2008—2012年安徽省3154株非发酵菌分布特点及耐药分析

目的了解安徽地区医院感染非发酵革兰阴性菌的分布特点及耐药状况,为临床抗感染治疗提供依据。方法抽取安徽省40家参加医院2008年至2012年,每年9月份临床分离的非发酵革兰阴性菌,采用国际标准琼脂糖平皿二倍稀释法进行体外药物敏感试验,用最低抑菌浓度(MIC值)表示抗菌药物的抗菌活性,并按2012年美国临床和实验标准化研究所(CSLI)指导原则的标准计算细菌对抗菌药物的耐药率。使用WHONET5.6分析软件分析数据。结果共检测安徽省内3154株非发酵菌,占临床分离总数的27%。其中,占首位的是铜绿假单胞菌,其次为鲍曼不动杆菌和嗜麦芽寡养单胞菌,分别占50.1%、36.8%和6.7%。非发酵菌感染部按检出率高低依次为:下呼吸道、伤口创面、泌尿生殖道、胸腹腔,上述4种标本占整个临床分离株的89.2%。病区分布主要为呼吸内科(48.7%),其次为重症监护室(20.2%)、烧伤科和神经内科分别占19.8%和14.3%。药敏结果显示,安徽地区非发酵菌对碳青霉烯类药物耐药率逐年升高,对头孢菌素类、青霉素类、喹诺酮类药物呈现高度耐药,并且多重耐药和泛耐药情况严重。结论近5年来,安徽地区非发酵菌的分离率较高,多重耐药现象严重,应重视非发酵菌的感染情况并做好对其的耐药性监测。

安徽省产质粒介导AmpC酶大肠埃希菌的耐药性及基因型分析

目的了解2007年安徽地区产质粒介导AmpC酶的大肠埃希菌检出率及产酶株基因型。方法三维实验进行AmpC酶筛选;并行转移接合实验,PCR检测AmpC酶基因,琼脂稀释法进行药物敏感试验。结果21株大肠埃希菌三维实验阳性,占所有临床分离菌株的5.9%(21/355),19株经PCR检测携带ampC基因,16株转移接合成功,经序列分析表明,9株CIT阳性结果,6株DHA阳性结果,3株EBC阳性结果;1株同时携带EBC及DHA基因。其中有1株EBC型新基因被检出(序列号为FJ237369);药敏结果显示临床分离菌株及接合子对多种抗菌药物耐药,对头孢吡肟,亚胺培南,美罗培南相对较敏感。结论安徽地区大肠埃希菌产质粒介导AmpC酶以CIT型和DHA型为主,同时存在变异型,临床可选用第四代头孢菌素类抗菌药物,碳青霉烯类抗菌药物抗感染治疗。

安徽省耐唑类药物白念珠菌ERG11基因的突变研究

目的了解安徽省临床分离的对唑类药物(氟康唑﹑伊曲康唑﹑伏立康唑)耐药白念珠菌的ERG11基因突变情况,探讨其与耐药的关系。方法用沙保弱培养基对安徽省40所医院2012年9月份收集的198株白念珠菌进行培养﹑分离,科玛嘉显色培养基进行鉴定。采用微量稀释法测定其对唑类药物的敏感性,提取筛选出耐药的菌株及3株敏感株的基因组DNA,设计一对引物扩增其ERG11基因,扩增后送之测序,测序结果与GenBank中的已知标准序列(X13296)进行比对分析。结果 PCR产物电泳后均成功获得预期大小的片段,测序结果比对分析发现34个不同的碱基突变位点,其中错义突变位点为14个。结论本研究发现耐唑类药物的白念珠菌存在多个错义突变位点,且多为多位点突变,可能与其耐药性的产生有关,其中T123I、Y334S、V452D和L480F目前尚未见相关报道。

