siRNA对白血病细胞株HEL中EDAG-1基因的干涉作用

目的探讨抑制胚胎发育相关基因-1(EDAG-1)的表达对白血病细胞株生长的影响及其机制。方法收集重组质粒转染包装病毒细胞的上清转染HEL细胞株,经嘌呤霉素筛选稳定抑制EDAG-1基因表达的细胞株,RT-PCR检测EDAG-1基因的抑制情况,运用MTT检测转染细胞的增殖能力,并将稳定转染的细胞株种植到裸鼠皮下检测成瘤情况。结果成功建立了抑制EDAG-1基因表达的HEL细胞株。与HEL/negative相比,HEL/siRNA细胞株增殖速度降低(P<0.05),接种裸鼠皮下的肿瘤生长明显减慢(P<0.05)。结论沉默EDAG-1基因的表达可以抑制白血病细胞株的增殖,提示EDAG-1基因可能是白血病治疗的一个有效靶点。

FISH检测两种基因在宫颈癌筛查中的价值

目的探讨荧光原位杂交(FISH)检测人类染色体末端酶基因(hTERC)和c-MYC基因扩增在宫颈癌筛查以及疾病转归中的预警价值。方法收集符合条件的妇科门诊患者宫颈标本1 000例,行液基细胞学(TCT)和hTERC、c-MYC基因检测,任一项阳性者在阴道镜下取活检。病理异常者分别在第3、6、12个月重复行细胞学和基因检测及阴道镜随访。结果 hTERC和c-MYC阳性率分别为7.3%、4.6%。无论是细胞学或者病理学分类,两种基因的异常扩增率均随着病变级别加重而升高(P<0.05)。两基因表达也呈正相关性(P<0.01)。随访发现5例患者存在恢复缓慢或疾病进展甚至术后复发,其中4例为hTERC和c-MYC共同表达的患者。hTERC基因的灵敏度和约登指数高于c-MYC,但是特异度较低。结论 hTERC基因和c-MYC基因的异常扩增阳性率随宫颈病变程度、宫颈细胞异常程度增加而增加。两者可以与细胞学互为补充,用于宫颈病变初筛和高度病变风险的评估。

人乳头瘤病毒分型联合液基细胞学检测在宫颈病变筛查中的意义

目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)分型联合细胞学检测在子宫颈病变筛查中的意义。方法收集疑似宫颈病变患者408例,分别进行细胞学和HPV基因芯片分型检测,了解各亚型HPV感染率及其与细胞学结果的相关性,判断HPV感染与年龄的关系,进行统计学分析。结果在高危型感染中居于前3位的分别是HPV 16、58、52。单一高危型HPV感染率随宫颈病变级别升高呈增加趋势,且差异有统计学意义(r=0.879,P<0.05)。高危型HPV感染率在年龄分布上呈两端高的趋势(<25岁和>50岁),但各年龄组间差异无统计学意义。结论 HPV分型检测宜联合细胞学应用于宫颈病变的筛查及临床治疗和随访。

一种快速简便测定奶粉中蛋白质的方法

目的尝试建立一种快速准确地测定奶粉中蛋白质含量的方法。方法使用三氯乙酸沉淀蛋白质后,运用BCA(二喹啉甲酸)法,在570nm波长处,分别测定标准蛋白质应用液与样品稀释液的吸光度值,基于测定液中蛋白质含量与其吸光度值呈正比关系,计算出样品中蛋白质的含量。结果待测溶液中蛋白质浓度在0～250μg/ml范围内标准曲线呈线性关系,其回归方程为:Y=301.12X-73.42,相关系数r=0.998,平均回收率为100.2%。结论结合三氯乙酸沉淀的BCA法适用于奶粉中蛋白质的快速检验和掺伪检验。

干细胞条件培养液对小鼠体外成熟卵母细胞发育潜能的影响

目的：探讨骨髓间充质干细胞（MSCs）条件培养液对小鼠体外成熟卵母细胞发育潜能的影响。方法：分离、培养小鼠MSCs,获得MSCs条件培养液;收集4~6周小鼠生发泡期（GV）卵母细胞,在MSCs条件培养液中体外成熟（IVM）;同时部分小鼠促排处理,收集体内成熟卵母细胞;体外受精（IVF）后,比较受精率、4-细胞形成率及囊胚形成率差异;Hoechst33342染色后观察内细胞团（ICM）和滋养层细胞形成情况,计数内细胞团数。结果：IVM卵母细胞IVF后的受精率、4-细胞形成率和囊胚形成率及囊胚内细胞总数与体内成熟组比较,无显著差异（P〉0.05）;IVM组各时期的胚胎形态正常,囊胚内细胞染色后的荧光图像与体内成熟组基本一致。结论：MSCs条件培养液能保持小鼠IVM卵母细胞良好的质量和发育潜能,是一种较理想的IVM培养体系。

白细胞介素-6及其受体在子宫肌瘤的表达及意义

目的 研究白细胞介素石（IL-6）与IL-6受体（IL-6R）在子宫肌瘤的表达及意义。方法选择因子宫肌瘤行子宫全切除的患者20例，对于子宫肌瘤和同源正常子宫平滑肌，分别采用westernblot和荧光定量PCR检测IL-6的表达；westernblot和RT—PCR检测IL-SR的表达。结果IL-6蛋白和mRNA在正常子宫平滑肌表达明显高于子宫肌瘤[（0．7996±0．0359）比（0．6904±0．0414）和（0．0470±0．0071）比（0．0283±0．0045）]，差异均有统计学意义（P均〈0．05）；而IL-6R蛋白和mRNA表达在肌瘤与平滑肌间差异无统计学意义[（0．7105±0．0520）比（0．6904±0．0532）和（0．6644±0．0537）比（0．6465±0．0501），P均〉0．05）]。结论子宫肌瘤局部IL-6低表达可能在一定程度上参与肌瘤的发病，而IL-6R未参与子宫肌瘤发病。

间充质干细胞与肿瘤生物治疗

间充质干细胞（MSC）具有低的免疫原性和特异的组织趋向性，并且取材方便、体外扩增能力强，因而成为理想的工程细胞。修饰MSC使其表达特定的抗癌分子，或者将其作为靶向抗癌的一个载体成为近几年肿瘤生物治疗研究的热点。MSC在肿瘤生物治疗方面的应用显示着很大的潜力。