油樟内生真菌多样性与对植物病原菌的抑菌活性

从油樟(Cinnamomum longepaniculatum)根、茎、叶分离出104株内生真菌,形态学鉴定表明,其中100株分属于2个纲、4个目、8个科、23个属,4株不能确定其分类地位。其中,组丝核菌属(Phacodium Pers.)、痂圆孢属(Sphacelomade Bary)、简梗孢霉属(Chromo sporium Corda)为优势属。通过检测发现,104株内生真菌中有33株对8种植物病原真菌中至少1种具有不同程度的抑制效果。

油樟内生细菌的多样性及抑制植物病原菌初步研究

从油樟(Cinnamomum longepaniculatum)根茎叶中分离得到203株内生细菌,通过形态观察选出形态特征不完全相同的68株内生细菌(根56株、叶9株、茎3株),初步显示油樟中内生细菌具有多样性和器官特异性的特点。通过平板拮抗的方法,对选择出的68株内生细菌进行抑制植物病原真菌试验。68株内生细菌中有17株(全部分离自根部)对辣椒疫霉菌(Phytophthora capsici)、胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)、禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)、大斑凸脐蠕孢菌(Exserohilum turcicum)等4种植物病原真菌中的至少1种有抑制作用。这些内生细菌对辣椒疫霉菌的抑制效果最好,对胶孢炭疽菌的抑制效果最差。

α-松油醇对大肠杆菌的抑菌作用及其机理研究

为探究α-松油醇的抑菌作用及其抑菌机理,采用肉汤培养基倍比稀释和沙氏琼脂平板稀释培养计数法测定α-松油醇对大肠杆菌标准菌的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)和最小杀菌浓度(mini-mum bactericidal concentration,MBC);通过细胞壁和细胞膜通透性变化试验、核酸合成抑制试验、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳试验和内毒素活性抑制试验研究α-松油醇的抑菌机理。结果显示:α-松油醇对大肠杆菌有明显的抑制效果,MIC和MBC均为0.78μL.mL-1。α-松油醇可引起大肠杆菌胞外碱性磷酸酶和β-半乳糖苷酶活性明显增强;大肠杆菌DNA荧光强度明显减弱、可溶性蛋白谱带变浅。当α-松油醇浓度在2MIC以上时,内毒素分解率超过50%,家兔不呈现典型的热原反应。α-松油醇的抑菌机理是通过细菌细胞壁和细胞膜通透性的变化,抑制细菌核酸的合成和可溶性蛋白的表达以及药物与内毒素的拮抗作用实现的。

Antifungal Activity of Extracts from Clerodendrum Bungei Leaves against Two Species of Phytopathogens

The test was undertaken to reveal the antifungal activity of extracts from Clerodendrum bungei leaves against Pestalotia and Rhizoctonia solani, the results showed that optimal condition for best antifungal activity of extracts against pestalotia and Rhizoctonia solani are as follows： material-liquid ratio of 1：6,75% ethanol as extracting solvent, reflux at 90℃ for 1.5 h. The substances with good dissolubility in ethanol and water solution such as organic acid, bioflavonoid and alkaloid are main antifungal bioactive substances in Clerodendrun bungei.

油樟油主成分对几种常见病原菌的抑菌活性研究

【目的】为了测定油樟油中1,8-桉叶油素(99.5%)、松油烯-4-醇(99%)和γ-松油烯(99%)主成分的抑菌效果。【方法】采用二倍释法测定其对几种常见病原菌沙门氏菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)和最低杀菌浓度(minimal bactericidal concentration,MBC),利用沙氏琼脂平板稀释培养法绘制其抑菌曲线。【结果】发现松油烯-4-醇对3种试验菌的抑菌效果最明显,其次是1,8-桉叶油素,γ-松油烯仅对沙门氏菌有较好的抑菌活性,对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌抗菌活性较差。【结论】3种油樟油单体的杀菌效果均呈现时间-浓度依赖型。

石榴果酒发酵工艺的研究

以成熟石榴汁为原料,对石榴果酒发酵工艺进行研究。确定石榴酒发酵工艺为:pH4.0、糖度为16,加入6 g/L果胶酶、0.20 g/L葡萄酒酵母,在24℃条件下前发酵4 d后,分2次添加葡萄糖,在18℃后发酵20 d,使其最终酒度在12%vol左右。将发酵醪陈酿、澄清、包装、灭菌后得到酒体醇厚、酸涩适中的深红色澄清石榴果酒。

三种方法制备的岩桂叶精油(浸膏)的分析

分别采用水蒸气蒸馏、乙醚浸提、超临界CO2萃取从岩桂叶中提取得含黄樟油素的精油(浸膏),产品得率分别为2.09%、3.14%和3.75%,通过气相色谱法测得其黄樟油素GC含量依次为94.9%、36.1%和15.9%。采用气相色谱-质谱联用法对气相色谱法进行了确证,测得水蒸气蒸馏法制备的精油中分子质量在30～550 u范围的物质,除黄樟油素外,还含有α-柠檬烯、芳樟醇、2-甲基-3-(2-丙烯基)苯酚。实验结果表明,水蒸气蒸馏法是制备岩桂叶精油的最好方法。

