江苏省宝应县异育银鲫鳃疱疹病毒病流行病学调查和研究

自2008年以来,宝应县养殖的异育银鲫发生不同类型和不同程度的疱疹病毒病害,其中2011-2013年发病点明显增多、连片发病面积不断扩大,死亡率急剧升高、经济损失惨重,病害发生形势不容乐观,因此我们对2008-2013年病害开展了流行病学调查和研究,现将结果总结如下。

异育银鲫病毒性鳃出血病预防与控制技术

异育银鲫病毒性鳃出血（俗称“大红鳃“）是近年来严重威胁异育银鲫养殖业发展的重大病害．面对日趋严重的病害及广大养殖户对该病防控技术的需求．本文在该病病原学研究基础上．结合近四年的流行病学调查．提出一系列预防与控制技术．供养殖生产参考。

异育银鲫病毒性鳃出血病预防与控制技术

异育银鲫病毒性鳃出血是近年来严重威胁异育银鲫养殖业发展的重大病害,自从2012年春季在江苏暴发以来,已经造成鲫鱼养殖重大病害损失,研究已经证明,引起该病的主要病原为鲤科疱疹病毒Ⅱ型（Cy HV-2）,由于是新发现的病毒性病害,目前尚未筛选出有效的治疗药物,有针对性的疫苗也尚未面世。面对日趋严重的病害及广大养殖户对该病防控技术的需求,笔者在该病病原学研究基础上,并结合近4年的流行病学调查，提出如下预防与控制技术，供养殖生产者参考。

河蟹颤抖病综合预防与控制关键技术

颤抖病是对河蟹养殖危害最大的流行病，经过多年的系列研究，业已证实螺原体是引发河蟹颤抖病的主要病原之一，螺原体性颤抖病是河蟹颤抖病的主要类型。我们通过多年研究已经建立起了螺原体性颤抖病快速检测、预防和治疗技术，并对已建立起来的各项技术进行集成应用，在生产上对颤抖病采取综合预防与控制，取得了良好的效果。现将螺原体性颤抖病综合预防与控制体系总结如下，以期为河蟹养殖业健康发展提供保障。

江苏省中华绒螯蟹螺原体疫病的检测和普查

2008—2009年就江苏省范围内的中华绒螯蟹螺原体疫病进行了普查及跟踪检测,结果显示螺原体疫病在全省普遍存在,尤其是苏南的水产养殖重点县(市、区),螺原体疫病连年暴发,普查的60个县(市、区)中,阳性率达22%,随后的跟踪检测阳性率更高,达67%,必须引起高度重视。

异育银鲫鳃出血病流行病学调查和研究

2011—2013年,江苏省局部地区发生新型异育银鲫鳃出血病,给养殖业造成较大经济损失。为查明病因,了解发病历史、发病季节、发病症状及危害对象,通过在江苏省宝应县开展水产流行病学调查,结合组织病理学、回归感染试验、分子生物学诊断等研究方法,证实异育银鲫鳃出血病病原为鲤科疱疹病毒-Ⅱ型,由于该病害会导致异育银鲫养殖重大损失,因此需要引起国内相关养殖业主、科研工作者更多关注。