糖尿病合并细菌性肝脓肿患者的临床特点分析

目的比较糖尿病(DM)合并肝脓肿(PLA)与非糖尿病(NDM)合并PLA患者之间的临床特征,以期为临床诊断及治疗提供依据。方法选取安徽医科大学某附属医院2002年7月—2022年2月收治的PLA患者,按照是否合并DM分为DM+PLA组和NDM+PLA组。回顾性分析两组患者的一般情况、临床表现和体征、并发症、生化和病原学检查结果、影像学表现、临床疗效及影响因素。结果共纳入PLA患者695例,其中DM+PLA组191例(27.5%),NDM+PLA组504例(72.5%)。DM+PLA组患者中男性、合并高血压的占比高于NDM+PLA组,而胆道疾病及恶性肿瘤占比低于NDM+PLA组(均P<0.05)。DM+PLA组患者出现发热,乏力,并发贫血、低蛋白血症的占比高于NDM+PLA组(均P<0.05)。与NDM+PLA组相比,DM+PLA组患者中性粒细胞计数、中性粒细胞百分比升高,而总蛋白、清蛋白含量及清蛋白/球蛋白比值均降低(均P<0.05)。DM+PLA组患者肺炎克雷伯菌检出、肝右叶脓肿发生的占比较NDM+PLA组更高(均P<0.05)。多因素logistic回归分析发现,恶性肿瘤是影响PLA患者临床疗效的危险因素,侵入性治疗是影响PLA患者临床疗效的保护因素,而血糖是影响NDM+PLA组患者临床疗效的危险因素。结论DM+PLA较NDM+PLA患者感染症状重,且伴有更高的肺炎克雷伯菌感染和肝右叶脓肿的比例。应加强对恶性肿瘤患者的关注,控制好血糖水平,必要时应及时辅以侵入性治疗手段。

蚌埠地区产超广谱β-内酰胺酶菌株CTX-M型耐药基因的分布

目的了解蚌埠市部分医院临床分离产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中CTX-M型ESBLs基因分布情况。方法标本为蚌埠市3所医院2003年4月-2004年4月间,临床分离产ESBLs肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌147株;采用聚合酶链反应(PCR)扩增产CTX-M型ESBLs菌株基因;按Sanger双脱氧末端终止法,用自动测序仪对其进行测序以鉴定基因型。结果147株产ESBLs菌株中有92株携带CTX-M型ESBLs基因,其中CTX-M-14型52株、CTX-M-3型20株、CTX-M-15型20株。结论蚌埠市部分医院产CTX-M型ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌检出率较高,主要为CTX-M-14型。

多重耐药鲍曼不动杆菌表型及耐药基因型的研究

目的对我院临床分离的31株多重耐药鲍曼不动杆菌表型和耐药基因进行分析。方法用纸片扩散法检测鲍曼不动杆菌的药敏结果,用三维试验检测超广谱β-内酰胺酶(ESBL)、头孢菌素酶(AmpC酶),用协同法检测金属β-内酰胺酶(MBL),用聚合酶链反应(PCR)检测耐药基因。结果31株多重耐药鲍曼不动杆菌中,90%对亚胺培南敏感;22%对头孢哌酮-舒巴坦耐药,74%中介;其他抗菌药物的敏感率均在6%以下。2株菌(6%)单产ESBL;93%菌株高产AmpC酶,其中19%菌株同时产ESBL。所有菌株b laTEM、aacA4和gyrA基因均为阳性;96%菌株ampC基因为阳性;2株菌同时携带b laPER和b laOXA-23型基因,另有1株菌b laOXA-23基因阳性。结论同时携带b laTEM、ampC、aacA4和gyrA突变以及b laPER、b laOXA-23等多种耐药基因是鲍曼不动杆菌多重耐药的主要原因。

