浅析FDA对我公司原料药的GMP现场检查

目的:浅析FDA对原料药的GMP现场检查。方法:针对FDA关于原料药GMP现场检查的重点进行详细论述和分析。结果与结论:企业如果建立了扎实的GMP制度,严格执行美国的CGMP,在实事求是的基础上,充分做好现场和文件准备,就可以成功通过FDA的GMP认证现场检查。

透明颤菌血红蛋白基因的克隆及其在林可链霉菌中的表达

目的通过将透明颤菌血红蛋白基因vgb克隆到林可链霉菌染色体黑色素生物合成基因m elC位点,使m elC基因被破坏失活,vgb基因实现表达同时提高林可霉素产量。方法构建大肠杆菌-链霉菌重组质粒pYHT04,通过接合转移实验将重叠延伸PCR得到的具有红霉素抗性基因启动子的透明颤菌血红蛋白基因,以双交换的方式整合进林可链霉菌黑色素生物合成基因m elC中。采用不同装瓶量摇瓶发酵,HPLC检测发酵液中林可霉素含量。结果重组菌株颜色变浅,CO结合差光谱显示在420 nm处有明显吸收峰,随着装瓶量的增加重组菌株发酵液中林可霉素效价与对照菌株相比降低幅度较小。结论重组菌株m elC基因失活不能继续合成黑色素,vgb基因得到表达并表现出生物学功能,限氧条件下重组菌株发酵液中林可霉素效价高于对照菌株,有希望应用于工业发酵生产。

24孔板培养活跃链霉菌合成那西肽条件的优化

目的优化24孔板培养活跃链霉菌XW产那西肽的发酵条件。方法采用单因素实验和响应面法对24孔板的发酵条件进行优化。结果得到活跃链霉菌XW 24孔板发酵产那西肽的最优发酵条件为:种子培养基装液量2.55 m L,发酵培养基装液量0.93m L,发酵时间121h。结论通过对发酵条件的优化,可以明显提高24孔板发酵产那西肽的效价达到882.25μg/m L,实验值与模型预测值较接近,吻合度较高,较初始效价675.63μg/m L提高了30.58%。研究结果表明24孔板发酵与摇瓶发酵之间有良好的相关性,相关系数R为0.883。

氨基酸及金属离子对林肯霉素发酵的影响

通过改变基础发酵培养基中的金属离子和氨基酸种类及浓度,研究其对林肯链霉菌的菌体浓度及发酵液生物效价的影响.单因素实验结果表明,在基础发酵培养基中添加0.02g/L氯化锰、0.02g/L钼酸钠、0.15g/L硫酸镁和0.30g/L硫酸锌,调节初始pH为7.0,按6.7%的接种量接种,于30℃,220rpm的恒温振荡培养箱中培养48h后,再依次添加0.06%谷氨酸、0.10%酪氨酸、0.15%多巴和0.06%甲硫氨酸,再于30℃,220rpm的恒温振荡培养箱中培养5d.菌体浓度可达91%(16 000μg/mL),林肯霉素发酵液生物效价为4 200U/mL.

盆炎净片提取工艺研究

目的研究盆炎净片的最佳提取工艺。方法以水提取干浸膏得率和芍药苷为测定指标,采用正交试验方法确定最佳提取工艺。结果最佳提取工艺为12倍量水煎煮2次,每次3.0 h。加水倍数、提取时间对干浸膏得率和芍药苷含量的影响没有显著性差异,提取次数对干浸膏得率和芍药苷含量的影响有显著性差异(P<0.05)。结论确定的制剂工艺和质量控制指标,可以有效保证制剂质量。

赤芍及其有效部位的研究进展

目的 介绍赤芍及其有效部位的研究进展 ,为我国开展中药现代化的研究提供参考。方法 广泛查阅资料 ,归类总结 ,结合实际工作中的研究方向 ,综述赤芍及其药用部位的有效成分鉴定、药理学研究状况及现代临床应用情况。结果与结论 赤芍及其有效部位含有多种有效成分 。

氮离子注入林可霉素产生菌诱变高产菌株

林可霉素产生菌 6 5 - 1株经 1.5× 10 1 5ions/ cm2 氮离子束诱变处理得到 75 - 8菌株。其摇瓶相对效价较出发菌株 6 5 - 1提高了 31% ,发酵培养基优化后 ,摇瓶相对效价提高了 35 %。应用于 10 0吨发酵罐生产 ,其发酵指数较出发菌株提高了 2 5 .6 %。

应用原生质体融合法选育林可霉素高产菌株

将林可霉素产生菌N6 5 2 # 、S78 1# 的原生质体分别热灭活和紫外灭活 ,并将灭活原生质体用PEG融合 ,从中获得 92 2 0 1# 融合株 ,其摇瓶效价分别较N6 5 2 # 、S78 1# 提高 17%、5 2 % ,且色素分泌少 ,传代稳定性强。

