2021—2023年安徽省手足口病柯萨奇病毒A组16型分子分型研究

目的了解安徽省手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)发病情况、柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus A16,CV-A16)基因型别分布情况和VP1基因进化特征。方法通过中国疾病预防控制信息系统对2021—2023年安徽省HFMD发病情况和病原学检测情况进行统计。收集HFMD患者咽拭子样本,分离得到CVA16毒株,对其VP1区进行PCR扩增和基因序列测定,使用肠道病毒在线分型工具鉴定基因亚型,运用MegAlign比较核苷酸和氨基酸同源性,利用MEGA 6.0构建进化树,并分析VP1区氨基酸变异位点。结果2021—2023年安徽省累计报告HFMD病例155640例,年均报告发病率为84.83/10万。2021—2023年安徽省16个地市共报告HFMD实验室确诊病例12643例,其中CV-A16占18.16%(2296/12643),各年度构成比分别为25.81%(1127/4366)、33.69%(782/2321)和6.50%(387/5956)。2021—2023年安徽省共分离到HFMD CV-A16毒株72株,其中B1a和B1b基因亚型分别为58株(占80.56%)、14株(占19.44%)。两种亚型毒株与CV-A16原型株G-10的核苷酸和氨基酸同源性分别为73.80%~76.20%和90.60%~92.30%。进化树显示B1a基因亚型流行株在遗传进化上分为4个分支簇,B1b基因亚型流行株形成3个分支簇。72条VP1区基因序列与原型株比较发现了26个氨基酸位点发生变异。结论2021—2023年安徽省HFMD CV-A16主要流行的基因亚型为B1a和B1b,B1a为优势基因亚型,应加强对CV-A16流行毒株的分子监测。

2016—2020年安徽省手足口病相关柯萨奇病毒A组16型分子分型研究

目的了解安徽省手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)相关柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus A16,CV-A16)基因型别分布情况。方法通过中国疾病预防控制信息系统传染病报告管理信息系统收集安徽省2016—2020年HFMD病例资料,并收集HFMD患儿咽拭子标本。对荧光定量PCR检出的CV-A16核酸阳性病例样本采用RT-PCR扩增VP1区基因片段并测序。运用肠道病毒在线分型工具确定基因型别,再利用MEGA 6.0生物软件构建CV-A16 VP1区基因进化树并分析VP1区氨基酸变异位点。结果2016—2020年安徽省累计报告HFMD实验室确诊病例16650例,其中CV-A16确诊病例3809例(占22.88%),各年中CV-A16确诊病例占比依次为20.72%(219/1057)、22.91%(677/2955)、23.89%(1004/4202)、42.58%(1687/3962)、4.96%(222/4474)。对获取的436份CV-A16阳性标本进行测序,获得290条VP1区基因序列,均属于B基因型,其中B1a基因亚型65条,B1b 225条。290条VP1区基因序列核苷酸同源性为86.80%~100.00%,与CV-A16原型株G-10核苷酸同源性为74.10%~76.80%。65条B1a毒株VP1区基因序列与B1a参考株核苷酸同源性为93.00%~99.90%,225条B1b毒株VP1区基因序列与B1b参考株核苷酸同源性为88.40%~99.60%。B1a基因亚型流行株在遗传进化上分为4个分支簇,B1b基因亚型流行株在遗传进化上分为6个分支簇。与原型株G-10 VP1区编码氨基酸位点变异分析显示,290条VP1区基因存在多个位点变异。结论2016—2020年安徽省HFMD CV-A16流行株B1a与B1b基因亚型二者共同流行,应持续关注安徽省肠道病毒病原监测与分子进化变异情况。

