呼吸道合胞病毒合并肺炎克雷伯菌感染所致肺炎与TLR4-NF-κB信号通路关系的初步研究

目的探讨呼吸道合胞病毒(RSV)合并肺炎克雷伯菌(Kp)感染SD大鼠后,初步研究其所致肺炎与TLR4-NF-κB信号转导通路的关系。方法 60只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、RSV组、Kp组及RSV+Kp组,以RSV、Kp滴鼻感染SD大鼠,分别于感染后第0、1、3、5、7天不同时间点,测量其体重、肺指数(LI)的变化;HE染色观察肺的病理学改变;RT-PCR法检测肺组织中TLR4、NF-κB的mRNA表达;Western blot检测NF-κB蛋白的表达;ELISA法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)含量的变化。结果与正常对照组相比,RSV组和Kp组均存在弥漫性肺泡间隔增厚和炎症细胞浸润,且随感染时间的延长,肺泡结构破坏逐渐加重,LI、TLR4 mRNA、NF-κB mRNA、NF-κB蛋白、TNF-α和IL-1β的表达均升高,并与RSV和Kp感染之间存在时间依赖性关系;RSV+Kp组LI、TLR4 mRNA、NF-κB mRNA、NF-κB蛋白、TNF-α和IL-1β的表达量进一步升高,肺组织炎症明显加剧。结论 RSV和Kp混合感染具有协同作用,加重肺部炎症;RSV合并Kp感染可能通过TLR4-NF-κB途径诱导肺部炎症反应,释放细胞因子TNF-α和IL-1β等。

还原型谷胱甘肽对凝血功能的影响

本研究探讨还原型谷胱甘肽(GSH)对凝血功能的影响。随机留取正常凝血血浆标本及其混合血浆标本,加入常规剂量及各浓度梯度GSH,采用凝固法检测加药物前后血浆凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)及凝血酶时间(TT),统计分析加药前后PT、APTT、FIB及TT检测结果的差异,并对其检测结果与GSH的浓度作线性回归分析;随机抽取常规剂量给药21例患者,采集给药前后血液标本,统计分析给药前后血浆PT、APTT、FIB及TT检测结果的差异。结果表明,体外试验中,加入常规剂量(500 mg/L)GSH后血浆FIB、APTT、PT及TT检测结果与加药前检测结果之间的差异有统计学意义(P<0.01),且当加入的GSH浓度分别达2.5、2.5、10、1280 mg/L时,FIB、APTT、PT及TT的测定结果与加药前之间的差异具有统计学意义(P<0.01),且4项测定结果与血浆中加入的GSH浓度存在线性关系;21例试验患者用药后血浆FIB、APTT、PT及TT检测值与用药前有显著性差异(P<0.001),其中共19例FIB、20例PT、20例TT和21例APTT检测结果高于用药前。结论:在体内外实验中,GSH可以影响凝血检测结果。

Sysmex CA7000血凝仪试剂仓试剂放置时间对血凝四项检测结果的影响

本研究旨在探讨Sysmex CA7000血凝仪试剂仓开封试剂放置不同时间对血浆凝血酶原时间（PT）、纤维蛋白原（FIB）、活化部分凝血活酶时间（APTT）及凝血酶时间（TT）检测结果的影响。采用凝固法采集21例患者凝血标本,使用Sysmex CA7000型全自动血凝分析仪及其原装配套试剂及放置一定时间的试剂和新鲜试剂测定每1例标本的PT、APTT、TT及Fib。各试剂放置时间分别为Thromborel S（TS）：12、24、36、48、60、72 h;Dade Actin（DA）：24、48、72、96、120 h;Test Thrombin（TT）：2、4、6、8、10、12 h;Thrombin Reagent（TR）：4、8、12、16、20、24 h;Owren＇s Veronal Buffer（OVB）：1、2、3、4、5、6 h。以试剂仓放置一定时间为各试验组,以其新鲜试剂（0 h,即时配置）为对照组,计算各试验组PT、APTT、TT及Fib检测值与其对照组间统计学差异,分析放置时间对检测结果的影响。结果表明,当TS、DA、TT、TR及OVB在试剂仓分别放置≥48、96、10、16、4 h时,其PT、APTT、TT及Fib结果与新鲜试剂差异均有统计学意义（P〈0.01）;当放置时间分别达到48-72、96-120、10-12、16-24及4-6 h时,其检测结果与0h间差异百分比分别在-2.6%-10.8%、-3.44%-4.8%、-3.9%-5.52%、-10.8%-3.3%及-17.2%-0.5%之内,其中TS对PT及OVB对Fib影响较为明显;随着试剂放置时间的延长,PT、APTT、TT均呈现延长趋势,而Fib呈现下降趋势。结论：常规检测血凝四项时,需及时更换试剂仓试剂,以保证标本检测结果的准确性。

