实验性慢性氟中毒大鼠垂体生长激素细胞的超微结构及酶细胞化学研究

本实验以饮用含100mg/L高氟水的方法复制了雄性大鼠实验性慢性氟中毒模型。用透射电镜观察了高氟对大鼠垂体生长激素(GH)细胞及其硫胺素焦磷酸酶(TPPase)活性的影响。结果表明:氟中毒大鼠垂体中大多数GH细胞的细胞器不如对照组发达;线粒体有破坏,基质密度增高,出现空泡或嵴减少;溶酶体增多,分泌颗粒数量增多但较小,说明GH细胞处于机能不活跃状态。电镜酶细胞化学研究结果显示氟中毒大鼠垂体GH细胞的TPPase活性受到抑制。结果提示高氟可能抑制垂体GH细胞的TPPase活性并影响其超微结构。

肝素结合的成纤维细胞生长因子促进鼠皮肤烧伤愈合的研究

目的 :探讨肝素结合的成纤维细胞生长因子 (FGF)对烧伤愈合的促进作用。方法 :于小鼠背部皮肤用2 0W电烙 ,电灼 2 0s,烙成直径 0 .5cm圆形II度烧伤伤口 ,实验组用FGF(含FGF 30 0 μg/ml,肝素 10 0 μg/ml) ,对照组用生理盐水 ,每天换药 1次。术后 1,3,5 ,7,10d处死动物 ,观察伤口愈合情况。结果 :FGF明显促进烧伤伤口处毛细血管、成纤维细胞增生 (P <0 .0 1) ,胶原蛋白的生成 ,肉芽组织的增生及皮肤的修复。实验组较对照组愈合快 4～ 5d。结论 :肝素结合的FGF促进烧伤伤口的肉芽组织增生 ,胶原蛋白及基质的生成 。

β-榄香烯联合紫杉醇诱导胃癌细胞凋亡的体外研究

目的:观察联合β-榄香烯和紫杉醇对诱导胃癌细胞凋亡以及对凋亡相关蛋白表达的影响。方法:β-榄香烯和紫杉醇单独及联合作用于胃癌SGC7901细胞,MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡,免疫印记检测凋亡相关蛋白的表达。结果:单药β-榄香烯作用SGC7901细胞24、48和72小时的IC50值分别为(52.56±6.26)、(28.69±2.36)和(13.33±0.64)μg/ml。单药紫杉醇作用24、48和72小时的IC50值为(7.23±1.98)、(1.72±0.76)和(0.22±0.19)μg/ml。选用低浓度药物(10μg/ml的β-榄香烯和2μg/ml的紫杉醇)联合处理SGC7901细胞24小时,与相应浓度β-榄香烯、紫杉醇单药组相比,两药联合组对SGC7901的增殖抑制率显著增强(P<0.05),细胞凋亡率显著提高。进一步研究发现β-榄香烯和紫杉醇联合后,诱导了PARP裂解以及显著下调了Bcl-2与Bax的比值。结论:β-榄香烯和紫杉醇联合用药后,可能通过下调Bcl-2与Bax的比值诱导PARP裂解,进而抑制胃癌细胞增殖和诱导细胞凋亡。

ECGF生物活性与肝素的相关性研究

观察肝素与内皮细胞生长因子（ＥｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌＧｒｏｗｔｈＦａｃｔｏｒ。ＥＣＧＦ）的分离、生物活性及促创伤愈合作用的相关性。结果表明：用肝素亲和层析分离ＥＣＧＦ纯度高、产量多；肝素可使ＥＣＧＦ生物活性增加；另外，在动物实验中，肝素与ＥＣＧＦ合用可使创伤提前愈合。