慢性阻塞性肺疾病患者睡眠质量和焦虑抑郁情况及其影响因素:一项多中心横断面研究

背景慢性阻塞性肺疾病(以下简称慢阻肺)易使患者睡眠质量下降,并产生焦虑抑郁症状,但常被医护人员和患者自身忽视。了解慢阻肺患者睡眠质量和焦虑抑郁情况及其影响因素,有助于提高患者的生活质量,但相关多中心研究尚少。目的调查慢阻肺患者的睡眠质量和焦虑、抑郁情况,并探究其影响因素。方法采用方便抽样,对2022年8—11月在安徽省7家医院呼吸与危重症医学科就诊的慢阻肺患者进行招募,收集患者的人口学特征、呼吸困难等级、气流受限严重程度、营养不良风险、身体活动水平、疫苗接种和近1年急性加重情况。分别采用匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)和医院焦虑抑郁量表(HADS)评估慢阻肺患者的睡眠质量和焦虑抑郁症状,并采用多因素Logistic回归分析其影响因素。结果共调查慢阻肺患者248例,其中睡眠质量差的发生率为60.9%(151/248),仅8.9%(22/248)的患者认为自己有很好的睡眠质量,一半以上的患者实际睡眠时间不足(54.4%)或睡眠效率低(60.1%);29.4%(73/248)的慢阻肺患者至少存在焦虑或抑郁其中一种症状,其中35例存在焦虑症状,61例存在抑郁症状,23例同时存在焦虑和抑郁两种症状。多因素Logistic回归分析结果显示,年龄大(OR=1.052,95%CI=1.018~1.086)、有营养不良风险(OR=3.393,95%CI=1.855~6.206)是慢阻肺患者睡眠质量差的危险因素,有规律的身体活动是慢阻肺患者睡眠质量差的保护因素(OR=0.450,95%CI=0.242~0.834)(P<0.05)。近1年急性加重次数≥2次(OR=2.220,95%CI=1.093~4.510)、有营养不良风险(OR=1.961,95%CI=1.044~3.683)是慢阻肺患者发生焦虑抑郁症状的危险因素(P<0.04)。慢阻肺患者PSQI评分与焦虑症状得分(HADS-A)(r_(s)=0.413)、抑郁症状得分(HADS-D)(r_(s)=0.430)存在正相关关系,HADS-A评分和HADS-D评分存在正相关关系(r_(s)=0.719,P<0.05)。结论慢阻肺患者中睡眠质量差和焦虑抑郁症状的发生率较高,年龄、营养不良风险、规律的身体活动和近1年急性加重次数是重要的影响因素。医护人员、家属和患者自身应提高对睡眠质量和焦虑抑郁的认识,对重点患者积极开展筛查和干预工作,以改善患者的睡眠质量和心理健康。

安徽省2020年柯萨奇病毒A组4型分离株全基因组序列分析

目的了解安徽省柯萨奇病毒A组4型(coxsackievirus A4,CV-A4)毒株全基因组序列变异及分子进化情况,为今后手足口病的病原学监测和科学防治提供理论依据。方法采用一代测序法对2020年5株CV-A4分离株进行全基因组测序。运用MEGA11.0对5株CV-A4分离株,32株CV-A4代表株和肠道病毒A71型(Enterovirus A71,EV-A71)原型株BrCr基于VP1区构建系统进化树,对分离株以及肠道病毒A组(enterovirus A,EV-A)原型代表株基于P1、P2、P3区分别构建系统进化树;选用DNAStar进行毒株VP1区氨基酸序列比对,使用BioEdit7.2进行氨基酸置换熵分析并作氨基酸位点熵值图,使用SimPlot3.5和RDP4对CV-A4分离株和EV-A原型代表株进行重组分析,使用DnaSP6软件进行分离株和参考代表株的选择压力分析。结果系统进化树显示:分离株属于C2亚型,与中国内地地区流行的CV-A4毒株属于同一分支,C2亚型分支的毒株氨基酸序列同源性为97.30%~100%,分离株同原型相比,均有6个氨基酸变异位点。选择压力分析表明C2亚型的CV-A4毒株受负选择压力的影响,置换熵分析编码区氨基酸序列有25个易突变位点,占比1.14%,毒株进化主要依赖重组。重组分析表明分离株在P2、P3区域与多种EV-A原型株发生不同区段的重组,与CV-A5原型株重组区段较长,尤其在3A-3C区段,P1是相对保守的区段。结论安徽省CV-A4在P2、P3区与其他EV-A原型株发生频繁重组事件,应对安徽省CV-A4的分子进化研究继续保持密切关注。

