全反式维甲酸对实验性动脉粥样硬化兔动脉平滑肌细胞骨桥蛋白表达的影响

目的探讨全反式维甲酸(ATRA)对动脉粥样硬化(AS)模型兔动脉骨桥蛋白(OPN)表达的影响。方法复制AS兔模型,采用免疫组化和Western blot分析主动脉OPN的表达。结果成功建立AS兔模型,高脂组兔主动脉OPN蛋白表达水平增加,经ATRA治疗后OPN蛋白表达下降,AS斑块减少。结论ATRA可能通过降低动脉OPN的表达抑制AS的形成。

多重耐药鲍曼不动杆菌外排泵机制的初步研究

目的研究外排泵在多重耐药鲍曼不动杆菌中的存在情况,为进一步研究其耐药机制奠定基础。方法采用M-H琼脂稀释法,测定添加和不添加抑制剂苯丙氨酸-精氨酸-β-萘胺(PAβN)前后鲍曼不动杆菌对亚胺培南、美罗培南、庆大霉素、环丙沙星和头孢他啶5种药的最低抑菌浓度(MIC)。结果添加PAβN后,74株多重耐药鲍曼不动杆菌对5种药的MIC值下降4倍以上的菌株数分别为亚胺培南45(60.81%)株、美罗培南70(94.59%)株、庆大霉素0(0%)株、环丙沙星4(5.41%)株、头孢他啶45(60.81%)株。结论外排泵机制可能是引起鲍曼不动杆菌对亚胺培南、美罗培南、头孢他啶耐药的主要机制;外排泵机制对环丙沙星和庆大霉素耐药不起主要作用。

原子荧光光谱法测定兔肝脏组织中硒

硒是人体必需的微量元素,主要以含硒蛋白质的形式存在,包括酶类和非酶类两大类。已知的对哺乳动物有重要生理意义的硒酶有4类：谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）,磷脂氢过氧化物谷胱甘肽过氧化物酶（PHG-Px）,

高脂组和正常组兔肝脏组织中Zn,Fe,Cu,Mn,Cr,Pb和Cd含量测定和对比分析

讨论实验性动脉粥样硬化兔肝脏组织中Zn,Fe,Cu,Mn,Cr,Pb和Cd含量的变化。采用高脂饮食复制兔动脉粥样硬化模型,获取肝脏,用HNO3-H2O2混合液微波消解样品,采用原子吸收光谱法测定肝脏组织中Zn,Fe,Cu,Mn,Cr,Pb和Cd的含量。正常组肝脏组织Zn,Fe,Cu,Mn,Cr,Pb和Cd含量分别为137.6,362.3 14.39,9.599mg.kg-1和159.3,355.0,290.0μg.kg-1,高脂组肝脏组织Zn,Fe,Cu,Mn,Cr,Pb和Cd含量分别为86.09,277.1,11.07,5.366mg.kg-1和115.2,286.0,210.5μg.kg-1。高脂兔肝脏Zn,Fe,Cu,Mn,Cr,Pb和Cd含量降低,可能与食物摄取和脂蛋白代谢异常有关。

日本血吸虫亮氨酸氨基肽酶和果糖二磷酸醛缩酶重组疫苗对小鼠的保护性免疫效果观察

目的利用重组亮氨酸氨基肽酶(rSjLAP)和果糖二磷酸醛缩酶(rSjFBPA)辅以佐剂免疫BALB/c小鼠,观察基于2-DE和血清蛋白质组筛选的上述二种重组抗原的免疫保护效果;通过福氏佐剂和纳米C60佐剂在增强免疫效果方面的比较,探讨纳米C60佐剂在血吸虫分子疫苗接种中的价值。方法从重组质粒转化的E.coli中诱导表达rSjLAP和rSjFBPA,纯化并检测含量。将6周龄BALB/c小鼠随机分为7组,生理盐水对照组(A组)、rSjLAP+福氏佐剂组(B组)、rSjFBPA+福氏佐剂组(C组)、rSjLAP+rSjFBPA+福氏佐剂组(D组)、rSjLAP+纳米C60佐剂组(E组)、rSjFBPA+纳米C60佐剂组(F组)、rSjLAP+rSjFBPA+纳米C60佐剂组(G组),每组6只。除A组外,B～G组小鼠皮下多点注射rSjLAP或rSjFBPA100μg,共免疫3次,每次间隔2周。用尾蚴感染小鼠6周后,处死小鼠,收集成虫,计算减虫率;收集肝组织虫卵,计算减卵率。结果 B～G组的减虫率分别为:35.59%、33.05%、37.98%、38.99%、43.21%和45.75%,与A组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);B～G组的减卵率分别为:40.25%、42.57%、48.88%、41.64%、45.44%和46.88%,与A组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 BALB/c小鼠经rSjLAP和rSjFBPA辅以福氏佐剂或纳米C60佐剂免疫,获得了一定的免疫保护力;福氏佐剂和纳米C60佐剂均增强了重组疫苗的免疫效果,但两种佐剂的免疫增强效果差异无统计学意义。