中华绒螯蟹颤抖病药物治疗的初步研究

用水产常用清塘剂、杀菌驱虫药、消毒剂、中草药及自配药物克螺威1号(SI-1)对中华绒螯蟹颤抖病病原螺原体进行体外药敏试验。结果表明,螺原体对生石灰、茶籽饼、敌杀死、硫酸铜、硫酸锌、次氯酸钙、三氯异氰脲酸、二氧化氯、溴氯海因、二溴海因、高锰酸钾、五倍子、黄连、黄柏及自配药物克螺威1号具有不同程度的敏感性。通过最小杀菌浓度(MBC)比较,螺原体对清塘剂茶籽饼、杀菌驱虫药硫酸铜、消毒剂次氯酸钙、中草药黄连、自配药物克螺威1号更为敏感,其中克螺威1号为最敏感药物,最小抑菌质量浓度(M IC)为0.16 mg/L,MBC为2.5 mg/L。对克螺威1号进行急性毒性试验和颤抖病治疗试验表明,克螺威1号的96 h LD50为1106.62 mg/kg,安全使用量为110.66 mg/kg。用其治疗人工诱发颤抖病的中华绒螯蟹,克螺威1号具有显著效果(P<0.05),随后在10个被确诊为螺原体引发中华绒螯蟹颤抖病的养殖场进行药物治疗试验,在6个养殖场治疗有效,而在其他4个养殖场治疗无效,治疗试验效果不一,用克螺威1号治疗中华绒螯蟹颤抖病具有较好的前景,但仍需进一步做大面积长期临床试验。

中华绒螯蟹颤抖病诊断和防治技术

中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）俗称河蟹（以下简称河蟹）,河蟹颤抖病是对其养殖危害最大的重大流行病,自从1994年发现以来,每年都是各地的河蟹养殖最严重的疾病之一,尽管近年来河蟹颤抖病发生有减缓趋势,但局部地区仍有大面积暴发,死亡率仍可高达50%以上,给河蟹养殖造成巨大损失。经过多年的系列研究,已证实螺原体是引发河蟹颤抖病的主要病原,该病原也是水产新型病原,

克氏原螯虾烂尾病病原的分离鉴定及其相关特性分析

为研究克氏原螯虾烂尾病病原种类及其相关特性,从患病虾尾部病灶分离出2种具有不同菌落形态和色泽的代表菌株,分别编号LW2047-1和LW2047-2,经人工感染试验确定病原菌为菌株LW2047-2。对菌株LW2047-2进行细菌学观察,分析形态特征和生理生化特性,并对16S rRNA和gyrB基因测序分析,最终将其鉴定为弗氏柠檬酸杆菌。检测该菌株定居因子CFA基因和几丁质酶chi基因,分析其黏附性和几丁质分解特性。药物敏感性试验结果表明,菌株LW2047-2对恩诺沙星和硫酸新霉素2种抗菌药物高度敏感,对磺胺类药物均不敏感。

鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF72基因克隆、蛋白原核表达和抗体制备

异育银鲫作为我国重要的淡水经济鱼类,其鳃出血病为主要病害,并造成重大经济损失,该病病原为鲤疱疹病毒Ⅱ型(cyprinid herpesvirus Ⅱ,CyHV-2).目前,研究主要在该病的检测和病理方面,对于免疫学检测方面研究较少.本研究根据CyHV-2ORF72基因序列设计了1对特异性引物,利用患病异育银鲫肾脏DNA作为模板,通过PCR扩增得到CyHV-2ORF72基因全长,该基因序列全长为1113bp,可编码370个氨基酸的蛋白.该基因与pET-28a表达载体连接构建重组原核表达载体pET-ORF72转入大肠杆菌中,经IPTG诱导表达得到了分子量约为45ku的重组蛋白,与预测的蛋白大小基本一致.将纯化的重组蛋白皮下多点注射免疫新西兰大耳兔制备了ORF72的多克隆抗体,经Western Blotting检测抗体能与病毒粗提液有良好反应,特异性较好,本结果可为下一步建立疫苗和免疫检测方法奠定基础.

一种鲤科疱疹病毒Ⅱ型的PCR快速检测方法

鲤科疱疹病毒Ⅱ型是异育银鲫重大疫病病原,该病毒引发的异育银鲫鳃出血病(大红鳃病)能导致养殖生产巨大经济损失,为满足水产疫病预防与诊断需求,本文建立了一种集DNA快速提取与PCR快速扩增为一体的分子生物学检测方法,旨在为基层水产一线水生动物疫病预防与控制提供一种快速检测方法。