SysmexCA-7000血凝仪凝血4项2种操作模式批内精密度及样本结果比较

目的:研究SysmexCA7000血凝仪凝血4项2种检测模式批内精密度及标本检测结果差异。方法:使用SysmexCA7000型全自动血凝分析仪及其原装配套试剂,分别用常量(normal)模式及微量(micro)模式测定人工制备的10份混合血浆标本、质控样本(control 1,control 2)及50例患者标本的凝血酶原时间(PT)、纤维蛋白原(Fib),活化部分凝血活酶时间(APTT)及凝血酶时间(TT),其中每个混合血浆标本及质控样本重复检测10次,计算10次检测结果均值(X)、标准差(SD)及批内精密度(变异系数,CV%),统计分析两种模式下精密度及患者标本结果是否有统计学差异。结果:在微量和常量2种模式下CA7000全自动血凝仪测得APTT、Fib、PT及TT批内精密度分别为:0.53%-1.58%、0.72%-2.08%、0.51%-1.37%、0.58%-1.60%及1.17%-2.10%、1.10%-2.43%、0.88%-1.99%、1.05%-1.98%;4个项目2种模式CV均有显著性差异(P<0.001),常量模式CV均不同程度高于微量模式;50例病人APTT、PT及Fib检测结果2种模式比较有显著性差异(P<0.05),而TT2种模式比较无显著性差异(P>0.05)。结论:使用SysmexCA7000血凝仪测定凝血4项时,微量模式精密度更高,建议用微量模式检测临床标本,提高结果的重复性,确保结果可靠性和准确性。

酶法测定糖化血红蛋白的方法评价及标本前处理对结果的影响

目的探讨酶法测定糖化血红蛋白（HbA1c）方法学性能及其影响因素。方法采用酶法测定HbA1c,评价该方法学的精密度、抗干扰性、回收率、准确性以及标本前处理（抗凝、保存、离心）对结果的影响,分析与高效液相法（HPLC）相关性及偏倚程度。结果酶法批内高、中、低值变异系数（CV）为1.04%、1.26%、1.37%,批间为1.83%、2.24%、2.64%,与HPLC法呈线性相关（r=0.996,P〈0.01）;HbA1c靶值浓度为5.20%、6.40%、7.60%、8.80%、10.00%、11.20%,其回收率分别为100.15%、98.91%、98.84%、98.20%、103.62%、99.82%;当葡萄糖小于15.50 mmol/L、尿酸小于516.00μmol/L、胆红素小于217.00μmol/L、三酰甘油小于10.20mmol/L、尿素小于11.50mmol/L、清蛋白小于50g/L、球蛋白小于50g/L时,对结果无明显干扰。肝素钠、乙二胺四乙酸二钾（EDTA-K2）、枸橼酸钠抗凝标本HbA1c结果在-20-20℃保存3d无明显改变（P〉0.05）;标本500、1 000r/min（R=15cm）离心不同时间（1、2、5、10min）以及2 000r/min离心1min,其检测结果与3 000r/min离心5min比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论酶法测定HbA1c其精密度、抗干扰性、准确性、线性范围均符合临床要求,与常规方法相比其相关性良好且偏差较小,可完全满足临床对HbA1c检测需求。

