石菖蒲提取物有效成分及对粉尘螨杀灭活性研究

目的 分析石菖蒲提取物对粉尘螨的杀灭活性,并对其有效成分进行分离鉴定。方法 以甲醇为溶剂,采用旋蒸法从石菖蒲根茎磨粉中获得冷浸提取物,再以石油醚进行萃取,再次旋蒸获得石菖蒲精油成分。将石菖蒲精油与吐温-80以1∶1比例混匀后用蒸馏水进行倍比稀释至1.000 00%、0.500 00%、0.250 00%、0.125 00%、0.062 50%和0.031 25%等6个浓度,同时将吐温-80用蒸馏水以同样比例稀释作为对照组。取200μL各浓度石菖蒲精油分别均匀滴加于有100只成螨的滤纸上,每一浓度重复实验3次,各浓度石菖蒲精油均设置1个对照组,于25℃,75%相对湿度培养箱内处理24 h后,计算螨虫校正死亡率平均值并进行统计分析。采用硅胶柱层析法分离精油成分,石菖蒲精油经正向柱中压制备,收集其中各个组分。运行条件:流动相为含10%乙酸乙酯的石油醚溶液和纯乙酸乙酯,检测波长为254 nm,色谱柱使用正向硅胶柱,柱温为室温。将分离纯化得到的石菖蒲精油各组分均稀释至1.000 00%浓度进行杀螨活性测定,舍弃杀螨活性低于100%的组分后,将保留组分稀释至上轮50%浓度后再进行多轮杀螨活性测定。将有杀螨效果的组分采用高效液相色谱、液相色谱-质谱联用仪和超导脉冲傅里叶变换核磁共振波谱仪进行质谱和核磁分析,通过计算机标准谱图库检索并与文献资料比较,确定活性单体化合物结构。结果 1.000 00%、0.500 00%、0.250 00%和0.125 00%浓度石菖蒲精油可将实验粉尘螨全部杀灭,校正死亡率均为100%。石菖蒲提取物有效浓度为0.062 50%时对粉尘螨的24 h致死率可达94.33%。采用硅胶柱层析法对其进行分离纯化,分离出A~F等6个组分,对分离出的不同成分进行杀螨活性对比,发现D、E组分杀螨效果良好,在0.500 00%浓度下均达到100%的杀螨率。质谱和核磁分析结果显示,D组分为异丁香酚甲醚、E组分为β-细辛脑。结论 石菖蒲精油提取物具有杀螨活性,其中异丁香酚甲醚对粉尘螨有显著杀灭活性。

人体蠕形螨体内细菌群落多样性分析

目的 分析人体蠕形螨体内细菌群落多样性,为探究蠕形螨在其所致传染病中的作用提供参考依据。方法2023年6—7月通过透明胶纸法采集芜湖市某高校大学生面部蠕形螨,通过Illumina PE250高通量测序平台扩增16S核糖体RNA(16S ribosomal RNA,16S r RNA)基因V4区以及核糖体DNA内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)基因,将测序结果根据重叠关系进行拼接、过滤得到有效序列,再进行操作分离单元(operational taxonomic units,OTU)聚类。对得到的OTU进行多样性指数分析,并在不同分类水平对细菌菌落结构进行统计分析。结果 16S r RNA测序获得57 483条有效序列,根据不同相似度水平对其进行OTU分类,得到159个OTUs;对其中97%相似水平的OTU进行分类学水平分析,发现人体蠕形螨体内细菌分属于14个门、20个纲、51个目、72个科、94个属。在门分类水平,变形菌门为优势菌门;在属分类水平上,弧菌属、慢生根瘤菌和贪噬菌属为优势菌属。ITS测序共获得56 362条有效序列及147个OTUs,分属于5个门、17个纲、34个目、68个科、93个属;注释到子囊菌门、担子菌门、壶菌属门和毛囊菌门等,子囊菌门为优势菌门,链格孢菌属、附球菌属、青霉菌属和帚枝霉属为优势菌属。结论 蠕形螨体内细菌群落组成具有较高多样性,同时微生物种类较多、物种丰度较高。