救脑益智胶囊水提液对半乳糖老化小鼠海马神经元损伤的保护作用

为观察救脑益智水提液对半乳糖老化小鼠海马神经元的神经元存活信号转导通路和凋亡级联反应中某些蛋白质表达的影响 ,将昆明种小鼠分为 4组 (每组 2 4只 ) :正常对照组 (C组 )、D 半乳糖老化模型组 (D组 )、大剂量药物治疗组 (B组 )和小剂量药物治疗组 (S组 )。除C组外 ,3组小鼠每日皮下注射半乳糖 5 0mg/kg。其中B组和S组每日分别灌胃救脑益智胶囊水提取液 ,相当于生药 1 g/kg和 0 .3 g/kg ,C组和D组分别灌胃等量生理盐水 ,共 3个月。结果 :D组小鼠海马神经元中Akt/PKB(蛋白激酶B)、CREB(cAMPresponseelementbindingprotein)和Bcl 2的免疫组化阳性细胞数明显减少 ,而AIF(凋亡诱导因子 )和Bax明显增加 ,PP 1 (蛋白磷酸酯酶 1 )也明显减少。S组上述改变恢复正常 ,而B组却无此作用。提示 :小剂量救脑益智水提液对半乳糖老化模型小鼠海马神经元的存活信号转导通路和凋亡级联反应的改变具有恢复正常的作用 ,而大剂量则无此作用。

参乌胶囊对糖尿病复合脑缺血模型大鼠学习记忆功能和细胞凋亡相关蛋白表达的影响

目的 研究糖尿病性脑病病变机制以及参乌胶囊对糖尿病复合脑缺血模型大鼠学习记忆功能和细胞凋亡相关蛋白表达的干预作用。方法 采用在大鼠腹腔注射链脲佐菌素 (streptozotocin ,STZ ,6 0mg·kg-1 )引起糖尿病的基础上 ,再行双侧颈动脉缺血再灌手术建立糖尿病脑病动物模型。经参乌胶囊小剂量 (0 . 4 5g·kg-1 ·d-1 )、中剂量 (0 . 9g·kg-1 ·d-1 )和大剂量 (1 . 8g·kg-1 ·d-1 )灌胃治疗 30d后 ,用Morris水迷宫实验对动物行为学进行评价 ,用Westernblotting法对大鼠海马中的细胞凋亡相关蛋白进行测试。结果 糖尿病复合脑缺血模型大鼠到达站台游动时间比正常对照组增长 6 3 . 4 %;而参乌胶囊小剂量组较模型组动物缩短 6 1 . 3%,参乌胶囊中剂量组较模型组动物缩短 75 . 3%(P <0 . 0 1 ) ;Bcl- 2在模型组表达明显比对照组少 ,而在参乌胶囊中剂量组和大剂量组中比模型组表达多 ;caspase - 3在模型组中的表达明显比对照组多 ,caspase - 3和Bax在参乌胶囊中剂量组和大剂量组中的表达明显比模型组少。结论 本实验建立的糖尿病脑病动物模型可使大鼠存在认知功能障碍 ;糖尿病脑病发生机制与神经元细胞凋亡有关 ;参乌胶囊有改善模型大鼠的学习记忆功能和抑制神经元细胞凋亡的功能。

大脑皮层不同温度区微血管血流量的比较

目的：了解大脑皮层温度与微循环血流量的关系，研究皮层表面高低温形成的机理。方法：用皮层红外热像温度显示法在20只开颅家猫大脑表面选择高低温度点，并在其上使用激光多普勒微循环测量仪进行血流量测量。结果：（1）皮层表面存在温度差，所选择的高温点平均温度为(34．83±1．08)℃，低温点为(32．28±1．19)℃，两者P ＜0．001；（2）在高温点上测量的微血管血流量为311±85．8，低温点上测量的微血管血流量为134±41．7，二者有极显著性差异(P ＜0．001)；(3)在硬脑膜和软脑膜上测量到的血流量无显著性差异(P ＞0．05)。结论：皮层温度的高低与血流量有直接的关系。

