工厂化淡水养殖凡纳滨对虾甲壳溃疡症病因与防治研究

为探明工厂化淡水养殖凡纳滨对虾甲壳溃疡症的病因和防控方法,进行了病原分离鉴定、毒力基因检测、攻毒试验和外用内服药敏试验。从患虾肝胰腺和发病池水中经TCBS琼脂分离纯化菌株,经培养特性、形态学、生理生化和16S rRNA基因序列分析,分别鉴定得凡隆气单胞菌F-L株和点状气单胞菌F-W株。进一步从凡隆气单胞菌F-L株中检出气溶素、细胞毒性肠毒素、酯酶、鞭毛、核酶、丝氨酸蛋白酶、热不稳定性肠毒素和弹性蛋白酶8种毒力基因,点状气单胞菌F-W株则检出气溶素、热不稳定性肠毒素、酯酶、鞭毛、弹性蛋白酶和溶血素6种毒力基因。两株菌浸泡攻毒都能引起凡纳滨对虾死亡,半数致死浓度分别为10 7.68 和10 7.8 cfu/mL,可初步判定气单胞菌为本病病原。药敏试验和防治试验结果显示,恩诺沙星内服、菌毒克外用消毒以及促进创伤愈合、调控虾池水质和虾肠肝健康有利于本病防控。此研究能为防控气单胞菌引起的凡纳滨对虾甲壳溃疡提供借鉴。

编码草鱼呼肠孤病毒VP5与NS38 B细胞表位的DNA疫苗壳聚糖纳米口服制剂的研制与评价

以编码II型GCRV VP5和NS38的B细胞线性表位的cDNA串联构建pcDNA3.1(+)-Bs5-10(GenBank登录号为MH234474),并包被成纳米级壳聚糖颗粒;无GCRV草鱼(11~12 cm、25~30 g)随机分为空白对照组、空白对照-GCRV攻毒组、裸空载体注射组、壳寡糖包被空载体口服组、裸DNA疫苗注射组(每尾鱼注射10μg载体,1d和29d各免疫1次)、壳寡糖包被DNA疫苗口服组(每尾鱼大约投喂50μg载体,1~3d、15~17d和43~45 d各口服免疫1次),在28℃水温下评价疫苗保护力和特异性抗体水平。结果显示,裸DNA疫苗注射组和壳寡糖包被DNA疫苗口服组的相对保护率分别为66.67%和50%;两组血清抗VP5和抗NS38的IgM水平均随加强免疫而显著升高(P<0.05);且在对应时间点(22 d或50 d),前组特异性IgM水平均显著高于后者(P<0.05)。结果表明,壳聚糖包被的DNA疫苗口服免疫能在一定程度上抵抗GCRV攻击,且体液免疫参与了该保护机制。