ICP-AES分析高脂饮食兔肾脏组织的微量元素含量

目的探讨实验性动脉粥样硬化(AS)兔肾脏组织中铁、锰、铜、锌、硒、铅和镉元素含量的变化。方法采用高脂饮食复制兔AS模型,获取肾脏,用硝酸-过氧化氢混合液微波消解样本,用电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES)分析肾脏组织中铁、锰、铜、锌、硒、铅和镉的含量。结果正常对照组和高脂饮食组血清总胆固醇(TC)和肾脏组织中锌、铁、硒、镉含量差异均有统计学意义(P<0.05)。两组肾脏组织镉元素含量均明显高于饲料样本(P<0.05)。结论高脂饮食兔肾脏锰、铜、锌、硒元素含量降低可能与食物摄取和脂蛋白代谢异常有关。镉元素容易在肾脏中蓄积。

原子荧光光谱法测定维甲酸治疗组兔肝脏中硒含量

在生物体内,硒的生物效应是多方面的,其中最重要的是硒的抗氧化性,人们已发现多种疾病与体内活性氧特别是氧自由基有密切关系,如癌症、白内障、动脉硬化、胆色素类结石、克山病等,人的衰老也与活性氧有很大关系。

ML-7灌胃对动脉粥样硬化兔肾组织中微量元素含量的影响

目的探讨肌球蛋白轻链激酶(MLCK)抑制剂ML-7对动脉粥样硬化(AS)兔肾脏组织微量元素含量的影响。方法将40只新西兰雄性纯种大白兔随机分为3组,分别为ML-7治疗组(17只)、高脂饮食组(13只)、正常对照组(10只),ML-7治疗组给予高脂饲料喂养,第6周开始给予ML-7 5 mg/(kg·d)灌胃,共12周;高脂饮食组给予高脂饲料喂养12周;正常对照组给予基础饲料喂养12周。各组饲养12周时,麻醉后通过颈动脉取血。然后处死,立即取肾脏组织。检测颈动脉血TC水平,采用ICP-AES分析各组肾脏组织中Fe、Mn、Cu、Zn、Se含量。结果ML-7治疗组、高脂饮食组、正常对照组TC水平分别为(21.68±4.69)、(28.33±1.95)、(1.03±0.70)mmol/L,ML-7治疗组、高脂饮食组TC水平均高于正常对照组,ML-7治疗组低于高脂饮食组(P均<0.05)。与正常对照组比较,高脂饮食组Zn、Mn、Se含量下降,Fe含量升高(P均<0.05)。与高脂饮食组比较,ML-7治疗组Zn、Mn、Se含量升高,Fe含量下降(P均<0.05)。结论 ML-7能够降低AS兔血清TC水平并提高其肾组织Zn、Mn、Se含量。ML-7可能通过提高肾组织中Zn、Mn、Se含量发挥抗AS作用。

全反式维甲酸治疗动脉粥样硬化兔肝脏微量元素含量的变化

目的探讨实验性动脉粥样硬化兔肝脏组织中Zn、Fe、Cu、Mn和Cr、Pb、Cd含量的变化。方法用高脂饮食复制兔动脉粥样硬化模型,然后给予全反式维甲酸建立治疗组模型,获取肝脏,用硝酸、过氧化氢混合液微波消解样品,采用原子吸收光谱法测定肝脏组织中Zn、Fe、Cu、Mn和Cr、Pb、Cd的含量。结果高脂组肝脏组织Zn、Fe、Cu、Mn和Cr、Pb、Cd含量分别为86.09、277.1、11.07、5.366 mg/kg和115.2、286.0、210.5μg/kg,治疗组肝脏组织Zn、Fe、Cu、Mn和Cr、Pb、Cd含量分别为135.3、347.7、10.72、7.218 mg/kg和137.3、209.4、250.2μg/kg。结论经过维甲酸治疗后,Zn、Fe、Mn、Cr含量明显提高,基本达到正常组水平。