替加环素对4种耐药菌体外抗菌活性及其药效学评价

目的测定替加环素对4种耐药菌的体外抗菌作用并对其药效学进行评价。方法采用微量肉汤稀释法测定替加环素对453株耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌,421株泛耐药鲍曼不动杆菌,124株耐万古霉素的肠球菌以及235株产ESBLs的大肠埃希菌的最低抑菌浓度(MIC)。整理已发表的替加环素的药代动力学资料,设置AUC24/MIC>18对革兰阳性菌、AUC24/MIC>6.96对革兰阴性菌为替加环素的药效学目标,利用Crystal Ball软件模拟出5000例患者的目标获得概率并计算得出累积反应分数。结果替加环素对耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌、耐万古霉素的肠球菌、产ESBLs的大肠埃希菌的敏感率为100%,对泛耐药鲍曼不动杆菌的敏感率仅为54.5%。蒙特卡罗模拟结果显示,对于耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌、耐万古霉素的肠球菌、产ESBLs的大肠埃希菌,替加环素50mg剂量组的累积反应分数均达到90%以上。而替加环素50mg剂量组对泛耐药鲍曼不动杆菌的累积反应分数为13.34%,即使将药物剂量增加到100mg其累积反应分数也只有15.55%。结论除泛耐药的鲍曼不动杆菌外,替加环素对耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌、耐万古霉素的肠球菌、产ESBLs的大肠埃希菌有很好的抗菌活性,临床上应用替加环素治疗泛耐药鲍曼不动杆菌可能无法达到理想的治疗效果。

临床分离真菌的分布特点及其耐药性分析

目的了解本院临床真菌感染的种类和耐药性特点，为临床合理使用抗真菌药物提供依据。方法收集2012年1-8月临床分离出的真菌菌株，用沙保弱培养基对其培养、分离和纯化，科玛嘉显色培养基进行鉴定，ATBFungus3真菌药敏板条进行药敏试验。结果共分离出464株真菌，其中以白色念珠菌为主，占78．0％，其次是光滑念珠菌，占15．5％。分离的真菌对两性霉素B和5．氟胞嘧啶的敏感率较高，而对伊曲康唑和氟康唑的敏感率相对较低。结论检出的真菌对5种抗真菌药物已出现了不同程度的耐药性，因此，临床医生应根据药敏结果合理使用抗真菌药物，以提高临床治愈率。

金黄杆菌临床分离株β-内酰胺酶及耐药性分析

目的了解临床分离的金黄杆菌耐药特性和β-内酰胺酶产生情况。方法琼脂稀释法检测50株金黄杆菌对18种抗生素的MIC,改良的三纸片增效法和四槽、五槽三维试验法检测金黄杆菌金属β-内酰胺酶(MBL)、超广谱β-内酰胺酶(ES-BL)和AmpC酶。结果50株金黄杆菌对亚胺培南、美罗培南的耐药率为92%、88%,氨曲南为92%,阿米卡星和β-内酰胺抗生素的耐药率均大于40%,显示具有高度耐药性。加替沙星、左氧氟沙星和利福平的MIC90分别为4、8、8μg/ml,表现出很强的抗菌活性。环丙沙星、万古霉素、哌拉西林/他唑巴坦和头孢哌酮/舒巴坦也具有良好的抗菌活性。50株金黄杆菌MBL、ES-BL、AmpC酶产酶率分别为68.0%、26.0%、0.0%。脑膜败血性金黄杆菌中产MBL73.7%,同时产MBL和ESBL42.1%,单产ESBL5.3%。产吲哚金黄杆菌MBL产酶率80.0%。结论金黄杆菌具有高度的多重耐药现象和MBL、ESBL高检出率,应该合理使用抗生素,保护易感人群,准确、及时地做好病原学诊断和耐药性监测并给予正确的治疗。

临床分离志贺菌耐药性分析及1类整合子的检测

目的了解2007年至2010年安徽省临床分离志贺菌耐药性和1类整合酶基因(intⅠ1)、qacE△1-sul1基因及整合子携带的耐药基因盒的分布。方法琼脂稀释法检测21种抗菌药物对志贺菌的最低抑菌浓度。PCR扩增intⅠ1和qacE△1-sul1基因,对阳性菌株可变区基因盒序列进行分析。结果 137株志贺菌对萘啶酸、氨苄西林、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶的耐药率均80.0%以上,且多重耐药率达94.2%,但对三代头孢菌素和氟喹诺酮类耐药率在33.0%以下。intⅠ1的检出率为89.1%(122/137),检出dfrA17-aadA5和aar-3-aacA4两种基因盒,首次在志贺菌中检测到aar-3-aacA4基因,GenBank登录号JF271916。结论安徽省临床分离志贺菌多重耐药现象严重。临床仍可选用氟喹诺酮类和三代头孢菌素作为本地区细菌性痢疾的经验性治疗。1类整合子与志贺菌的耐药具有一定的相关性。

