安徽霍山产3种石斛多糖组成的比较研究

目的:安徽霍山为兰科石斛属植物地理分布的最北端,主产3种石斛:霍山石斛、细茎石斛和铁皮石斛,其多糖提取物具有显著的药理活性,本研究旨在探究同一特殊生境下3种石斛所含多糖在组成上的相似和差异。方法:实验以越冬茎条为供试材料,采用苯酚-硫酸法分析多糖含量差异,利用HPSEC法分析分子量分布差异,通过柱前衍生化HPLC法分析单糖组成差异。结果:霍山石斛、细茎石斛和铁皮石斛多糖含量分别为其干重的(18.65±1.50)%、(11.32±1.30)%和(20.78±1.60)%;其多糖分子量呈连续分布状态,其中分子量介于50~200 kDa的高活性多糖在3种石斛多糖中的比例分别为:(16.38±1.40)%、(21.61±1.30)%和(14.19±1.50)%;3种石斛多糖水解产物中检出葡萄糖(Glc)、甘露糖(Man)、半乳糖(Gal)、木糖(Xyl)、葡萄糖醛酸(GlcUA)、半乳糖醛酸(GalUA)、阿拉伯糖(Ara)共7种单糖,且都以甘露糖和葡萄糖为主要单糖组分,但铁皮石斛中的甘露糖和葡萄糖的相对峰面积比值最大。结论:同一生境下3种石斛所含多糖在含量、分子量分布和单糖组成上既存在共性也存在明显差异,实验探究了同一特殊生境下3种石斛多糖组分间的异同,其结果对石斛的鉴别和组效关系的研究提供了重要参考。

霍山石斛多糖对小鼠的双向免疫调节作用

目的观察霍山石斛多糖对小鼠的双向免疫调节作用。方法将90只昆明种小鼠随机分成9组,分别为正常对照组、免疫亢进模型组、免疫亢进+霍山石斛多糖[低(50 mg?kg-1?d-1)、中(100 mg?kg-1?d-1)、高(200 mg?kg-1?d-1)]剂量组、免疫抑制模型组、免疫抑制+霍山石斛多糖[低(50 mg?kg-1?d-1)、中(100 mg?kg-1?d-1)、高(200 mg?kg-1?d-1)]剂量组。采用连续3 d腹腔注射环磷酰胺(80 mg·kg-1)制作免疫抑制模型小鼠,采用连续11 d肌注卡介苗0.5 mg/只制作免疫亢进模型小鼠,观察霍山石斛多糖对免疫抑制模型小鼠和免疫亢进模型小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬活性、体外脾淋巴细胞增殖能力和胸腺指数的影响。结果霍山石斛多糖能明显改善环磷酰胺所致的小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活性降低、脾淋巴细胞体外增殖能力降低和胸腺指数降低,缓解卡介苗所致的小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活性亢进、脾淋巴细胞体外增殖能力亢进和胸腺指数降低。结论霍山石斛多糖具有较好的双向免疫调节作用。

霍山石斛多糖对衰老模型大鼠肠道消化吸收功能和形态结构的影响

取30只4月龄SD大鼠随机分为对照组、衰老模型组和衰老模型+霍山石斛多糖组,每组10只。衰老模型大鼠每日注射D-半乳糖125mg·kg^(-1)·BW^(-1),对照组大鼠每日注射等量生理盐水。衰老模型+霍山石斛多糖组大鼠每日灌胃霍山石斛多糖溶液200mg·kg^(-1)·BW^(-1)。饲养8周后处死大鼠,测定回肠食糜中蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性;回肠绒毛高度和隐窝深度;粪中粗脂肪和粗蛋白含量。结果表明霍山石斛多糖可以显著提高衰老模型大鼠小肠蛋白酶活性(p<0.01)和淀粉酶活性(p<0.05);显著提高小肠绒毛高度(p<0.01),降低隐窝深度(p<0.01);显著降低衰老模型大鼠粪便中粗蛋白含量(p<0.05)。说明霍山石斛多糖可以改善衰老模型大鼠小肠形态结构,并对消化酶活性和营养素吸收产生有益影响。