李氏5号方对半乳糖老化小鼠海马神经元褪黑素受体和Nogo受体表达的影响

为了观察李氏5号方对半乳糖老化小鼠海马神经元褪黑素受体(MTR)和Nogo受体(NogoR)表达的影响。我们将昆明小鼠随机分为五组:正常对照组(C组)、D半乳糖模型组(D组)、李氏5号方大剂量药物治疗组(L组)、中剂量药物治疗组(M组)和小剂量药物治疗组(S组);D、L、M、S四组每日皮下注射半乳糖65mg/kg体重,持续三个月。应用免疫组织化学染色方法检测小鼠海马神经元MTR和NogoR的表达水平。NogoR免疫组化染色结果:D组海马阳性反应细胞着色浅,少有突起,细胞数目少,仅为正常小鼠的20%,三个剂量李氏5号方治疗组染色结果与C组相似。结果提示:半乳糖老化小鼠海马神经元MTR免疫反应阳性神经元数的上调可能是老化小鼠的一种代偿性反应;NogoR表达下调提示老化小鼠可能存在脑白质的损害,出于机体自我保护的需要,NogoR表达下调以避免神经元修复机制对大脑的进一步损害;不同剂量的李氏5号方水提取液对两种受体的调节作用极为明显,说明这两种受体的表达可受到外源性药物的干预。

参乌胶囊对糖尿病复合脑缺血模型大鼠血糖和学习记忆功能的影响

目的:探讨糖尿病性脑病病变机制,观察参乌胶囊对糖尿病复合脑缺血模型大鼠学习记忆功能的影响。方法:采用在大鼠腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)(60mg/kg)引起糖尿病的基础上,再行双侧颈动脉缺血再灌手术建立糖尿病脑病动物模型。经参乌胶囊小剂量犤0.45g/(kg·d)犦、中剂量犤0.9g/(kg·d)犦和大剂量犤1.8g/(kg·d)犦灌胃治疗30d后,用Morris水迷宫实验对动物行为学进行评价。结果:糖尿病复合脑缺血模型大鼠到达站台游动时间比正常对照组增长63.4%;而参乌胶囊小剂量组较模型组动物缩短61.3%,参乌胶囊中剂量组较模型组动物缩短75.3%,差异均有显著性意义(F=3.71,P<0.01);参乌胶囊小剂量和中剂量组在明显改善认知功能和降低体内血糖水平的同时,也使其体质量明显降低,血糖分别降低为19.2%和15.1%,差异均有显著性意义(t=2.13,2.14,P<0.05)。结论:糖尿病复合脑缺血模型大鼠存在认知功能障碍;糖尿病脑病发生机制与体内血糖水平有关;参乌胶囊有改善糖尿病复合脑缺血模型大鼠的学习记忆功能和降低体内血糖水平的功能。

Nogo与Nogo受体在正常小鼠大脑的分布

NOgo与NOgo受体对抑制中枢神经系统的再生有着重要的作用。本研究用本室制备的抗Nogo和抗Nogo受体的多克隆抗体进行免疫组织化学染色,在低倍镜下计数阳性细胞、观察Nogo与Nogo受体在正常小鼠脑内的分布。结果显示:Nogo样和Nogo受体样免疫阳性结构在大脑皮层、海马、下丘脑、苍白球、尾壳核和黑质等处的神经元细胞核中有较强的表达,而在胞浆和突起内表达较弱。由此我们得出结论,Nogo和Nogo受体蛋白在成年小鼠脑内分布广泛。

糖尿病引起脑神经病变的研究进展

糖尿病脑病变是糖尿病慢性并发症之一,给病人家庭和社会都造成很重的负担。临床主要表现为轻、中度认知功能障碍,学习和记忆能力下降,与脑老化、老年中风及老年痴呆均有密切联系。糖尿病慢性脑病变包括形态学、神经生化、神经电生理及神经行为学和脑血流等方面的改变。体现在脑灰质、白质和神经元弥漫性退行性变,脑电波异常,长时程增强效应降低和脑血流减少。

李氏5号方对D-半乳糖老化小鼠海马神经元NGF信号转导的影响

通过检测D 半乳糖老化小鼠海马神经元NGF(神经生长因子 )、PI3K(磷脂酰肌醇酯 3激酶 )、Akt/PKB(蛋白激酶B)、CREB(cAMP应答元件结合蛋白 )的表达 ,观察李氏 5号方对海马神经元NGF信号转导的影响。将小鼠随机分为 5组 :正常对照组 (C组 )、D 半乳糖模型组 (D组 )、李氏 5号方大剂量药物治疗组 (L组 )、中剂量药物治疗组(M组 )、小剂量药物治疗组 (S组 )。D、L、M、S 4组每日皮下注射半乳糖 65mg/kg。L、M、S 3个治疗组分别灌胃李氏5号方 0 .6、0 .3、0 .1 5g/kg ,连续 3个月。免疫组织化学染色方法和Westernblotting检测海马神经元NGF、PI3K、Akt/PKB、CREB的表达。结果 :4种抗体C组深染的阳性细胞在海马广泛分布 ,细胞计数与D组有显著性差异 ;D组海马阳性反应细胞着色浅 ,少有突起 ,细胞数目少。 3个剂量李氏 5号方治疗组染色结果与C组相似 ,与半乳糖老化组比较均有显著性差异 ,李氏 5号方水提取液能明显上调NGF的PI3K通路中的一些信号转导蛋白 ,提示 :李氏 5号方水提取液中可能含有能激活PI3K的活性物质 ,为深入研究李氏 5号方的有效成分打下基础。