临床分离肺炎克雷伯菌耐药性监测

目的了解临床分离肺炎克雷伯菌的耐药性,为临床合理应用抗菌药物提供实验室依据。方法采用微量稀释法对392例临床分离肺炎克雷伯菌进行药物敏感性测定;超广谱β-内酰胺酶(Extendedspectrumbeta-lactamases,ESBLs)检测用微量稀释法初筛,纸片法做确证试验。结果肺炎克雷伯菌对18种抗菌药物的药敏结果中,耐药率大于30%的抗菌药物多达11种;其中氨苄西林-舒巴坦、氨苄西林、头孢噻吩、哌拉西林、复方新诺明和头孢唑啉的耐药率高达20%以上。耐药率低于10%的抗菌药物仅有4种,分别为头孢曲松(7.7%)、头孢噻肟(7.4%)、氨曲南(6.9%)和亚胺培南(3.1%)。其它抗菌药物的耐药率都高于10%。产ESBLs菌株的发生率为32.9%～45.8%,平均为39.8%;产ESBLs菌株对多种抗菌药物的耐药率显著高于非产ESBLs菌株(P<0.05)。结论临床分离肺炎克雷伯菌对多种抗菌药物的耐药率较高,尤其是产ESBLs菌株的高耐药率及多重耐药性更为明显。临床应加强对肺炎克雷伯菌耐药性的监测并预防耐药菌株的传播流行。

合肥市54株产CTX-M型ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性分析

目的了解合肥市产CTX-M型ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性。方法将我省细菌耐药性监控中心保留的54株产CTX-M型ESBLs的临床分离株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌与受体菌E.coliC600进行转移接合试验后,按照2004年NCCLS推荐标准,用琼脂稀释法分别测定野生株和转移接合子对14种不同抗菌药物的MIC,比较并分析两者的不同。结果24株大肠埃希菌和30株肺炎克雷伯菌分别有22株和30株接合成功,野生株的MIC结果显示对哌拉西林、头孢呋辛、头孢曲松钠的耐药率最高,达到100%,对亚胺培南全部敏感;转移接合子的耐药性较野生株有所下降,对氟喹诺酮类的敏感性明显增加。结论合肥市这些菌株所产生的CTX-M型ESBLs对头孢曲松钠和头孢噻肟钠具有超强水解能力,经转移接合试验后,接合子的水解能力有所下降,提示本地区产CTX-M型ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中存在着多种耐药机制。

变形杆菌对喹诺酮耐药机制研究进展

目前对喹诺酮或氟喹诺酮耐药的变形杆菌已经出现且在不断增加,这种耐药多归因于以下的机制:靶位改变、过度产生的多重耐药溢出泵和外膜孔道蛋白改变。但是,最近几年在一些肠杆菌科中新发现的由质粒产生的qnr(Qnr保护DNA旋转酶免受喹诺酮类药物的作用),也极有可能通过质粒水平传播而成为变形杆菌对喹诺酮耐药的又一机制。

枸橼酸杆菌耐药机制的研究

由于第三代头孢菌素在临床上广泛应用,在抗生素选择压力作用下,从临床标本中分离出枸橼酸杆菌的耐药菌株越来越多。枸橼酸杆菌主要对β-内酰胺类、氨基糖甙类、喹诺酮类、碳青霉烯类抗生素耐药。