安徽省2016―2019年食源性疾病与气温的关系分析

目的分析安徽省食源性疾病与气温的关系,探讨滞后效应及识别易感人群。方法收集2016―2019年安徽省各市食源性疾病监测数据以及同期气象数据。采用类Poisson回归的广义线性模型分析各市日均气温和食源性疾病的关系,然后采用Meta分析合并效应值。结果研究期间,安徽省共填报348958例食源性疾病病例,年均发病率0.13%。日均气温与食源性疾病发病呈线性关系,且存在一定的滞后效应。单日滞后中,其效应在当天(lag0)最大,效应值为1.0096(95%CI:1.0047~1.0190),即日均气温每增加1℃,当日食源性疾病发生风险增加1.0096倍。到滞后第3天及以后其效应无统计学意义。累积滞后中,lag05对应的RR值最大,为1.0199(95%CI:1.0126~1.0272)。亚组分析结果显示,<65岁年龄组较≥65岁年龄组更易受到影响。结论气温升高会增加食源性疾病的发病风险,且存在滞后效应,应加强对易感人群的预防。

安徽省成年居民平均盐摄入量3种随机点尿计算方法与24 h尿钠法估算比较

目的比较3种随机点尿计算方法与24 h尿钠法估算安徽省成年居民平均盐摄入量的差异和一致性,为验证3种随机点尿方法估算人群盐摄入量方法的可靠性提供参考依据。方法收集2019年安徽省成年居民高血压和钠摄入量监测基线调查中随机尿样合格3329人、24 h尿样合格1500人以及24 h尿样和随机尿样配对1493人的相关数据,采用3种点尿转换24 h尿钠方法估计平均盐摄入量,并与24 h尿钠法估算的盐摄入量进行比较;应用配对样本t检验、组类内相关系数(ICC)分析和Bland-Altman图检验3种随机点尿计算方法与24 h尿钠法的差异和一致性。结果基于24 h尿钠法估算的安徽省成年居民平均盐摄入量为9.1(95%CI=8.9~9.4)g/d,Kawasaki、Tanaka和INTERSALT 3种随机点尿计算方法估算的安徽省成年居民平均盐摄入量分别为12.7(95%CI=12.6~12.9)、9.5(95%CI=9.4~9.6)和8.6(95%CI=8.5~8.7)g/d。配对比较结果显示,Tanaka随机点尿计算方法估算的结果最接近24 h尿钠法,平均差值为0.2(95%CI=0.0~0.4)g/d;Tanaka随机点尿计算方法估算的ICC值最高(0.34),INTERSALT随机点尿计算方法估算的ICC值次之(0.33),Kawasaki随机点尿计算方法估算的ICC值最低(0.23);3种点尿法的估计值与24 h尿钠法的估计值吻合较好,除Kawasaki外,INTERSALT和Tanaka随机点尿计算方法估算的结果在低水平盐摄入量时可能高估,在高水平摄入时可能低估。结论安徽省成年居民盐摄入量的3种点尿估计方法均与24 h尿钠法一致,Tanaka法相对更准确地估计人群盐摄入量。