扬州市水产养殖病害现状调查分析

扬州位于苏中水网地带,是我国内陆淡水水产品的主要产地,2011年全市水产养殖面积114万亩,水产养殖产量约35万吨（其中：池塘养殖70万亩、产量27万吨）,水产养殖业保持着良好的发展势头,水产动物疾病的危害较2010年有所下降,但其对一些养殖品种造成了较严重损失。

异育银鲫中鲤疱疹病毒Ⅱ型载量测定方法的建立

异育银鲫是我国重要的淡水养殖品种,但是鲤疱疹病毒Ⅱ型对其造成了重大经济损失,该病毒致死率几乎可以达到100%。为了能够有效预防和控制该病毒,需要建立一种高效灵敏的定量方法。为此,本实验室根据CyHV-16基因序列设计引物,利用SYBR Green法建立了异育银鲫中鲤疱疹病毒Ⅱ型Realtime PCR方法,可以定量鲫鱼体内疱疹病毒载量,绘制了标准曲线,根据各个组织中病毒的拷贝数分析出该病毒在不同组织中的表达分布,其中脾、肾组织中表达量较高,鳃、肝、肠、肌肉等组织中表达量较低。这些数据为预防和控制异育银鲫Ⅱ型疱疹病毒奠定了实验和研究基础。

淡水龙虾养殖现状与发展前景

近年来，随着淡水龙虾国际市场的开拓和国内市场的开发，现已成为一个热销水产品种，人工养殖业也得到较快发展，同时有关淡水龙虾养殖的科学研究也逐步成为热点，目前，淡水龙虾养殖模式较多，产量变化较大，由于地理区域、养殖环境和养殖模式的差异，国内已报道的最高产量养殖模式是池塘养殖，产量可以达到400kg/667m^2左右，然而淡水龙虾养殖技术尚未成熟和完善，还存在许多技术瓶颈，本文对龙虾养殖存在的问题和风险作出分析，并进一步对淡水龙虾养殖业的发展前景作出预测。

一例异育银鲫病源细菌的分离、鉴定及药敏试验

该试验从异育银鲫(Carassius auratus gibelio)病灶部位分离出3种病菌,使用细菌学方法分析它们的形态特征,进行16 S rRNA基因扩增和测序,并结合生理生化特性鉴定细菌种类。同时对3种病菌进行药敏试验。结果显示3种病菌分别为栖稻黄色单胞菌(Pseudomonas oryzihabitans)、嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)。栖稻黄色单胞菌对恩诺沙星、硫酸新霉素、盐酸多西环素和磺胺甲恶唑+甲氧苄啶高度敏感。嗜水气单胞菌对恩诺沙星、硫酸新霉素、甲砜霉素、氟苯尼考和盐酸多西环素五种抗生素高度敏感。恶臭假单胞菌对恩诺沙星、硫酸新霉素、盐酸多西环素高度敏感。

鳜鱼传染性脾肾坏死病毒(ISKNV)的快速PCR检测方法灵敏性的比较

传染性脾肾坏死病毒(ISKNV)是鳜鱼重大疫病病原,该病毒引发的鳜鱼传染性脾肾坏死病(Infection spleen and kidney necrosis)能导致养殖生产巨大经济损失。为满足水产疫病预防与诊断需求,该文将一种集DNA快速提取与PCR快速扩增为一体的分子生物学检测方法与试剂盒提取DNA法和传染性脾肾坏死病毒检测方法(SC/T7211-2011)中PCR方法进行比较,旨在为基层水产一线水生动物疫病预防与控制提供一种快速检测方法。

克氏原螯虾春季烂尾病的初步研究

该试验从患病克氏原螯虾病灶部位分离出两种细菌,使用细菌学方法分析其形态特征、生理生化特性,并进行16S rRNA基因扩增和测序,同时对分离出的细菌进行药敏试验。结果显示:分离出的两种细菌分别为嗜水气单胞菌和弗氏柠檬酸杆菌,两种细菌均对恩诺沙星和硫酸新霉素两种抗生素高度敏感,对磺胺类药物均不敏感。