照射后NK-92细胞对人卵巢癌细胞杀伤活性的研究

目的研究放射线照射后NK92细胞对人卵巢癌细胞杀伤活性及其成瘤性的影响。方法应用医用电子直线加速器对NK92细胞进行照射处理(800cGy),以体外培养的人卵巢癌细胞株HO8910为靶细胞,以细胞株K562作为对照,应用4h51Cr释放法检测不同效靶比情况下体外培养NK92细胞的杀伤活性。建立人卵巢癌SCID鼠肿瘤模型,观察输注经照射后的NK92细胞对荷瘤鼠的治疗效果。结果(1)体外实验NK92细胞未照射组,效靶比较低时(11、51)对HO8910细胞的杀伤率为39%～45%,随效靶比升高,杀伤率上升,101时杀伤率升为59%,201时杀伤率仅上升了6%;对于K562细胞,杀伤率在58%～71%之间。照射后2d,800cGy组NK92细胞对HO8910细胞不同效靶比的杀伤率比0cGy组略有降低,总体杀伤率在33%～58%之间;对于K562细胞,杀伤率在39%～49%之间。照射后NK92细胞数量进行性下降,第5天细胞死亡;(2)动物实验分别在接种后30、40、50d观察治疗组与对照组肿瘤体积,结果显示,分别减小了78%、56%、20%(P<0.01)。结论NK92细胞对人卵巢癌细胞具有较高的杀伤活性,经放射线照射后仍保留一定的杀伤活性,作为一种生物治疗手段治疗卵巢癌行之有效。

照射后NK-92细胞对人鼻咽癌细胞体外杀伤活性的研究

目的研究NK-92细胞对人鼻咽癌细胞的体外杀伤活性，以及放射线照射后对其杀伤活性的影响。方法应用4h^51Cr释放法检测不同效靶比情况下体外培养的NK-92细胞对人鼻咽癌细胞CNE的杀伤活性，以K562细胞株作为对照。应用医用电子直线加速器对NK-92细胞进行照射处理（0、400cGy）后，检测其杀伤活性的变化。结果NK-92细胞0cGy照射组，效靶比较低时（1：1、5：1）对CNE细胞杀伤率为11％～24％，随效靶比升高，杀伤率随之上升，10：1时杀伤率为36％，20：1时杀伤率为42％；对于K562细胞，杀伤率为35％～70％。400cGy组照射后2d，NK-92细胞对CNE细胞不同效靶比的杀伤率与0cGy组相比稍有降低，其杀伤率为8％～38％，对K562细胞杀伤范围在31％～62％。结论在合适的效靶比情况下，NK-92细胞对人鼻咽癌细胞CNE具有杀伤作用。经放射线照射后对CNE细胞仍具有一定的杀伤活性。

人子宫肌瘤SCID鼠皮下移植瘤的建立及其生物学研究

目的建立人子宫肌瘤SC ID鼠皮下移植瘤模型,为研究人子宫肌瘤的实验研究提供合适的动物模型。方法将2例子宫肌瘤患者手术切除标本移植于SC ID鼠皮下,观察移植瘤的及SC ID鼠生长情况。待移植瘤存活后作病理学及雌激素受体、孕激素受体(ER,PR)检查。结果成功建立6只人子宫肌瘤SC ID鼠皮下移植瘤模型,移植成功率为100%,荷瘤鼠的生存期未见缩短,状态良好。病理组织学证实:移植物保持了原子宫肌瘤生物学特征,ER、PR均有不同程度的表达。结论成功建立了人子宫肌瘤SC ID鼠皮下移植瘤模型,移植瘤保持了原子宫肌瘤生物学特征,是研究人子宫肌瘤较理想的动物模型。

针对EDAG-1基因的siRNA抑制白血病细胞的生长及IL-8分泌

目的:探讨抑制胚胎发育相关基因-1(embryonic develop-associated gene1,EDAG-1)表达对白血病细胞株生长的影响及其机制。方法:将靶向EDAG-1基因的特异序列连接到逆转录病毒载体中,将脂质体介导的重组质粒转染包装产病毒细胞株PT67;收集细胞上清液转染HEL细胞株,经嘌呤霉素筛选获得稳定抑制EDAG-1基因表达的细胞株;RT-PCR法检测EDAG-1基因的抑制情况,MTT法检测转染细胞的增殖能力,同时采用RT-PCR和ELISA法检测转染后细胞中IL-8的表达水平。结果:成功构建获得靶向EDAG-1基因的反转录病毒载体,筛选获得抑制EDAG-1基因表达的HEL细胞株。EDAG-1基因被抑制的细胞株增殖速度降低,IL-8的分泌水平同时相应减低。结论:沉默EDAG-1基因的表达可以抑制白血病细胞株的增殖和IL-8的分泌,提示EDAG-1基因可能是白血病治疗的一个有效靶点。

免疫重建荷人卵巢癌-SCID鼠模型的建立

[目的]探讨建立具有人免疫学特征的卵巢癌-SCID鼠模型的可行性。[方法]将16只雌性SCID小鼠随机分为4组。A组:磷酸盐缓冲液(PBS)0.5ml;B组为荷HO-8910组:HO-8910细胞1×106个/只;C组为人免疫重建组:PBL细胞4×107个/只,进行免疫重建;D组为荷HO-8910免疫重建组:PBL细胞4×107个/只,24h后腹腔注射HO-8910细胞1×106个/只,观察各组小鼠的生物学及免疫学特性。[结果]免疫重建鼠的骨髓、肝脏、脾脏、胸腺、淋巴结、外周血、腹腔液中检测到人源性细胞;荷HO-8910细胞免疫重建组小鼠移植瘤体积小于荷HO-8910组小鼠;各组均无移植物抗宿主病(GVHD)发生。[结论]初步建立免疫重建荷人卵巢癌-SCID鼠模型,为卵巢癌治疗的临床前研究提供了理想动物模型。

人卵巢癌重症联合免疫缺陷小鼠腹腔移植瘤模型的建立及其生物学研究

目的建立人卵巢癌重症联合免疫缺陷小鼠(SCID鼠)移植瘤模型,为研究人腹水型卵巢癌的实验研究提供合适的动物模型。方法将2例卵巢癌患者手术切除标本移植于SCID鼠腹腔,原代移植瘤形成后进行鼠间传代,观察移植瘤的生长、转移及腹水形成情况,做腹水细胞学计数、涂片,检测荷瘤鼠血中肿瘤标记物CA125的浓度,肿瘤作病理学检查。结果成功建立3只原代人卵巢癌SCID鼠移植瘤模型,原代移植成功率为37.5%,自第四代后,移植瘤的传代成功率为100%,随着传代次数的增加,移植瘤的成瘤潜伏期及荷瘤鼠的生存期逐渐缩短,荷瘤鼠血中肿瘤标记物的浓度升高,病理组织学证实:移植瘤保持了原卵巢癌生物学特征。结论成功建立了人卵巢癌SCID鼠移植瘤模型,移植瘤保持了原卵巢癌生物学特征,是研究人卵巢癌较理想的动物模型。

胚胎发育相关基因在子宫内膜异位症组织中的表达

目的探讨EDAG-1基因与子宫内膜异位症发病的相关性。方法采用RT-PCR方法检测临床获得的卵巢巧克力囊肿壁组织、正常子宫内膜组织中EDAG-1基因的表达。结果EDAG-1基因在正常子宫内膜、巧克力囊肿壁组织中阳性表达频率分别是23%(3/13),58.8%(10/17)。结论EDAG-1基因的表达可能与子宫内膜异位症的发病相关。