36854例普通住院患者梅毒血清学抗体阳性率及其分布状况调查

目的 了解住院患者梅毒（TP）血清抗体阳性率及其分布状况,为梅毒的预防工作提供参考依据.方法 采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法对我院2012年1月至2014年10月共36854例普通住院患者血清进行梅毒抗体筛查,阳性标本用双孔复检后再用金标法进行确认试验,两种方法均为阳性病例列为本次统计范围,回顾性分析各科室、各年度及各年龄段阳性率.结果 在36854例住院患者血清中共检出639例梅毒抗体阳性,总体阳性率为1.73％,男性阳性率（2.10％,365/17402）显著高于女性（1.41％,274/19452）（P＜0.05）;2012年至2014年年度检出率分别为1.78％、1.77％及1.66％,年度检出率无明显差异（P＞0.05）,但呈下降趋势.在科室分布上,检出率排名前五位的科室分别为肿瘤内科（4.64％）、放疗科（3.9％）、内分泌科（3.03％）、心内科（2.86％）及泌尿外科（2.68％）,其中肿瘤内科、内分泌科、心内科、泌尿外科及消化内科阳性率均高于总体阳性率（P＜0.05）,产科阳性率（0.73％）低于总体阳性率（P＜0.05）;各年龄组＜20、20～29、30～ 39、40～49、50 ～ 59、60～ 69、70～79及≥80岁的阳性率分别为：0.14％、0.68％、1.13％、2.14％、2.14％、2.15％、2.22％、3.42％,随着年龄的增加,阳性率呈上升趋势,其中≥40岁各年龄组均显著高于总体阳性率（P＜0.05）.结论 三年来梅毒检出率未见上升趋势,梅毒血清抗体阳性在临床上占一定的比例,几乎分布各个科室,常规对住院患者进行梅毒血清学筛查很有必要,对保护医务工作者、减少医源性感染和传播、预防交叉感染以及避免不必要的医疗纠纷有着重要意义.

Sysmex CA7000血凝仪2种方法测定纤维蛋白原结果的比较

目的：探讨 Sysmex CA7000血凝仪2种方法测定纤维蛋白原（Fib）结果差异及其相关性。方法使用 Sysmex CA7000型全自动血凝分析仪及其原装配套试剂，分别用凝血酶原时间（PT ）衍算（PT‐Fib）法及凝血酶法（Clauss 法）同时测定临床常规血凝标本 Fib 水平。回顾性随机抽取 PT‐Fib 法检测的 Fib 水平在1．00～1．99、2．00～2．99、3．00～3．99、4．00～4．99 g ／L范围内的各21例患者数据，分析其与 Clauss 法测定结果差异及其相关性。结果 PT‐Fib 法检测 Fib 水平在1．00～1．99、2．00～2．99、3．00～3．99、4．00～4．99 g／L 时，2种方法之间检测结果差异有统计学意义（P＜0．05），PT‐Fib 法结果明显低于 Clauss 法，4组浓度平均值分别低15．2％（－4．9％～38．3％）、27．2％（－0．9％～49．4％）、24．6％（－3．7％～35．6％）、32．7％（15．7％～48．2％），2种方法测定结果呈正相关。结论测定血浆 Fib 时，PT‐Fib 法与 Clauss 法有差异，建议临床实验室把 Clauss 法作为Fib 常规定量测定方法。