2016-2020年安徽省手足口病流行病学特征及CVA6基因进化分析

为了解安徽省2016-2020年手足口病(Hand, foot and mouth disease,HFMD)流行特征与病原谱构成,及分析CVA6(Coxsackievirus A6, CVA6)VP1区基因进化情况。本研究收集2016-2020年安徽省HFMD病例流行病学资料,描述性流行病学方法分析病例三间分布情况。随机选取480份HFMD其他肠道病毒阳性咽拭子样本,RT-PCR扩增肠道病毒VP1基因片段,测定基因序列并鉴定其他肠道病毒基因型别。生物软件分析部分代表性CVA6基因序列相似性并构建系统发育树。流行病学结果显示,2016-2020年安徽省HFMD发病率仍处于较高水平,但重症病例与死亡病例数有所减少,5个年度均以其他肠道病毒流行为主,五岁以下散居儿童为主要患病人群,男女性别比为1.50∶1。2016-2019年度发病均呈现为双峰流行模式。病原分型鉴定结果为CVA6 215例(215/245,87.76%),CVA1016例(16/245,6.53%),CVA412例(12/245,4.90%),CVA51例(1/245,0.41%),CVA21例(1/245,0.41%)。选取的60株代表性CVA6 VP1区序列相似性分析表明,各序列间VP1核苷酸序列相似性为91.6%~100%,氨基酸序列相似性为97.4%~100%;与D3基因型代表株之间核苷酸序列相似性为90.7%~98.9%,氨基酸序列相似性为96.7%~100%;与CVA6原型株核苷酸序列相似性为82.3%~83.9%,氨基酸序列相似性为95.1%~96.7%。进化分析显示,CVA6划分为A-D四个基因型,60株CVA6毒株均属于D3基因亚型中的D3a分支,为中国内地地区优势流行型别。应加强对安徽省CVA6及其他肠道病毒监测,这对制定减轻HFMD疾病负担以及防控HFMD策略具有重要意义。

安徽省2013-2021监测年度流感流行特征及感染风险的相关因素分析

目的分析安徽省流感流行特征与量化不同因素对流感发生的影响,为更好地开展流感防控工作提供科学依据。方法资料来源于中国流感监测信息系统2013年4月1日至2021年3月31日安徽省网络报告数据,对2013-2021监测年度安徽省的流感样病例(ILI)和RT-PCR结果进行描述性分析和影响因素分析。结果安徽省2013年4月1日至2021年3月31日哨点医院ILI就诊百分比(ILI%)为3.80%(1209142/31779987),总体呈上升趋势,其中2017-2018监测年度较高,为4.30%(191148/4448211)。0~4岁婴幼儿的ILI构成比较高(54.14%,654676/1209142);安徽省阜阳市ILI%较高(6.25%,236863/3788863)。实验室监测结果显示,8家流感监测年度哨点医院ILI中流感阳性率为16.38%(34868/212912),总体呈逐年上升趋势,其中2017-2018监测年度较高,为26.19%(6936/26488)。5~14岁学龄儿童阳性率较高(28.81%,13869/48144),16个城市中芜湖市阳性率较高(22.01%,2693/122237)。流感活动呈现冬春季单峰与冬春季、夏季双峰的交替,且各亚型交替流行,夏季流感优势亚型为A(H3N2)亚型。多因素logistic回归模型结果显示,2017-2018监测年度、5~14岁儿童、冬季、皖南地区的阳性率更高。结论2013-2021监测年度安徽省流感流行具有明显的季节性,且在2013-2021监测年度ILI%和流感阳性率呈现上升趋势。因此,提示应在冬春流感季到来之前保障疫苗供应,同时加强疫苗接种健康教育,以避免流感高发期的感染风险。

安徽省2017-2018年手足口病柯萨奇病毒A6型基因进化特征分析

人肠道病毒A组71型(Enterovirus A71,EV-A71)和柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A16,CV-A16)是引起手足口病(Hand,foot,and mouth disease,HFMD)的主要病原体。近年来非EV-A71和非CV-A16的其他肠道病毒(Enterovirus,EV)已成为HFMD流行或暴发疫情的优势病原体。安徽省HFMD监测数据显示,2017-2018年HFMD样本非EV-A71和非CV-A16其他EV核酸阳性率超过50%,其中大部分为柯萨奇病毒A组6型(Coxsackievirus A6,CV-A6)。为了解安徽省2017-2018年HFMD其他肠道病毒构成和CV-A6基因进化特征,本研究收集2017-2018年HFMD咽拭子EV核酸阳性标本,采用人横纹肌肉瘤(RD)细胞进行病毒分离培养,对分离到的CV-A6毒株VP1全长序列基因扩增及核苷酸序列测定。从NCBI GenBank数据库下载CV-A6原型株和代表性毒株基因参考序列,运用生物软件MEGA 6.0构建VP1基因序列系统进化树,分析其基因遗传特征。结果显示,安徽省2017-2018年HFMD实验室确诊病例其他EV占66.1%,CV-A16占23.5%,EV-A71占10.4%。52株CV-A6毒株均为D3a基因亚型,其VP1区核苷酸序列间相似度为93.7%~100%,编码的氨基酸序列相似度为98.3%~100%;与CV-A6 Gdula原型株核苷酸相似度为78%~82.3%,氨基酸相似度为94.6%~96.3%。VP1区15个氨基酸位点有变异,氨基酸位点Q98L和G160S的变异发生率为100%。其他EV已成为安徽省引起HFMD流行的重要病原体,D3基因型CV-A6为优势流行毒株。持续加强其他EV的病原学监测与分析,对安徽省HFMD防控策略制定与疫情处置具有重要意义。

