抗人SIRPα抗体制备及抗肿瘤活性研究

目的:制备抗人信号调节蛋白α(signal regulatory protein alpha,SIRPα)抗体并进行抗肿瘤活性评价。方法:通过杂交瘤技术获得高亲和力鼠抗人SIRPα抗体。采用高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)和毛细管凝胶电泳检测抗体纯度;采用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)及荧光激活细胞分选法(fluorescence activated cell sorting,FACS)检测抗体抗原结合活性及抗体依赖性细胞介导的吞噬(antibody-dependent cell-mediated phagocytosis,ADCP)活性;采用生物干涉膜技术(bio-layer interferometry,BLI)检测嵌合抗体与人SIRPα结合动力学;利用转基因Balb/c小鼠皮下移植CT26-hCD47/hPD-L1肿瘤细胞的模型进行候选抗体药效学评价。结果:制备出纯度高于90%的3种抗体14C4、59G5及4C10。3种抗体都能特异性地与人源不同水平的多基因型SIRPα结合,同时能协同增强Rituximab或IMM40H(CD70抗体)的ADCP活性。体内药效实验显示,抗体14C4与PD-L1抗体联合用药具有显著抑制实体瘤生长的效果。结论:该研究获得了具有高亲和力和特异性结合不同SIRPα并阻断CD47/SIRPα结合的3株抗肿瘤候选抗体。