合肥地区正常临产孕妇纤维蛋白原参考值范围的初步建立

目的初步建立合肥地区正常临产孕妇纤维蛋白原(FIB)的参考值范围并比较其与原参考值的一致性。方法使用SysmexCA7000型全自动血凝分析仪及其原装配套试剂,测定1 615例正常临产孕妇FIB结果,统计分析FIB分布状况,根据分布状况确定参考值范围建立方法,建立参考值范围。将建立的参考值范围与原参考值范围(2.00~4.00g/L,参照第3版《全国临床检验操作规程》)进行一致性检验,计算Kappa值。结果 FIB为偏态分布(单样本K-S检验P=0.001),参考值范围M(P2.5~P97.5)为4.15(2.81~5.40g/L)。进一步统计结果表明,1 615例中共有991例超过原FIB参考值范围,异常率占61.36%;超过现有参考值范围共81例,异常率占5.02%,现参考值范围异常率大幅度降低。将两个参考值范围进行统计学比较,结果显示Kappa=0.015<0.4,U=2.225,P<0.05,因此可以认为两个参考值范围判断标准的一致性较差,原参考值范围不适合正常临产孕妇人群。结论原参考值范围不适合正常临产孕妇人群,应单独建立孕妇FIB的参考值范围,以提高评价临产孕妇人群个体危险性的准确性。

试剂孵育对血浆凝血酶原时间检测结果的影响

目的探讨试剂孵育对血浆凝血酶原时间（PT）检测结果的影响。方法随机选择PT检测结果正常或异常的血浆标本各30例,根据PT检测试剂盒及质控品说明书的要求配制试剂及质控品,采用未经37℃孵育45min处理的试剂及经过相应孵育处理的试剂进行标本及质控品PT水平检测。分析孵育处理对PT检测结果的影响。结果未经孵育处理的试剂对标本及质控品的检测结果均高于经孵育处理的试剂（t=11.03,P〈0.05）,升高幅度为0.76%~7.76%,平均升高3.50%,但二者检测结果呈线性相关,相关系数为r=0.999 3。结论在进行血浆PT检测时,应严格按照试剂盒说明书的要求对试剂进行孵育处理,以保证检测结果的准确性。

妊娠末期孕妇血栓弹力图参考区间的初步建立

目的初步建立妊娠末期健康女性血栓弹力图参考区间。方法纳入2020年10月至2021年11月安徽省第二人民医院妊娠末期女性213例,按孕周分组为早期足月组、中期足月组、晚期足月组,分别检测TEG指标(R、K、Angle、MA和CI)和凝血功能指标(PT、Fib、APTT、TT)进行分析。结果晚期足月组与早期足月组、中期足月组比较,R、K、Angle、CI差异均有统计学意义(P均<0.05)。中期足月组与早期足月组比较,R、Angle、CI差异有统计学意义(P均<0.05)。K、Angle、MA值与PLT相关性分析的r值分别为-0.136、0.176、0.162(P均<0.05)。MA与Fib相关性分析的r值为0.267(P<0.01)。初步拟定妊娠末期健康女性参考区间分别为R:0.41~7.07 min,K:0.8~4.2 min,Angle:52.81°~-81.37°,MA:57.40~78.99 mm,CI:0.27~5.67。与厂家提供的参考区间比较差异有统计学意义。结论初步建立了妊娠末期血栓弹力图参考区间。

预测ICU住院病人死亡的Nomogram模型

目的:构建重症监护病房(ICU)住院病人死亡Nomogram预测模型,为降低ICU住院病人死亡率提供指导。方法:回顾性分析ICU 1133例住院病人临床资料,采用logistic回归分析筛选ICU住院病人死亡危险因素,并构建可视化Nomogram预测模型,采用决策曲线分析(DCA)对简单评价模型和复杂评价模型进行比较。结果:多因素logistic回归分析显示医院感染(OR=1.876,95%CI:1.037~3.043)、高血压(OR=1.133,95%CI:1.090~1.177)、糖尿病(OR=1.141,95%CI:1.064~1.209)、输血(OR=1.357,95%CI:1.102~3.421)、低GCS评分(OR=0.953,95%CI:0.917~0.991)、APACHEⅡ评分(OR=2.638,95%CI:0.794~8.692)、气管切开(OR=3.973,95%CI:2.386~6.615)、气管插管(OR=1.562,95%CI:1.163~2.266)、动静脉插管(OR=1.365,95%CI:1.067~3.172)、动静脉插管时间(OR=1.825,95%CI:1.224~2.979)、导尿管插管(OR=2.016,95%CI:1.050~3.870)、导尿管插管时间(OR=2.689,95%CI:1.724~4.195)为ICU住院病人死亡独立危险因素(P<0.05)。根据多因素logistic回归结果建立Nomogram模型,经验证预测模型一致性良好(C-index=0.748,P<0.05)。DCA显示阈值概率在(0.09~0.49)范围内,复杂模型的净利润高于简单模型,阈值概率在(0.49~0.87)范围内,简单模型的净利润高于复杂模型。结论:成功建立预测ICU住院病人死亡的Nomogram预测模型。