2018-2019年安徽省柯萨奇病毒A组16型B1基因亚型分离株分子特征分析

目的 了解安徽省2018—2019年手足口病(HFMD)柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus A16,CV-A16)分子病原学进化特征。方法 对安徽地区2018—2019年从HFMD患者咽拭子样本中分离的CV-A16毒株,采用反转录聚合酶链式反应(RTPCR)扩增其VP1基因全长核酸片段、测定其核苷酸序列。采用肠道病毒在线分型工具鉴定CV-A16毒株基因亚型,运用MEGA 6.0生物软件最大似然法(maximum likelihood method)构建VP1基因进化树、MegAlign比较核苷酸和氨基酸同源性。结果 安徽省2018—2019年共分离到HFMD CV-A16毒株88株。其中2018年分离到30株,2019年58株。其VP1区全长基因均由891个核苷酸碱基组成,编码297个氨基酸。基因分型鉴定和进化分析显示,88株CV-A16毒株中B1a和B1b基因亚型分别为25株(28.41%)、63株(71.59%)。VP1区遗传进化表明,88株CV-A16毒株均归为B1基因型,其中25株属于B1a基因亚型,63株属于B1b基因亚型。同源性分析显示,B1a基因亚型毒株与CV-A16原型株G-10核苷酸同源性为64.1%~65.3%,氨基酸同源性为90.3%~91.1%;B1b毒株与原型株核苷酸及氨基酸同源性分别为62.8%~66.0%和91.1%~91.8%。88株CVA16与原型株VP1区氨基酸序列比较发现26个氨基酸位点出现变异。结论 安徽地区2018—2019年HFMD CV-A16毒株以B1b与B1a共同流行,B1b为优势基因亚型,应重视CV-A16流行毒株的分子病原学监测。

2020-2021年安徽省急性胃肠炎疫情中GI组诺如病毒基因型多样性分析

目的了解安徽省急性胃肠炎疫情中GI组诺如病毒基因型别分布和进化特征。方法收集2020年5月至2021年4月急性胃肠炎聚集性疫情病例诺如病毒核酸阳性肛拭子标本,荧光定量PCR分型检测诺如病毒GI和GII基因组,采用RT-PCR扩增GI组诺如病毒聚合酶区(RNA-dependent RNA polymerase,RdRp)和VP1区部分基因片段并测序。运用诺如病毒在线分型工具鉴定基因型别,利用MEGA 6.0软件构建RdRp和VP1区基因系统进化树。结果45起疫情142份诺如病毒核酸阳性标本中检出23份为GI阳性,占19%(23/142);119份为GII阳性,占81%(119/142)。20份GI阳性标本PCR扩增产物测序成功。获取的20株诺如病毒RdRp-VP1区序列有6种分型,包括2株GI.1[P1]、2株GI.3[P10]、5株GI.3[P13]、2株GI.4[P4]、7株GI.5[P4]、2株GI.6[P11]。系统进化树显示:GI.1[P1]型安徽株与韩国株(MZ021974)、法国株(MK956173)同属一个进化分支;GI.3[P10]和GI.3[P13]型安徽株与中国台湾株(MN922742)、四川株(MW255366)、韩国株(MZ022026)进化距离较近;GI.4[P4]和GI.5[P4]型安徽株与2019年湖南株(MN938461)、2021年广东株(OK562729)处于一个进化分支;GI.6[P11]型安徽株独立为一个进化簇,与陕西株(MW243609)、日本株(LC646339)进化距离较近。结论安徽省急性胃肠炎GI组诺如病毒基因型分布呈多样性,有必要开展感染性腹泻疫情分子溯源监测。