核因子κB与细胞周期蛋白D1在骨肉瘤中的表达及相关性研究

目的 :探讨骨肉瘤细胞中核因子κB(NF κB)及细胞周期蛋白D1(cyclinD1)的表达及其意义。 方法 :应用免疫组织化学SABC法 ,检测 4 6例骨肉瘤、15例骨软骨瘤和 5例正常骨组织中NF κBp6 5亚单位和cyclinD1表达 ,并比较NF κB表达在骨肉瘤组织学分级、分型间的差异及其与cyclinD1表达的关系。 结果 :NF κBp6 5亚单位显著表达于骨肉瘤细胞中 (6 7.4 % ) ,而在正常骨组织和骨软骨瘤中未见表达 ;NF κBp6 5表达与骨肉瘤组织学分级无关 ,在骨内高分化型组表达显著高于普通中心型组 (P<0 .0 5 )。cyclinD1在骨肉瘤中表达率为 73.9% ,显著高于骨软骨瘤组 (33.3% ,P <0 .0 5 ) ;骨肉瘤中NF κB p6 5与cyclinD1蛋白表达显著正相关 (r =0 .4 6 3,P <0 .0 1)。结论 :NF κBp6 5在骨肉瘤细胞中异常活化 ,并与cyclinD1过表达密切相关 ,其可能通过上调cyclinD1表达参与骨肉瘤的发生发展。

微波辐射致小鼠GC-2spd细胞损伤效应研究

目的：探讨微波辐射对小鼠GC．2spd细胞的影响。方法：培养的GC-2spd细胞经平均功率密度为0、10、30mW／cm。微波辐射15min，于辐射后1-24h，应用MTF法、光镜、电镜、流式细胞术和ELISA法观测细胞增殖活力、细胞形态学和超微结构、细胞凋亡及cAMP含量的变化。结果：10、30mW／cm2微波辐射后1-24h（除30mW／cm2辐射后12h外），GC-2spd细胞增殖活力较对照组明显下降（P〈0．01或P〈0．05），光镜见部分细胞突起变短，数目减少，胞内空泡增多；辐射后6h，细胞凋亡率（％）明显增加（14．59±1．09、8．48±1．73傩4．56±2．09，P〈0．05或P〈0．01），电镜见细胞核染色质凝集边移或核膜破裂，内质网明显扩张；辐射后6h和24h，细胞内cAMP含量（nmol／g）明显降低（1．65±0．17、1．96±0．10 vs 2．77±0．24，2．13±0．33、1．69±0．27 vs 3．02±0．47，P〈0．05或P〈0．01）。结论：10和30mW／cm2微波辐射可引起GC-2spd细胞损伤，表现为细胞内cAMP含量降低，细胞增殖活力下降，细胞凋亡增加。

碱性成纤维细胞生长因子促血管内皮细胞增生的研究

目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子 (b FGF)对人血管内皮细胞 (EC)增生的影响及其机制 ,明确 b FGF对烟曲霉素衍生物 (TNP- 4 70 )及地塞米松 (Dex)作用的影响。 方法 培养人脐静脉内皮细胞 (HU VEC) ,采用 MTT法测定 EC生长活性 ,免疫组织化学方法检测 EC中核因子 (NF-κB)和 ki- 6 7的表达。 结果 b FGF有显著促进 EC增生的作用 ,可使核内 NF-κB和 ki- 6 7表达增强 ;TNP- 4 70及 Dex可抑制 EC增生 ,使核内 NF-κB和 ki- 6 7表达减少 ;b FGF逆转二者的抑制效应。 结论 b FGF能促进 EC增生 ,其机制可能是通过激活 NF- κB,使细胞由静止期进入增殖期 ,促进 DNA合成 ,细胞分裂增殖。 TNP- 4 70及 Dex可抑制 NF- κB活化 ,b

骨肉瘤组织中survivin与VEGF的表达及相关关系的研究(英文)

目的检测survivin与VEGF在骨肉瘤中的表达,探讨二者对骨肉瘤血管生成和转移的作用及其关系.方法采用原位杂交、免疫组织化学技术检测38例骨肉瘤组织survivin mRNA表达及VEGF、CD34蛋白表达,计数微血管密度(MVD)、,并与主要临床病理参数进行比较.结果骨肉瘤中survivin mRNA和VEGF表达率均为65.8%,二者表达呈正相关(r=0.546,P＜0.01);骨肉瘤MVD均值为71.5(28～152),高MVD组survivin表达率显著高于低MVD组(P＜0.01).骨肉瘤中survivin mRNA、VEGF表达及MVD与组织学分级无关,与组织学分型(WHO分型)和转移有关.结论survivin基因选择性高表达于骨肉瘤组织,通过抑制细胞凋亡,参与骨肉瘤的发生发展;其对骨肉瘤血管生成和转移的作用可能与VEGF存在密切相关;survivin可能是评价骨肉瘤预后的重要参考指标.