林可霉素发酵培养基的改进

目的 优化培养基 ,提高林可霉素发酵水平。方法 在培养基中加入营养液 ,采用正交设计实验 ,对林可霉素发酵培养基进行了优化改进。结果 筛选出最佳培养基配比。结论 营养液对发酵有影响作用 ,改进后的培养基 ,比原林可霉素发酵水平提高约 8 7%。

林可霉素高产菌种的选育

以林可霉素产生菌 82 7#为出发菌株 ,采用氯化锂、紫外线 (uV)、甲基磺酸乙酯 (EMS)三重复合诱变处理、筛选耐自身产物的高产菌种 ,从中获得 6 5 12 #菌株。其摇瓶效价较出发菌株提高 2 5 % ,发酵培养基优化组合后 ,其摇瓶效价提高 2 8% ,应用于 30吨发酵罐生产 ,其发酵指数较出发菌株提高 16 8%。

不同菌落形态的林可霉素产生菌发酵特性的研究

应用摇瓶发酵法对几种不同菌落形态的林可霉素产生菌糖、氮利用、菌丝量、发酵单位、传代稳定性等特性进行研究。结果表明 :菌落直径的大小、孢子数量的多少与这些特性有一定的对应关系 ,其中直径中等、稍干瘪的菌株产量高、后劲足、适宜集约化生产。

变温培养工艺在林可霉素发酵上的应用

研究在林可霉素发酵的不同阶段采用不同的培养温度对生产菌菌丝形态和发酵单位的影响 ,改进了林可霉素发酵的传统恒温培养工艺。培养起初 6 0h维持在 31℃ ,随后降到30℃培养 70h ,再回升至 31℃培养至放罐 ,结果显示 :生产菌中、后期菌体浓度下降幅度减小 ,菌丝上的空泡缩小 ,美兰染色加深 ,自溶期推迟 ;平均单批放罐总亿提高了 4 4 % 。

HPLC法测定盐酸林可霉素含量—中国药典(2005版)和美国药典(27版)方法的比较

目的 用高效液相色谱法（HPLC）测定盐酸林可霉素含量，并将中国药典（2005版）与美国药典（27版）两种方法进行比较。方法 用两国药典方法测定盐酸林可霉素含量。中国药典（2005版）色谱条件：C18柱，以0．05mol·L^-1硼砂溶液（85％磷酸溶液调节pH值至6．0）-甲醇（4：6）为流动相，检测波长214nm，待测溶液浓度2．0g·L^-1；美国药典（27版）色谱条件：C18柱，以磷酸溶液-甲醇-乙腈（780：150：150）为流动相，检测波长210nm，待测溶液浓度1．2g·L^-1。结果中国药典（2005版）方法盐酸林可霉素在浓度范围内，浓度与峰面积线性关系良好，相关系数r=0．9999；美国药典（27版）方法盐酸林可霉素在浓度范围内，浓度与峰面积线性关系良好，相关系数r=0．9997。平均回收率在99．0％-101．0％，RSD均小于0．5％.结论 二者盐酸林可霉素浓度与峰面积均具有良好的线性关系，含量相差不大，无明显差别。

克林霉素磷酸酯的合成

以克林霉素醇合物为原料 ,经羟基保护 ,磷酰化 ,水解 ,结晶得克林霉素磷酸酯 ,总收率 85%

电化学方法处理高浓度生物制药废水研究

对利用电化学方法处理高浓度生物制药废水进行了实验研究,该方法大幅度地改善了污水的可生化性。

HPLC法测定橘红化痰胶囊中吗啡的含量

目的建立橘红化痰胶囊中吗啡的含量测定方法。方法采用HPLC法,ODS-C18色谱柱(4.6mm×200mm,5μm);以乙腈acetonitrile-0.01mol/L磷酸氢二钾溶液-0.005mol/L庚烷磺酸钠水溶液(18:42:40)为流动相movingphase;检测波长为220nm;进样量10μL。结果吗啡在0.04816-0.43344μg/mL范围内与其峰面积呈良好的线性关系(r=0.9998),加样回收率为98.63%(RSD为0.84%,n=6)。结论本方法具有操作简便、分离度、精密度、重复性好,回收率高、重现性好等特点,可以作为橘红化痰胶囊中吗啡的含量测定方法。

盐酸克林霉素合成工艺改进

采用新工艺合成克林霉素,流程短,收率高,重量收率比传统工艺提高了21.55个百分点,可达88.0%,产品质量符合中国药典2000版标准。

耐溶媒纳滤膜在盐酸林可霉素母液回收中的应用

采用Hydrochem公司的SeLROTM耐溶媒纳滤膜及M104防爆型中试设备浓缩盐酸林可霉素丙酮母液至30万U/ml,将浓缩液重结晶,获得盐酸林可霉素成品。根据检验结果,盐酸林可霉素符合CP2000标准,另外可提高收率2%～4%,效益十分可观,应用前景广阔。