雏鸡体内新城疫病毒强毒的荧光定量RT-PCR检测

将新城疫病毒(NDV)强毒H2株经滴鼻感染和同居感染18日龄雏鸡,应用建立的荧光定量RT-PCR检测病毒在雏鸡体内各组织的动态分布。结果显示,滴鼻感染后第6 h,即可在肺、脑、脾、肾和肠5种组织中检出NDV RNA,而12 h后所有组织均能检测到;同居感染12 h后才可在肺、脑、脾和肾4种组织中检出,而24 h后所有组织均能检测到;在上述2种感染途径中,受检组织内的病毒含量从高到低依次为:肺、脑、脾、肾、肠、肝、心脏和腿肌。与普通RT-PCR相比,检测灵敏度相近。

不同切碎长度对玉米青贮发酵品质影响的研究

试验旨在利用全株玉米进行不同切碎长度青贮，通过发酵品质分析找出较为理想的青贮切碎长度，用于指导生产。

1株越南斗鸡新城疫病毒的分离和分子鉴定

从一起新城疫暴发的病例中分离出1株新城疫病毒（NDV），命名为贵州分离株（DQ）。用RT—PCR方法扩增了贵州分离株的整个F基因片段，并将其克隆到pMD18-T载体中。序列分析结果表明，上述分离株F基因长度为1662bp，编码553个氨基酸。该毒株与国内2株分离株（CH2000、TW2000）之间的亲缘关系较近，其核苷酸和氨基酸序列同源性分别为95．7％～96．6％和96．6%～96．8％；但与LaSota、B1及F48E9等常见毒株的核苷酸和氨基酸同源性仅为84．0％～86．5％和87．2％～89．9％。DQ分离株在F蛋白裂解位点的氨基酸顺序为^112R—R—Q_K—R—F^117，与NDV强毒株特征相符，且具有101处的K（赖氨酸）和121处V（缬氨酸）2个特征性氨基酸，与NDV基因Ⅶ型的特性完全相符。利用MegAlign软件绘制NDV的系统发育进化树，结果表明，该分离株为基因Ⅶd亚型。

SYBR GreenⅠ荧光RT-PCR方法快速鉴定新城疫病毒毒力

为快速鉴定不同新城疫病毒株（NDV）毒力，我们以NDVF蛋白裂解位点附近的基因序列自行设计1对引物，对不同毒力NDV毒株进行荧光RT—PCR扩增，根据其扩增效率及扩增产物熔解温度（Tm）值大小进行NDV毒株毒力的鉴定，建立了能区分NDV强弱毒株的SYBR GreenⅠ荧光RT—PCR方法；同时将其与鸡胚平均致死时间（MDT）测定和F蛋白裂解位点序列分析结果进行比较。结果发现：建立的SYBR GreenⅠ荧光RT—PCR方法只需4h即呵判定结果，NDV强弱毒株扩增产物Tm值为（83±0．5）℃且有2个峰值，阴性对照Tm值为（81±0．5）℃且只有1个峰值；对NDV强毒株的扩增效率即Ct值在11-20之间，NDV弱毒株Ct值在25～30之间，阴性对照Ct值在30以上，Ct值在20～25之问为强弱毒株混合物。该方法检测结果与MDT测定和F蛋白裂解位点分析结果一致。应用SYBRGreenI模式荧光RT—PCR方法与普通RT—PCR方法和鸡胚接种鉴定方法分别对80份临床组织样品进行检测，强毒株的检出率均为53．75％（43／80），而弱毒株的检出率相应为31．25％（25／80）、27．50％（22／80）和35．00％（28／80），检出符合率达89．3％以上。这些结果表明建立的SYBR GreenⅠ荧光RT—PCR方法具有特异、准确、快速等特点，可用于临床病料样本NDV毒株的毒力鉴定。

斗鸡新城疫病毒DQ株融合蛋白基因序列分析

从越南斗鸡暴发的病例中分离出1株新城疫病毒（NDV），命名为贵州分离株（DQ）。采用RT—PCR方法扩增分离株（DQ）的整个F基因片段，并将其克隆到pMD-18T载体中。序列分析结果表明，DQ株F基因分子长为1662bp，编码553个氨基酸。该毒株与国内2株分离株（CH2000、TW2000）之间的亲缘关系较近，其核苷酸和氨基酸序列同源性分别为95．7％-96．6％和96．6％-96．8％；但与LaSota、B1及1748E9等常见毒株的核苷酸和氨基酸同源性仅为84．0％-86．5％和87．2％-89．9％。DQ分离株在F蛋白裂解住点的氨基酸顺序为^112R—R—Q—K—R—F^117，与NDV强毒株特征相符，且具有101处的K（赖氨酸）和121处V（缬氨酸）2个特征性氨基酸，与NDV基因Ⅶ型的特性完全相符。利用MegAlign软件绘制NDV的系统发育进化树表明该分离株为基因Ⅶd亚型。

