脂道指数具有日本赤松和黑松杂交种的特征(>1.410 ) ;球果的长度、直径、重量没有产地间的变异 ,黄山地区的球果比其他地区细长 ,球果鳞刺比其他两地少。球果经 40℃、2 4h干燥处理后取出种子 ,单个球果的种子重、种子粒数、充实种子比率和千粒重有地域性差异。在播种苗床上看 ,发芽特性和变异个体的出现因母树不同而有变异 ,但没有发现地域性差异。颜色异常的苗木出现频率较低。