MAPK/ERK通路影响人胃癌细胞对奥沙利铂敏感性的机制研究

目的:探讨MAPK/ERK通路对人胃癌细胞奥沙利铂敏感性的影响,并进一步探讨其机制。方法:采用MTT法测定奥沙利铂对人胃癌BGC823和SGC7901细胞的增殖抑制影响;MAPK/ERK特异性抑制剂PD98059预处理上述两种细胞后,测定奥沙利铂的药物敏感性。Western blot方法检测胃癌细胞中p-ERK、ERK及谷胱甘肽-S-转移酶π(glutathione S-transferasesπ,GST-π)蛋白表达。应用SPSS 13.0软件包进行统计学分析。结果:1mg/L-100mg/L奥沙利铂分别作用BGC823和SGC7901细胞,48h的IC50分别为24.26mg/L和18.44 mg/L;20μmol/L的PD98059预处理BGC823和SGC7901细胞,再加入奥沙利铂继续培养48h,IC50分别降至12.42mg/L和7.97mg/L,表明对奥沙利铂的敏感性显著提高。进一步检测发现PD98059处理BGC823和SGC7901细胞24h后,p-ERK蛋白表达明显下调,GST-π蛋白亦显著下调。结论:PD98059通过抑制MAPK/ERK通路,下调GST-π蛋白表达,显著提高人胃癌细胞对奥沙利铂的药物敏感性。

利用组织芯片技术研究C57BL/6J和C3H/HeN小鼠放射性肺损伤进程差异及其机制

目的建立C57BL/6J和C3H/HeN两种小鼠放射性肺损伤进程相关组织芯片,并应用其研究FN、LN和a-SMA的表达变化及意义。方法采用20Gy60Coγ射线照射C57BL/6J和C3H/HeN两种小鼠复制动物模型,测定肺组织中羟脯氨酸含量,制备组织芯片,应用免疫组织化学(im-munohistochemistry,IHC)染色方法与图像分析技术定量检测纤连蛋白(fibronectin,FN)、层粘连蛋白(laminin,LN)和a-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin,a-SMA)在放射性肺损伤进程中的表达变化。结果组织芯片制备成功,其HE和免疫组织化学染色结果与普通切片具有良好一致性。照射后1~6mC57BL/6J小鼠肺组织病变经历炎症期、增生期和纤维化期,胶原沉积增多,照后1~3mFN表达明显高于正常对照组,照后6m逐渐减少至正常,LN表达在照射后呈渐进性增加,a-SMA表达强于C3H/HeN小鼠;照射后1~6mC3H/HeN小鼠肺组织主要表现为间质性炎症改变,FN表达于照射后1~6m与正常对照组相比无明显变化,LN表达于照射后1~3m明显增强,6m逐渐减少。结论γ射线照...

生长因子的协同作用与新血管形成的研究进展

缺血性疾病的血管重建不只依赖于血管新生,还需骨髓来源的前体细胞的参与。缺血本身不仅能动员血管前体细胞,而且能够增强它们向内皮细胞分化的能力。有许多生长因子如血管内皮生长因子、血小板源性生长因子等能募集骨髓来源的内皮前体细胞到血管重建部位。但是,缺血诱导的血管形成往往不能完全弥补外周血管病变和动脉闭塞所引起的血流减少,并且单一的生长因子作用也不能诱导成熟稳定的血管形成,同时易出现并发症而制约了其临床应用。因此如何利用生长因子动员血管前体细胞参与血管新生,并通过其协同作用形成稳定的功能性的血管成为研究的热点。本文就生长因子协同作用参与新血管形成方面作一综述。

微血管内皮细胞功能改变与糖尿病微血管病变研究热点

糖尿病微血管病变是糖尿病多种并发症的病理基础,也是糖尿病预后的决定性因素,主要包括糖尿病视网膜病、糖尿病肾病、糖尿病神经病变及糖尿病心肌病变等。目前研究的热点主要涉及两方面,即糖基化终产物及其信号通路在糖尿病病变发生中的作用、微血管内皮细胞的功能改变与糖尿病血管病变的发生。本文就上述两方面的研究进展作一综述,并介绍本研究室的相关研究结果。