2020年安徽省1株候鸟源H5N8禽流感病毒遗传进化特征分析

目的分析安徽省肥东县候鸟监测站检测的H5N8亚型禽流感病毒(AIVs)的遗传进化特征。方法从收集的死亡天鹅样本中提取病毒RNA,使用实时荧光定量RT-PCR区分流感亚型,并采用一代测序方法对阳性样本的HA和NA基因扩增后测序,应用生物信息学软件构建系统发育进化树并分析其分子特征。结果2020年12月1日收到来自安徽省肥东县1只死亡天鹅的鼻拭子、鸟喙拭子和泄殖腔拭子样本,PCR结果均显示H5阳性,测序结果提示3份样本为同一株H5N8亚型禽流感病毒。遗传进化分析显示,该病毒属于2.3.4.4支系且与埃及、俄罗斯等地分离株有很高的相似性,其HA与NA基因都在欧亚谱系中,并且已经适应了不同宿主。该病毒HA裂解位点呈现高致病性分子特征,存在6个糖基化位点,且发生S133L、S137A、T160A、D187N、K193N、Q196K、S227R氨基酸突变。PB2蛋白发生K389R、V589T突变、PA蛋白发生N409S突变、M1蛋白发生N30D、T215A突变、NS1蛋白发生P42S突变。结论本次发现的H5N8亚型禽流感病毒受体结合位点仍为禽源受体,但具有人源受体分子特征,其他氨基酸位点都提示该病毒有毒力增强的危险性,需进一步加强监测。

β-烟酰胺单核苷酸的急性及亚急性经口毒性

β-烟酰胺单核苷酸(NMN)急性经口毒性试验采用最大限量法,将大、小鼠分别设置对照组和5000 mg/kg剂量组,每组10只动物,雌雄各半,进行一次性经口灌胃染毒。28 d重复剂量亚急性经口毒性试验,将大鼠分为对照组和1000 mg/kg剂量组,每组10只大鼠,雌雄各半,连续灌胃染毒28 d,记录动物摄食和体质量变化,染毒后检测动物血常规和血清生化指标。取大鼠主要脏器,计算脏器系数并制作病理组织切片。结果显示,急性经口毒性试验未见动物明显异常。亚急性经口毒性试验1000 mg/kg剂量染毒组大鼠体质量、摄食量、食物利用率、血常规及生化指标与对照组相比差异均无统计学意义(P>0.05),肝、肾脏器质量和脾脏器系数与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。组织学检查未见病理性损伤。NMN急性经口毒性试验半数致死剂量(LD_(50))>5000 mg/kg,亚急性经口毒性试验最大无作用剂量(NOAEL)>1000 mg/kg。