气相色谱质谱法测定孕妇血浆中短链脂肪酸结果分析

目的建立测定血浆中短链脂肪酸(SCFAs)含量的方法,研究孕妇血浆中SCFAs含量的变化。方法选取2020年4~12月在安徽省第二人民医院建卡并定期产检的孕妇62例为妊娠组,选择同期参加体检但未怀孕的健康女性37例为对照组。建立高灵敏度的气相色谱质谱法(GC-MS)研究血浆中的SCFAs含量的变化。结果乙酸、丙酸、异丁酸和丁酸的线性范围为20~1000 ng/mL,线性关系良好;乙酸的回收率为50%,其余3种酸的回收率均接近100%,待测物均无明显的基质增强或抑制效应。妊娠组乙酸和丙酸的含量高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),异丁酸和丁酸的差异无统计学意义(P>0.05);妊娠组血糖浓度和丙酸呈正相关(P<0.05)。通路富集分析表明丙酮酸代谢通路、糖酵解及糖异生代谢通路和丙酸酯代谢通路和孕妇血浆中乙酸、丙酸含量增加有关。结论通过GC-MS法发现孕期血浆中乙酸和丙酸的含量升高,且丙酸同血糖的浓度呈正相关,SCFAs在孕期含量的变化值得临床重视。

降钙素原和C-反应蛋白联合检测在诊断老年细菌性肺炎中的应用价值

目的:探讨降钙素原(PCT)和C-反应蛋白(CRP)联合检测在诊断老年细菌性肺炎中的应用价值。方法:选取2017年1月至12月期间在安徽省第二人民医院接受治疗的90例老年细菌性肺炎患者作为细菌组,选取同期在该院接受治疗的90例老年非细菌性肺炎患者作为非细菌组,另选取同期在该院进行体检的90例老年健康体检者作为对照组。对这三组人员均进行PCT检测和CRP检测,比较其PCT、CRP的水平。然后比较用PCT检测、CRP检测及PCT、CRP联合检测诊断老年细菌性肺炎的准确率。结果:1)非细菌组患者与对照组体检者PCT、CRP的水平相比差异无统计学意义(P>0.05)。细菌组患者PCT、CRP的水平均高于非细菌组患者和对照组体检者(P<0.05)。2)与用PCT检测或CRP检测相比,用PCT和CRP联合检测诊断老年细菌性肺炎的准确率更高(P<0.05)。结论:PCT和CRP联合检测在诊断老年细菌性肺炎中的应用价值较高。

重症监护室病原菌分布及耐药性分析

目的：调查医院重症监护室（ICU）患者临床感染病原菌的分布及耐药趋势，为控制医院感染及临床合理选用抗菌药物提供依据。方法对本院2012年1月至2014年12月 ICU 住院患者送检的各类标本中分离出的病原菌分布及耐药性进行回顾性分析。结果共分离病原菌497株，以革兰阴性杆菌为主占73．24％，革兰阳性球菌51株占10．26％，真菌82株占16．50％。其中以痰标本为主占76．06％，其次是血液标本10．87％，中段尿标本3．62％。革兰阴性杆菌中铜绿假单胞菌居于首位占23．34％，其次为鲍曼不动杆菌12．88％、肺炎克雷伯菌11．47％、嗜麦芽窄食单胞菌5．03％、大肠埃希菌3．22％；超广谱β‐内酰胺酶（ESBLs）检出率分别为38．60％，革兰阳性球菌中金黄色葡萄球菌占2．01％，其中对苯唑西林的耐药率（MRSA）高达100％，未检出万古霉素耐药菌株。结论ICU 为医院感染高发科室，以呼吸道感染为主，病原菌以革兰阴性杆菌为主，大部分细菌对常用抗菌药物表现为高度耐药。加强 ICU 病原学耐药性监测，对指导临床合理使用抗菌药物和预防医院感染具有重要意义。