三种饲用灌木形态特征指标与单株产量回归分析

为了在不破坏石漠化草场脆弱植被的情况下定株连续观测灌木产量,试验对杭子梢[Campylotropis macrocarpa(Bunge)Rehd]、多花木兰(Indigofera amblyatha Craib)和白刺花(Sophcra viciifolia Benth)3种灌木形态特征指标进行了测定,并进行了灌木产量之间的相关性分析,建立各种灌木形态特征指标与灌木产量之间回归模型的方法。结果表明:灌木等级间株高和平均冠幅直径均存在显著差异(P<0.05);灌木等级(x1)、株高(x2)和平均冠幅直径(x3)与产量(y)呈极显著相关(P<0.01),回归模型:杭子梢y=-1 091.314+155.862x1+5.223x2+5.764x3;多花木兰y=-61.624-17.387x1+1.321x2+2.969x3;白刺花y=-172.292+5.491x1+1.024x2+3.588x3。说明通过测量灌木等级、株高和平均冠幅直径就能准确估测灌木单株鲜草产量。

草-烟轮作高效栽培技术试验初报

为解决贵州山区烤烟地水土流失和农民增收,实现关键技术突破,采用贵州当前推广的优良牧草品种,试验研究了草-烟两熟轮作和草-烟+草一年三熟轮作两种栽培模式的异同。结果表明:草-烟轮作后烤烟单价提高了0.53元/kg;草-烟两熟轮作模式比草-烟+草一年三熟轮作模式纯收入高出10794.54元/hm2,达18709.57元/hm2,投产比达1∶2.58,经济效益显著,远高于当地烟农14263.86元/hm2的纯收入;草-烟轮作对土壤肥力的影响不大。选择优良牧草品种,合理施肥,进行草-烟轮作,可改进山区农作物传统的耕作制度,提高土地利用率,减轻烤烟病虫害,涵养水源,促进畜牧产业和农村经济的发展,具有良好的经济、生态和社会效益。

牛瘤胃臌气的诊疗及病性分类的探讨

1 病性分类牛瘤胃臌气又叫气胀,一般把该病按病程分为急性和慢性瘤胃臌气;按病的起因,分为原发和继发性臌气;按病的性质,分为泡沫性臌气和非泡沫性臌气.在临床诊疗中我认为按病性只把瘤胃臌气分为两种,似不完整,还有相当病例两种臌气在同一患畜兼有发生的双重性瘤胃膨气.应结合诊疗效果才好.

草鱼养殖技术

为了更好地促进养殖效益的提升,在草鱼养殖过程中,要切实注重对其养殖技术要点的掌握。基于此,就草鱼养殖技术进行详细介绍,为养殖者提供技术支持,以助于提高养殖者的经济收益。

犬子宫切除手术病例

安顺市韩某的狼种犬1只,2岁,从1988年11月起,该犬发生不明原因的子宫全脱,子宫体严重水肿,出血较多。到地区兽医院进行整复手术,但1个月以后又发生全脱,再到该院进行第2次子宫整复手术,并用缝合线在阴唇口的四周作袋状缝合加以固定。

仔猪饲养管理技术措施

仔猪的饲养管理可分为:哺乳和断奶仔猪的饲养管理.搞好仔猪饲养管理的目的,一是使仔猪成活率高;二是哺乳仔猪生长速度快,个体小,对外界不良因素的抵抗力差.据统计,哺乳期死亡的仔猪中85%是在产后30日龄内死亡的,而产后一周内死亡的约占其中的60%,因此,要加强护理,尤其是仔猪出生后第一周.

对进一步加快农村牛改步伐的意见和建议

为进一步落实省委、省政府关于把我省建设成为以商品牛羊为重点的畜牧养殖大省的决定,按照"统一规划,政府扶持;社会实施,多方筹资;依靠科技,市场运作;超常发展,形成规模;因地制宜,突出特色"的原则,对加快肉牛产业化建设中最基础性的牛改冻配工作提出几点意见与建议,以供参考和探讨.

播下希望的种子

2014年2月，我跟随着驻村队伍来到安顺西秀区双堡镇山京村：驻村以来，我带领山京村驻村工作组，四处奔走、多方协调，为山京村同步小康播种下一份份希望的种子。

仔猪早期断奶的饲养管理技术

仔猪早期断奶是现代养猪生产中挖掘母猪生产潜能,提高养猪经济效益的有效措施。但是仔猪断奶后生长速度加快,对饲养管理要求比较高。因此,在整个哺乳和保育期均要实行配套管理技术。

肉鸡维生素E缺乏症的诊治

2002年3月,安顺市某养殖场饲养的闽中麻肉鸡场发生了一次疾病,临床表现为发病突然、传播迅速、伸颈腿僵、就地转圈等症状,病理变化以腿肌条纹状出血及十二指肠粘膜、肝脾表面出血为特征,发病期死亡250只,死亡率为8.1％。通过流行病学、临床症状、病理剖检变化、实验室检验及临床治疗性诊断,确诊为维生素E缺乏症。现将诊断过程报告如下。