临床分离弗劳地枸橼酸杆菌耐药性分析及质粒介导的AmpC酶基因检测

目的了解安徽地区临床分离弗劳地枸橼酸杆菌临床分布、耐药性及质粒介导AmpC酶(pAmpCs)基因的流行情况。方法收集2012~2017年安徽省细菌耐药监控中心监测网内的34所医院报送的临床分离的104株弗劳地枸橼酸杆菌,采用琼脂稀释法进行抗生素敏感性实验。提取细菌质粒,聚合酶链式反应(PCR)检测质粒介导AmpC酶基因,对阳性扩增产物进行测序分析;AmpC酶阳性菌株做转移接合试验,PCR扩增并测序确定接合子的基因型;测定供体菌、受体菌和接合子对多种抗生素的最低抑菌浓度(MIC)。结果104株弗劳地枸橼酸杆菌临床分布广泛,最多见于呼吸内科(30.77%)及重症监护病房(24.04%),标本来源以痰液、尿液最多。4株AmpC酶基因阳性的菌株中,有3株DHA-1基因阳性,1株ACT-1基因阳性。4株AmpC酶基因阳性的菌株有3株转移接合成功。这3株接合子与受体菌相比,对多种常用抗生素尤其是β-内酰胺类抗生素的MIC值提高了8~128倍。结论弗劳地枸橼酸杆菌临床分布广泛,耐药严重,携带有质粒介导的AmpC酶基因的菌株对多种β-内酰胺类抗生素耐药,并且可通过接合性质粒在不同菌属间播散。

痰标本中肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶基因的检测及耐药分析

目的分析痰标本中肺炎克雷伯菌的耐药特点及超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的发生率、基因分型。方法收集安徽省内34家医院痰标本中分离到的114株肺炎克雷伯菌,用琼脂稀释法检测其耐药性,标准纸片扩散法及PCR法检测ESBLs基因并初步分型。结果114株肺炎克雷菌中产ESBLs58株(50.9%),其中CTX-M-1型12株,CTX-M-9型15株,TEM型42株,SHV型49株,OXA-1型2株;产ES-BLs肺炎克雷伯菌的耐药率明显高于非产ESBLs菌株。结论痰标本中产ESBLs肺炎克雷伯菌检出率高,且呈多重耐药。

磷霉素耐药机制研究进展

磷霉素是1969年从链霉菌中分离得到的一种磷酸衍生物,具有独特的化学结构,含有一个环氧基和一个碳磷键。磷霉素是磷酸烯醇式丙酮酸的同功异质体,可与二磷酸尿嘧啶-乙酰葡糖胺转移酶(Mur A)共价结合,不可逆性地抑制Mur A活性,导致细菌细胞壁合成的第一步被阻断,引起细菌裂解死亡[1]。磷霉素是一种繁殖期快速杀菌药,对革兰阳性球菌(如金黄色葡萄球菌和粪肠球菌)和革兰阴性菌(如肠杆菌科细菌、

黏质沙雷菌中AmpC酶的检测及药敏率分析

目的了解安徽省临床分离的104株黏质沙雷菌中AmpC酶的产生情况及其对常用抗菌药物的耐药特征,以指导临床合理用药。方法采用头孢西丁纸片扩散法筛选疑产AmpC酶阳性菌株,并用酶粗提物进行三维试验确证产AmpC酶菌株。药敏试验采用琼脂稀释法,依据CLSI 2010年推荐的标准进行判读结果。结果 104株黏质沙雷菌在呼吸道痰标本中检出率最高,达59.6%;主要分布于呼吸内科、重症监护病房、老年病科等;头孢西丁纸片筛选法阳性率为39.4%,经三维试验确证产AmpC酶的有8株,阳性率为7.7%。产AmpC酶菌株除对亚胺培南、美罗培南全部敏感及对头孢吡肟、左氧氟沙星和加替沙星敏感率较高外,对其他大多数抗菌药物耐药率均高于非产酶株。结论产AmpC酶黏质沙雷菌对临床常用抗菌药物的耐药率均较高,对产酶株临床经验用药可选用碳青霉烯类、氟喹喏酮类及四代头孢菌素类抗菌药物。

安徽省临床分离的大肠埃希菌耐药性分析

大肠埃希菌是导致医院感染最常见和最重要的病原菌之一，其高耐药水平及逐年增多的产超广谱β-内酰胺酶（extendedspectrum β-lactamases，ESBLs）和产头孢菌素酶（AmpCβ-laetamase，AmpC酶）菌株给临床治疗带来了极大的困难。本研究对2005年安徽省各级医院分离的大肠埃希菌株耐药性进行分析，以阐明不同级别医院分离菌株对临床常用抗菌药物的耐药现状，指导临床合理选用抗菌药物。