用新建的临产前孕妇血浆FIB水平的参考值范围评估其凝血功能的价值

目的:探讨并分析用新建的临产前孕妇血浆纤维蛋白原(FIB)水平的参考值范围评估其凝血功能的价值。方法:将近年来在安徽省第二人民医院进行顺产的1130例单胎妊娠孕妇作为研究对象。在这些孕妇临产前,检测其血浆FIB的水平,根据其检测结果的相关数据采用百分位数法新建其血浆FIB水平的参考值范围,对新建的血浆FIB水平的参考值范围与其原参考值范围进行一致性检验,以新建的血浆FIB水平的参考值范围与其原参考值范围为标准统计这1130例孕妇血浆FIB水平异常的检出率,然后另收集200例在该医院进行顺产前的单胎妊娠孕妇血浆FIB水平的相关数据,用其验证新建的血浆FIB水平参考值范围的有效性。结果:本研究中,为这1130例临产前孕妇新建的血浆FIB水平的参考值范围为2.29~5.64 g/L。本研究中新建的血浆FIB水平的参考值范围与其原参考值范围的一致性较好(χ2=3.147,P<0.05)。以新建的血浆FIB水平的参考值范围为标准对这1130例孕妇进行血浆FIB水平检测时其检测结果异常的检出率低于以血浆FIB水平的原参考值范围为标准对其进行血浆FIB水平检测时其检测结果异常的检出率,P<0.05。对200例进行顺产前的单胎妊娠孕妇血浆FIB的水平进行检测的结果显示,其中检测结果超出新建的血浆FIB水平参考值范围的孕妇共有7例,占3.5%。结论:用新建的临产前孕妇血浆FIB水平的参考值范围评估其凝血功能的可行性较高。

安徽北部地区恶性肿瘤人群卡波氏肉瘤相关疱疹病毒血清学分析

卡波氏肉瘤相关疱疹病毒是一种新发现的γ疱疹病毒(Kaposi’s sarcoma-associated herpesvirus,KSHV)。在中国新疆,KSHV感染率比较高,KSHV在免疫缺陷患者和静脉吸毒者中感染率也比在普通人群中高。为了进一步研究KSHV在安徽北部地区恶性肿瘤人群中的感染率和高风险因素,初步探讨KSHV与肿瘤的发生之间相关性,研究KSHV的高发人群特点,本研究选用KSHV病毒重组蛋白ORF65、ORF 73和K8.1为抗原,利用酶联免疫吸附实验(ELISA)对500份恶性肿瘤患者血清样本及200份健康体检人群血清样本进行KSHV抗体检测,分析KSHV的感染率及危险因素。结果显示500例肿瘤患者KSHV阳性总数170例,总阳性率为34%,200份健康人群KSHV阳性总数22例,总阳性率为11%,肿瘤人群KSHV阳性率明显高于健康人群(P<0.001)。其中肺癌、肝癌、结肠癌、宫颈癌、乳腺癌样本KSHV阳性率分别为36.4%,34.1%,41.7%,28.6%,30.3%,此5组肿瘤组KSHV阳性率也分别高于健康人群,都具有统计学意义(P<0.001)。但5组肿瘤样本之间KSHV阳性率无明显差异(P>0.05),且各组肿瘤样本分别与性别、乙肝五项、丙肝之间无统计学意义(P>0.05)。本研究结果提示安徽北部地区恶性肿瘤患者KSHV抗体阳性率显著高于中国普通人群总体KSHV抗体阳性率,证明KSHV在恶性肿瘤人群中呈现较高比例的分布。