原子荧光光谱法测定褪黑素治疗组兔肝脏硒含量

为探讨褪黑素对实验性动脉粥样硬化兔肝脏组织中硒含量的影响,用高脂饮食复制兔动脉粥样硬化,然后给予褪黑素建立治疗组模型,获取肝脏,用硝酸、过氧化氢混合液微波消解样品,采用原子荧光光谱法测定肝脏组织中硒的含量。结果表明,正常组、高脂组和褪黑素治疗组硒在肝脏组织中质量分数分别为3.31、2.14和1.34 mg/kg。提示给予褪黑素治疗后,褪黑素治疗组的硒平均含量比高脂组的平均含量降低37.4%,所以褪黑素对肝脏硒的吸收具有明显的抑制作用。

肺动脉粥样硬化兔肺动脉壁骨桥蛋白表达的变化

目的探讨肺动脉粥样硬化模型兔肺动脉壁骨桥蛋白(OPN)表达的变化。方法 24只新西兰兔,随机平均分为正常对照组和高脂模型组,分别给予基础饲料和高脂饲料(基础饲料+1%胆固醇+5%猪油)喂养12周后取血和肺动脉,分析血清中相关脂质成分的变化;HE染色观察肺动脉壁的形态结构;免疫组化法和Western blot检测肺动脉粥样硬化兔肺动脉壁OPN的表达。结果成功建立肺动脉粥样硬化兔模型,高脂模型组在高脂饮食12周后,与正常对照组比较,血清中甘油三酯(TG)、胆固醇(CHO)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)有明显增加(P<0.05),其中以LDL和LDL/HDL比值升高最明显;HE染色显示高脂模型组肺动脉内膜增厚,细胞间隙逐渐增大,泡沫细胞形成,可见明显的动脉粥样硬化斑块;免疫组化法和Western blot显示高脂模型组肺动脉壁OPN的表达较正常对照组显著增强,差异有统计学意义(P<0.05)。结论高脂饮食可导致肺动脉粥样硬化形成,OPN在肺动脉粥样硬化斑块形成中起重要的作用。

大鼠表皮生长因子、睫状神经营养因子真核表达载体的构建及其体外表达的鉴定

背景:星形胶质细胞被激活后表现出神经干细胞的特性,细胞表面的神经营养因子(表皮生长因子、睫状神经营养因子)受体超表达,通过改善复杂的内环境,有利于定向诱导神经干细胞向神经元的分化。目的:构建大鼠pSecTag2/HygroB-EGF、pSecTag2/Hygro B-CNTF真核表达质粒,检测其在cos-7细胞中的共表达。方法:采用反转录-聚合酶链反应技术从大鼠颌下腺、坐骨神经组织总RNA中扩增出表皮生长因子、睫状神经营养因子基因功能区,将上述基因片段分别连接到真核表达载体pSecTag2/Hygro B,聚合酶链反应初步筛选、双酶切鉴定后送测序。将构建成功的两种重组载体单独及共转染cos-7细胞,Western blot法鉴定重组表皮生长因子、睫状神经营养因子蛋白的瞬时表达。结果与结论:反转录-聚合酶链反应结果证实成功获得大鼠表皮生长因子、睫状神经营养因子cDNA。DNA序列分析证实2种真核表达载体中的表皮生长因子、睫状神经营养因子序列与GenBank中目的序列一致。脂质体介导转染cos-7细胞48h后,Western blot鉴定重组表皮生长因子、睫状神经营养因子蛋白在cos-7细胞中的表达,分别在Mr6000,22000处出现阳性条带。提示大鼠表皮生长因子、睫状神经营养因子基因的真核表达载体pSecTag2/HygroB-EGF、pSecTag2/Hygro B-CNTF构建成功,共转染cos-7细胞后能够共表达重组表皮生长因子、睫状神经营养因子蛋白。

原子吸收光谱法测定瑞舒伐他汀治疗组兔肝脏中的微量元素

探讨实验性动脉粥样硬化兔肝脏组织中Zn、Fe、Cu、Mn、Cr、Pb和Cd含量的变化。高脂饮食复制兔动脉粥样硬化模型,然后给予瑞舒伐他汀建立治疗组模型,获取肝脏,用硝酸、过氧化氢混合液微波消解样品,采用原子吸收光谱法测定肝脏组织中Zn、Fe、Cu、Mn、Cr、Pb和Cd的含量。高脂组肝脏组织Zn、Fe、Cu、Mn和Cr、Pb、Cd含量分别为86.09、277.1、11.07、5.366mg/kg和115.2、286.0、210.5μg/kg,治疗组肝脏组织Zn、Fe、Cu、Mn和Cr、Pb、Cd含量分别为102.1、239.3、9.442、5.911mg/kg和85.52、288.1、216.3μg/kg。经过瑞舒伐他汀治疗后,Zn、Mn含量升高,Fe、Cu、Cr含量下降,Pb和Cd基本不变。