苦丁茶叶中生物类黄酮及芦丁含量的测定

通过分光光度法测得紫茎女贞芽叶、老叶、粗壮女贞芽叶、老叶生物类黄酮含量分别为:(2.67±0.23)%、(2.08±0.21)%、(3.15±0.18)%、(2.78±0.22)%。采用高效液相色谱法测得2种川产苦丁茶芦丁含量分别为:紫茎女贞芽叶、老叶分别为(0.118±0.011)%,(0.083±0.012)%,粗壮女贞芽叶、老叶(0.082±0.012)%(,0.065±0.008)%。2种川产苦丁茶中生物类黄酮含量丰富,可作为提取生物类黄酮的原料;芦丁含量很低,仅为生物类黄酮的2.3%～4.4%。

1,8-桉叶油素亚慢性中毒对小鼠血液生化指标的影响

【目的】研究1,8-桉叶油素亚慢性中毒对小鼠体质量、血常规及血液生化指标的影响。【方法】将160只体质量15~17g的小鼠随机分为4组,每组40只,分别灌胃剂量为192.45,64.15,21.38mg/kg的1,8-桉叶油素和体积分数0.5%吐温-80水溶液（对照组）,每组按10g体质量0.2mL给药,1次/d,连续灌胃染毒90d,分别于给药第30,60,90天和停药后30d测定小鼠体质量、血常规和血液生化指标。【结果】与对照组相比,64.15和21.38mg/kg 1,8-桉叶油素在试验期间对小鼠的体质量、血常规及血液生化指标的影响均无统计学差异（P〉0.05）;192.45mg/kg 1,8-桉叶油素在灌胃60和90d时,对小鼠的血常规和血液生化指标有不同程度的影响,多数指标与对照组差异显著（P〈0.05）;停药后30d,1,8-桉叶油素各剂量组的血常规和血液生化指标与对照组差异不显著（P〉0.05）。【结论】1,8-桉叶油素对小鼠有亚慢性毒性作用,其有害作用剂量（NOAEL）为64.15mg/kg,损害作用最低剂量（LOAEL）为192.45mg/kg;1,8-桉叶油素对小鼠血液生化指标的影响在短期内是可逆的。

桑叶挂面的研制

桑叶是食药两用物品,富含18种氨基酸、矿物质及黄酮类物质。新鲜桑叶经处理后制成桑叶糊包络化合物,加入到面粉中制得营养丰富的绿色挂面制品。实验结果表明:桑叶糊包络化合物制备工艺条件为:环糊精量10%,包埋时间3d,桑叶浆量25%;桑叶挂面的最佳工艺配方为:海藻酸钠量0.3%,桑叶糊添加量25%,食盐用量2.5%。

油樟悬浮培养及次生代谢产物的诱导

以油樟(Cinnamomum longepaniculatum)叶片为外植体在附加6-BA和NAA不同激素浓度组合的MS培养基上筛选质地疏松、生长旺盛的愈伤组织,分别接种在MS、B5、WPM三种液体培养基中进行细胞悬浮培养,并检测诱导产生的次生代谢产物。结果表明:2mg.L-16-BA+0.5mg.L-1NAA能诱导质地疏松、生长旺盛的愈伤组织,B5基本培养基中细胞长势最好;愈伤组织在B5+2mg.L-16-BA+0.5mg.L-1NAA中悬浮培养,继代2次后形成均一的单细胞;从油樟悬浮培养物中检测出50%以上的成分是苯甲醇。

17种杀菌剂对五味子叶枯病菌的毒力测定

选用17种低毒杀菌剂对五味子叶枯病菌进行了室内毒力测定。结果表明,50%腐霉利WP对五味子叶枯病菌菌丝生长的抑制效果最好,EC50值为0.510 1 mg·L-1;80%代森锰锌WP对五味子叶枯病菌孢子萌发的抑制效果最好,EC50值为0.020 5 mg·L-1。

血橙果酒生产工艺研究

通过研究,确定血橙果酒的生产工艺,为:血橙去皮榨汁后加入0.2g/L葡萄酒活性干酵母,在24℃发酵5～7d,糖度降至4%～6%;用4层纱布过滤发酵醪,继续发酵10～14d后在5～10℃陈酿30d;加入0.06%壳聚糖,吸附悬浮物72h,膜过滤、包装、灭菌得血橙果酒。血橙果酒为透明的红色、酸度适中、酒体醇厚、香气怡人,总糖(以葡萄糖计)含量48±6.5g/L,pH4.0±0.52,总酸(以酒石酸计)6±2g/L。

苦竹叶黄酮浸膏制备工艺研究

以四川省宜宾产苦竹叶为原料,对苦竹叶黄酮的提取工艺进行了研究,确定其提取工艺条件为:以80%的乙醇为提取溶剂,料液比为1∶30,在95℃条件下浸提120 min.将提取液真空浓缩、真空冷冻干燥后制得生物类黄酮含量为30.22%的苦竹叶黄酮浸膏.苦竹叶黄酮浸膏可作为天然添加剂广泛地应用于食品、药品及化妆品生产,具有很好的应用前景.