霍山石斛标本的固色与塑化方法探讨

为制作霍山石斛塑化标本,用氯化亚锡溶液对其根固色,用硫酸铜和醋酸铜溶液对其茎叶、果实固色;以硫酸铜、醋酸铜和氯化亚锡溶液对其花固色,探索最优的固色和塑化工艺参数。结果显示7%氯化亚锡对石斛根固色5min,10%硫酸铜溶液、14%和20%的醋酸铜溶液对石斛茎叶、果实固色2～3d,7%氯化亚锡对石斛花固色3～6h的效果最佳。标本塑化时以分子量400的聚乙二醇为主,延长20%、60%聚乙二醇(分子量200)和60%聚乙二醇(分子量400)置换水分子的时间至12h具有更好的塑化效果。

霍山石斛最新研究进展

系统介绍了珍稀濒危药用植物霍山石斛的生物学特征、组织培养和栽培等方面的国内外研究概况;在综述霍山石斛的化学成分、药理作用以及内生菌研究现状的基础上,对其研究方向和发展思路进行了展望。霍山石斛理论和应用研究的总结将为其产业化开发与可持续利用提供重要参考。

复方霍山石斛浸膏增强免疫力作用的研究

[目的]研究复方霍山石斛浸膏对小鼠免疫力的影响。[方法]将200只健康雌性小鼠分为5个试验组,每组分高、中、低和空白对照4个剂量组[3.0、1.0、0.5、0 g/(kg.bw)],连续灌胃给药30 d后分别对不同剂量组小鼠进行细胞免疫的功能检测(ConA诱导小鼠脾淋巴细胞转化试验、DNFB诱导小鼠DTH试验)、体液免疫功能检测(抗体生成细胞检测试验、血清溶血素测定试验)、单核-巨噬细胞功能检测(小鼠炭粒廓清试验、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验)和NK细胞活性测定。[结果]各项检测结果与空白对照组相比,均能刺激小鼠脾淋巴细胞增殖、转化作用,促进小鼠迟发型变态反应作用,提高小鼠抗体生成细胞数和血清溶血素水平,增强小鼠的单核-腹腔巨噬细胞吞噬、碳廓清能力及NK细胞的活性。[结论]复方霍山石斛浸膏具有增强免疫力功能。

响应面法优化霍山石斛多糖提取工艺

[目的]优化霍山石斛多糖的提取工艺。[方法]通过单因素试验,研究了浸提时间、料液比和乙醇浓度对霍山石斛多糖提取的影响;通过3因素3水平的响应面分析法,分析了各工艺参数与响应值之间的关系,并由此预测并验证最佳的工艺条件。[结果]霍山石斛多糖提取的最佳工艺条件为:料液比为1∶340(g/ml),提取时间为3.25 h,沉淀多糖的乙醇浓度为86%;该条件下霍山石斛多糖的理论提取率为39.10%,实测值为38.78%,与预测值接近。[结论]采用响应面法优化得到的提取条件准确可靠,并且提取率较高,为制剂生产提供了参考。

霍山石斛糖蛋白的分离纯化和毒活性研究

霍山石斛是名贵中药材,其多糖的抗肿瘤活性是中药资源领域的研究热点,该研究旨在探究霍山石斛多糖抗肿瘤活性的物质基础。实验以霍山石斛为原料,通过低盐溶液浸提和硫酸铵分级沉淀得到不同的霍山石斛蛋白组分,经SDS-PAGE电泳染色确定糖蛋白组分,再经DEAE离子柱和Sephadex凝胶柱进一步分离纯化糖蛋白组分,同时采用MTT比色法检测不同产物对人肝癌细胞Hep G2的毒活性;结果获得3种相对分子质量为22.5,19.8,15.6 k Da的糖蛋白组分RG1,RG2,RG3,测得三者复合物对Hep G2的IC50为534.23 mg·L-1,而组分RG1,RG2的IC50分别为432.96,413.91 mg·L-1,组分RG3对Hep G2无毒活性。总之,实验结果提示霍山石斛多糖抗肿瘤活性的物质基础之一是相对分子质量为22.5,19.8 k Da的2种糖蛋白组分,且具有协同效用。