乳腺新的交界性病变——平坦型上皮不典型性的研究进展

通过对平坦型上皮不典型性这一病变的全面回顾,系统介绍该病的由来、临床和组织病理学特点、病情进展风险、遗传学和免疫表型特点及治疗策略,为病理医师对该病的诊断提供参考,为临床医师对该病的处理提供依据。

S-HPM辐射致牛X,Y精子的损伤差异研究

目的探讨S-HPM辐射致X、Y精子的损伤及其差异。方法经流式分选得到高纯度的牛X、Y精子,经30 mW/cm2和100 mW/cm2的S-HPM辐射4 min,通过精子动态分析系统检测辐射后1 h、2 h、4 h、6 h、12 h和24 h的X精子和Y精子的活动度的差别;吖啶橙/溴化乙啶(acridine orange/ethidium bromide,AO/EB)染色检测辐射后1 h、6 h、12 h和24 h的X精子和Y精子凋亡率的变化。透射电镜观察100 mW/cm2S-HPM辐射后4 h X、Y精子超微结构损伤程度的差异。顶体酸性磷酸酶染色检测辐射后1 h、6 h和12 h顶体功能的变化差异。结果经30 mW/cm2和100 mW/cm2的S-HPM辐射后,精子活动度均随时间延长呈降低趋势,X、Y精子活动度的降低未见显著性差别(P>0.05)。S-HPM辐射可致X、Y精子凋亡率增加,呈现Y精子重于X精子,100 mW/cm2重于30 mW/cm2的趋势,其中早期具有显著性差异(P<0.05)。超微结构显示S-HPM辐射后精子以头部病变为主,尾部病变不明显,Y精子损伤重于X精子。S-HPM辐射后精子顶体酸性磷酸酶含量降低,Y精子重于X精子,100 mW/cm2重于30 mW/cm2(P<0.05,P<0.01)。结论 S-HPM辐射后X、Y精子均发生损伤,以精子头部病变为主,精子顶体酸性磷酸酶含量降低,Y精子的损伤重于X精子。

人主动脉内皮细胞的培养及免疫细胞化学研究

人主动脉内皮细胞体外长期培养在国内首次成功。内皮细胞培养10～15代,细胞倍增时间20h～25h,累积倍增数25～30。应用相差显微镜,扫描、透射电镜,Ⅷ因子相关表面抗原的免疫荧光抗体及血管紧张素转换酶的单克隆抗体,对培养的人主动脉内皮细胞进行形态学及免疫细胞化学的观察与研究。证明,长期培养后的多核内皮细胞是具有内皮细胞特点的变形内皮细胞。

γ-射线诱发的人AHH—1淋巴细胞凋亡及其机制研究

研究γ-射线诱发的人AHH-1淋巴细胞凋亡规律和发生机制,用MGG、TUNEL染色,MTT、免疫组化和电镜观察,经0、3、6、9、12、15、20Gy γ-射线照射后,AHH-1淋巴细胞凋亡、活存率以及Bax、Bel-2、Bel-xl等凋亡相关蛋白表达的变化。结果(1)3—12Gy照射范围内,凋亡是AHH-1细胞死亡的主要方式,且6-12Gy范围内呈现较好的量效关系;(2)15-20Gy照射后,凋亡率下降,推测此时除凋亡外,坏死也是AHH-1细胞死亡的主要途径;(3)不同剂量照射后,AHH-1细胞凋亡率在24h达到高峰;3-12Gy照射范围内,细胞活存率随照射剂量的增加而下降,15-20Gy照射后,下降趋势趋于平缓。结论认为一定剂量γ-射线照射可诱发人AHH-1淋巴细胞出现大量凋亡,且在一定范围内呈现较好的量效关系。

人脐带静脉内皮细胞的继代培养

人脐带静脉内皮细胞继代培养25代。应用光镜、电镜及Ⅷ因子相关抗原的免疫荧光方法进行鉴定与观察。在RPMI-1640培养液中加入20%人血清,内皮细胞生长因子200μg/ml,肝素100μg/ml及培养皿的明胶覆膜是人内皮细胞长期培养的重要条件。