姜黄素对活化肝星状细胞内脂质水平的影响及其机制

目的探讨姜黄素对活化肝星状细胞内脂质水平的影响及其可能机制。方法向C57/B6小鼠门静脉灌注链霉蛋白酶和胶原酶,采用梯度离心法分离小鼠肝星状细胞,以不同浓度(5、10、20μmol/L)姜黄素干预肝活化星状细胞和肝AML12细胞24h。油红O染色观察细胞内脂滴数量的变化; ELISA法检测细胞内甘油三酯(TG)和游离脂肪酸(FFA)含量;RT-qPCR和Western blotting检测细胞内脂肪酸合成酶(FAS)、固醇调控元件结合蛋白(SREBP-1c)、脂肪甘油三酯脂肪酶(ATGL)和自水解酶域包含蛋白5(abhd5)等脂质代谢相关基因的mRNA及蛋白表达。结果细胞油红O染色后,镜下可见暗红色脂滴数量随姜黄素浓度的增加而逐渐增多且呈剂量依赖性,但姜黄素对小鼠AML12肝细胞内脂滴水平无影响。采用5、10、20μmol/L姜黄素干预小鼠肝星状细胞,细胞内TG含量[分别为(1.495±0.230)nmol/mgprotein、(3.758±0.717)nmol/mgprotein、(4.490±0.360)nmol/mgprotein]与对照组[(1.176±0.343)nmol/mg protein]比较明显升高(P<0.01);FFA含量[分别为(57.250±1.463)nmol/mgprotein、(78.425±1.030)nmol/mgprotein、(111.150±2.350)nmol/mgprotein]与对照组[(28.750±2.433)nmol/mgprotein]比较亦明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)。此外,姜黄素明显上调了与脂质合成相关的FAS和SREBP-1c基因的mRNA和蛋白表达,下调了与脂质分解相关的ATGL和mRNA及蛋白表达(P<0.05),但对abhd5 mRNA和蛋白的表达无明显影响(P>0.05)。结论姜黄素能够调节肝星状细胞脂质代谢相关基因的表达,恢复活化肝星状细胞的脂滴水平,进而抑制肝星状细胞的活化进程。

siRNA干扰血管生成素2基因表达抑制小鼠肝癌移植瘤生长

目的探讨siRNA干扰血管生成素2(Ang-2)基因表达对小鼠肝癌移植瘤生长的抑制作用。方法分别以转染pLVX-shRNA-Ang-2、pLVX-Ang-2的人肝癌HepG2细胞及未转染的HepG2细胞为来源,建立裸鼠皮下移植瘤模型。实验分3组:pLVX-shRNA-Ang-2组、pLVX-Ang-2组和对照组,每组10只。观察并测量瘤体体积,各组肿瘤组织分别行苏木精-伊红染色及透射电子显微镜下观察,对比病理改变。分别采用Real-time PCR和Western blot检测肿瘤组织中Ang-2基因和蛋白表达,采用免疫荧光染色检测CD34表达。结果与pLVX-Ang-2组和对照组比较,pLVXshRNA-Ang-2组瘤体体积小,组织坏死不明显,肿瘤细胞超微结构基本正常,Ang-2基因及蛋白表达明显下降(均P<0.05),CD34表达明显下降。结论采用siRNA干扰技术敲除Ang-2基因,能够减少肝癌组织新生血管的生成,抑制肿瘤的生长。

泌尿生殖道感染者支原体检测及耐药性分析

目的 调查支原体耐药情况 ,为临床选择药物提供依据。方法 男性取前列腺液 ,女性取宫颈分泌物进行支原体培养和药物敏感试验。结果 2 32例患者支原体培养阳性 89例 ( 38.4% ) ,以解脲支原体 (Uu)为主 ,占 76 .4% ( 6 8/89) ;支原体多重耐药现象严重 ,在测定的 10种抗生素中 ,2种以上抗生素同时耐药者达 75 .3% ( 6 7/89)。结论 对泌尿生殖道感染者应同时进行Uu和Mh支原体检测及药敏试验。

梅毒患者血清IL-4、IL-12的检测及其意义

目的:探讨梅毒患者血清IL-4I、L-12水平的变化及其意义。方法:采用ELLSA法检测32例一期、19例二期梅毒患者和23例对照组血清IL-4I、L-12含量。结果:一期梅毒组和二期梅毒组血清IL-4含量均高于对照组(t=4.352,P<0.01;t=4.334,P<0.01),一期梅毒组和二期梅毒组血清IL-4含量差异无显著性(t=1.692,P>0.05);一期梅毒组血清IL-12含量明显高于二期梅毒组和对照组(t=15.039,P<0.01;t=6.015,P<0.01),二期梅毒组血清IL-12含量明显低于对照组(t=12.076,P<0.01)。结论:体液免疫清除梅毒螺旋体的作用有限;宿主感染梅毒螺旋体后,随着病程由一期向二期进展,其细胞免疫功能受到一定抑制。