仙茅地下茎段组织培养研究

[目的]为仙茅的快速繁殖提供借鉴和依据。[方法]以仙茅无菌地下茎段为外植体,在蔗糖浓度为20 g/L,琼脂用量为6.5 g/L,pH值为5.8,温度为25℃的光照条件下,设3组培养基（A愈伤组织诱导培养基MS＋6-BA 0-1.0 mg/L＋NAA 0-1.0 mg/L,B丛生芽诱导培养基MS＋6-BA 0.5-1.5 mg/L＋NAA 0.2-0.8 mg/L,C生根培养基MS＋IAA 0-0.5 mg/L）进行组培试验。[结果]最适合仙茅的愈伤组织诱导培养基为MS＋6-BA 0.2-1.0 mg/L＋NAA 0.1-0.6 mg/L;丛生芽分化培养基为MS＋6-BA 0.8-1.5 mg/L＋NAA0.2-0.5 mg/L;生根培养基为MS＋IAA 0.1-0.3 mg/L。仙茅的愈伤组织诱导率为88%-93%,丛生芽诱导率为93%-96%,生根诱导率为92%-96%。[结论]该研究为仙茅地下茎段的组织培养提供了试验参考和理论依据。

不同因素对油樟愈伤组织生长的影响

[目的]筛选油樟组培条件。[方法]以油樟带芽茎段为外植体,通过愈伤组织诱导率、污染率、褐变等指标研究无机盐、光照、抗生素等因素对愈伤组织生长影响。[结果]愈伤组织在2种培养基上均能明显增殖,且MS的培养效果好于1/2MS。由带芽茎段诱导的新生愈伤组织略带绿色。继代培养后,黑暗中诱导和培养的愈伤组织为淡黄色或白色,光照下培养的愈伤组织为褐色。愈伤组织诱导率和外植体污染率都随抗生素浓度的增加而降低,25～50mg/L的链霉素处理出愈率最高(60%～72%),污染率最低(0～15%),死亡率也最低(0)。在相同浓度下,使用链霉素外植体死亡率最低。[结论]MS培养基+25～50mg/L链霉素是油樟组培的最佳条件。

油樟油抑制细菌生长的活性试验

为检测抑菌效果,对6种细菌的最低抑菌浓度(MIC)、最低杀菌浓度(MBC)和生长量进行了测定。实验结果表明,油樟油的MIC在12.5～3.13μL/mL,MBC在25～3.13μL/mL,生长量在72h内细菌生长仍受到抑制。抑制大肠杆菌效果最强,抑制金黄色葡萄球菌效果最弱。

酶法制备葛渣水不溶性膳食纤维的研究

以加工淀粉后的葛根残渣(葛渣)为原料,用α-淀粉酶、糖化酶和蛋白酶进行水不溶性膳食纤维的制备,同时测量膳食纤维的膨胀力.在单因素试验基础上,通过响应面分析得到酶法制备膳食纤维的最佳工艺条件:以5g葛渣为原料,α-淀粉酶与糖化酶总用量75U,α-淀粉酶与糖化酶用量比例1∶8.5,60℃下酶解90min,中性蛋白酶75U,45℃下酶解60min,该条件下水不溶性膳食纤维得率为52.33%,膳食纤维膨胀力5.76mL/g.

1,8-桉叶油素对小鼠的经口急性毒性和蓄积毒性的研究

采用改良寇氏法测试了1，8-桉叶油素对小鼠的急性毒性，并采用固定剂量蓄积毒性系数法测试了其蓄积毒性。结果表明，1，8一桉叶油素对小鼠经口半数致死剂量（LD5。）为3847．34mg／kg．bw，95％置信限为3352．80—4414．82mg／kg．bw，急性中毒主要靶器官为肝脏和肾脏；小鼠蓄积性毒性实验所得蓄积系数K〉5，与对照组相比，1，8一桉叶油素对小鼠饲料利用率与脏器系数无明显影响（P〉0．05），对脏器无明显不良影响。可见1，8-桉叶油素对小鼠属于低毒化学物质，无明显蓄积毒性。

大花蕙兰原球茎一步成苗快速繁殖研究

[目的]筛选适宜原球茎一步成苗的培养基,探讨原球茎试管苗的快繁移栽技术。[方法]以大花蕙兰(Cymbidium grandiflorum)幼嫩芽为外植体进行组织培养研究。以MS为基本培养基附加不同的激素,分别设计5种配方的原球茎诱导培养基和3种配方的原球茎一步成苗培养基,原球茎一步成苗的最适培养基。用农用链霉素稀释2500～3500倍对原球茎试管进行消毒后,栽入不同的基质,研究原球茎试管苗的移栽技术。[结果]大花惠兰在MS+6!BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L配方培养基上诱导原球茎效果最好。试管苗的快繁以MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L的培养基为最适,21d后原球茎大量增殖和分化,诱导出丛生芽并生根。在腐殖土中适当使用农用链霉素有利于练苗成功。[结论]该试验探究出原球茎从增殖,诱导分化到生根只用一种培养基,大大缩短生产周期,但其生根率只有75%,需做进一步研究。