砷、镉慢性雾化吸入通过NF-κB/NLRP3信号通路引起小鼠纹状体多巴胺能神经元丢失

目的组织原位表征砷、镉慢性雾化吸入暴露小鼠纹状体神经病理学特征,从氧化应激—NF-κB/NLRP3通路切入,探讨其病理机制。方法选用8周龄C57BL/6J雄性小鼠,分为对照组(n=6)、亚砷酸钠雾化吸入组(n=6)和氯化镉雾化吸入组(n=4),每天经超声雾化吸入双重去离子水、6 mg/kg亚砷酸钠溶液和10 mg/kg氯化镉溶液4 h,染毒6个月。麻醉下脱颈处死取脑,HE染色和尼氏染色观察纹状体病理学改变;免疫组织化学法检测8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)、酪氨酸羟化酶(TH)、p-NF-κB-p65和NLRP3水平;GFAP与C3、Iba-1与CD68免疫荧光共标法分别检测星形胶质细胞和小胶质细胞活化。结果与对照组相比,砷、镉雾化吸入组纹状体受损神经元明显增多(尼氏染色:t_(As)=4.920,t_(Cd)=6.185,P<0.01;HE染色:t_(As)=4.150,t_(Cd)=6.761,P<0.01),TH水平降低(t_(As)=2.145,t_(Cd)=4.603,P<0.05或P<0.01),8-OHdG、p-NF-κB-p65和NLRP3水平提高(8-OHdG:t_(As)=3.993,t_(Cd)=2.396,P<0.01或P<0.05;p-NF-κB-p65:t_(As)=7.117,t_(Cd)=9.352,P<0.01;NLRP3:t_(As)=6.967,t_(Cd)=7.306,P<0.01),炎性活化的星形胶质细胞(A1型)与小胶质细胞(M1型)比例明显升高,差异有统计学意义(A1型星形胶质细胞:t_(As)=4.586,t_(Cd)=3.003,P<0.01或P<0.05;M1型小胶质细胞:t_(As)=6.135,t_(Cd)=6.245,P<0.05)。结论慢性砷、镉吸入暴露会损害纹状体多巴胺能神经元,机制可能与诱导氧化应激,激活NF-κB/NLRP3炎性小体通路,引起胶质细胞炎性响应有关。

H7N9亚型禽流感假病毒的制备与验证

根据A/Anhui/1/2013(H7N9)病毒株HA和NA基因序列研究H7N9禽流感病毒的结构并制备相应的假病毒,并对此假病毒进行初步验证。将H7N9病毒株的HA和NA基因序列经公司优化合成后,经过接菌、提取质粒、假病毒构建等步骤来制备假病毒,并通过假病毒感染实验、透射电镜以及血清中和实验来验证假病毒制备是否成功。成功制备滴度均超过标准值104的A/Anhui/1/2013(H7N9)假病毒,在电镜下可观察到典型的流感病毒形态,并进一步使用本科室保存的29份血清样本(含4份H7N9阳性血清样本)、国家流感中心制备的四种不同亚型免疫组分(H1型、H3型、BV型和BY型)的抗血清以及商品化H7N9特异性抗体进行中和试验,结果显示4份阳性血清中和活性明显高于25份阴性血清,四种不同亚型抗血清的中和效率均低于40%,且商品化H7N9特异性抗体能够与其有效结合。本研究成功构建了H7N9假病毒并有效筛选出阳性血清,且具有良好的特异性,为流感大流行或疫苗免疫后人群血清学监测建立了科学有效的技术手段。

悬浮与贴壁MDCK细胞在流感病毒分离培养中的应用评价

目的比较悬浮细胞MDCK和贴壁细胞MDCK两种培养体系对流感病毒分离培养的差异,探讨悬浮细胞的应用前景。方法通过细胞计数记录两种细胞的活细胞密度和细胞特定生长速率,使用WHO推荐疫苗株进行病毒感染实验,连续传代5次后观察血凝效价并对HA和NA基因进行测序,观察基因突变情况。结果悬浮细胞的24 h、48 h活细胞密度较贴壁细胞更稳定;病毒连续传代培养至第三代时悬浮细胞培养的病毒HA滴度可达1∶256以上,而贴壁细胞则无滴度;悬浮细胞培养的H3N2和BV亚型流感病毒第四代和第五代HA基因各发生1个氨基酸位点突变,贴壁细胞两个代次内未发现基因突变,NA基因均未发现基因突变。结论悬浮MDCK细胞较贴壁细胞生长更为稳定,且病毒分离培养效率高,连续传代病毒突变率低,在基于细胞培养技术的流感疫苗生产工艺中具备一定的可行性。

CV-A10手足口病分子病原学特征及流行状况进展

自2008年手足口病(hand,foot,and mouth disease,HFMD)纳入国家法定传染病管理以来,引起HFMD的优势病原有所改变。2012年以后由柯萨奇病毒A组10型(coxsackie virus A10,CV-A10)引起的HFMD发病率处于较高水平。本文就CV-A10病原学特征及其所致HFMD流行情况等展开综述,为HFMD防控策略制定提供依据。