大鼠急性肝衰竭模型自由基和细胞因子的动态变化

目的研究急性肝衰竭(ALF)时细胞因子(CK)和自由基(FR)的动态变化。方法64只SD大鼠接受D-氨基半乳糖(Galn)腹腔注射加脂多糖(LPS)静脉注射,以建立急性肝衰竭小鼠模型。LPS注射后0h,0.5h,1h,2h,4h,8h,16h,和24h,各处死8只大鼠,取肝组织和血清。以分光光度法检测血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)水平和肝匀浆中活性氧(AO)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量;ELISA法检测血清和肝匀浆中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)水平。结果血清ALT、AST活性在静注LPS后4h开始升高,16h达高峰;肝匀浆AO含量自0.5h开始即有上升,2h达峰值并维持在较高水平;肝匀浆MDA含量自LPS攻击后持续升高,SOD活性呈反相趋势。LPS攻击后,血浆和肝匀浆中的TNF-α水平在短时间内剧烈升高,2h达高峰,血清IL-11h达高峰,肝匀浆IL-1峰值在4h。结论CK和FR在ALF发生机制中起重要作用,并且早期就达到峰值。

严重急性呼吸综合征患者肿瘤坏死因子基因多态性的研究

目的探讨肿瘤坏死因子(TNF)基因多态性在严重急性呼吸综合征发病和急性肺损伤的发生及预后中的作用,探讨严重急性呼吸综合征患者急性肺损伤发生的遗传学特征。方法48例散发康复期严重急性呼吸综合征患者及96例健康对照组人群均为来自北京地区汉族人群。常规酚-氯仿抽提法提取DNA;限制性长度多态性及聚合酶链反应方法(RFLP-PCR)扩增TNFβ+252位点所在的片段。其PCR产物在NcoI酶作用下酶切,电泳后凝胶放入含0.5%μg/ml溴化乙啶的TBE缓冲液染色,然后在紫外线透射仪下观察电泳条带判断基因型。结果康复期严重急性呼吸综合征患者TNFβ+252位点基因频率和基因型频率与健康对照组比较无统计学差异。重症康复期严重急性呼吸综合征患者的TNFβ+252*GA杂合子频率(65.4%)明显高于轻症康复期严重急性呼吸综合征患者(27.3%,χ2=0.399,P=0.027,RR=6.375;95%CI:1.42～28.6;χ2=4.579,P=0.032)。结论TNFβ+252位点的基因多态性与严重急性呼吸综合征发病易感性无关,但TNFβ+252位点G/A杂合子频率与严重急性呼吸综合征的预后有关。