李氏5号中药对D-半乳糖老化小鼠海马超微结构及胰岛素受体底物表达的影响

目的:观察李氏5号中药对D-半乳糖老化小鼠海马超微结构和磷脂酰肌醇酯3激酶(phosphatidylinoditide-3'OHkinase,PI3K)、胰岛素受体底物-1(insulin-receptorsubstrate-1,IRS-1)、胰岛素受体底物-2(insulinreceptorsubstrate-2,IRS-2)表达的影响。方法:将132只小鼠随机分为6组,正常对照(C)组、D-半乳糖模型(D)组、李氏5号大剂量(L)组、中剂量(M)组、小剂量(S)组、多奈哌齐(A)组。D,L,M,S,A5组每日皮下注射半乳糖100mg/kg。L,M,S3个治疗组分别灌胃李氏5号方1.2,0.6,0.3g/(kg·d),A组多奈哌齐0.75mg/(kg·d)灌胃。4个月后,取小鼠海马CA1区组织进行电镜观察,行脑冷冻切片,用PI3K,IRS-1,IRS-2抗体进行免疫组化染色。结果:①电镜结构显示,D-半乳糖老化小鼠海马CA1区神经元核固缩,线粒体、高尔基体等细胞器肿胀,血管足突细胞肿胀,管腔变窄;李氏5号中药保护可以明显改善这种现象。②免疫组织化学染色结果显示3种抗体C组深染的阳性细胞在海马广泛分布,D组海马阳性反应细胞着色浅,少有突起,细胞数目少,分别为C组的48.8%,57.0%和60.8%。李氏5号方组染色结果与C组相似,A组亦有相同结果。结论:D-半乳糖老化小鼠海马CA1区出现明显超微结构病理改变,海马PI3K,IRS-1,IRS-2的表达明显下降;李氏5号中药保护能明显改善CA1区?

李氏5号方水提液对D-半乳糖老化小鼠海马神经元凋亡级联反应的影响

目的:观察李氏5号方水提液对D-半乳糖老化小鼠海马神经元凋亡级联反应的影响。方法:将小鼠随机分为5组:正常对照组(C组)、D-半乳糖模型组(D组)、李氏5号方大剂量药物治疗组(L组)、中剂量药物治疗组(M组)、小剂量药物治疗组(S组)。D,L,M,S4组每日皮下注射半乳糖65mg/kg。L,M,S3个治疗组分别灌胃李氏5号方0.6,0.3和0.15g/kg,连续3个月。免疫组织化学染色方法和WesternBlotting检测海马神经元(凋亡诱导因子(AIF),Bax细胞色素C(CytC),Bcl-2的表达。结果:模型小鼠海马神经元AIF,Bax,CytC的阳性细胞数分别比正常对照小鼠增加4.4倍、6.2倍和4.4倍,而Bcl-2则仅为正常小鼠的12%。李氏5号方水提液3种不同剂量均不同程度使这4种蛋白质表达的异常有所恢复,但未能达到完全正常水平。结论:D-半乳糖老化小鼠的海马神经元存在明显的凋亡级联反应,李氏5号方水提液对改善凋亡级联反应有一定作用。

救脑益智胶囊对人神经母细胞瘤株SY5Y生长的影响

目的:通过观察救脑益智胶囊对人神经母细胞瘤株 SY5Y 生长的影响,从细胞水平评估此药对神经细胞生长的作用。方法:以人神经母细胞瘤株 SY5Y 为细胞模型,分为对照组和加药组。以 MTT 代谢率、细胞轴突长度、胞体面积为观察指标。结果:与对照组比较,加药组 SY5Y 细胞轴突长度和胞体面积均增加,MTT 代谢率升高。结论:救脑益智胶囊具有神经营养作用,且能增加细胞线粒体活性。

中药复方962对老年大鼠学习记忆功能及兴奋性的影响

目的 研究中药复方 962胶囊改善老年大鼠学习记忆功能下降的作用及对中枢兴奋性的影响。方法 研究采用 2 4月龄Wistar雌、雄性大鼠 ,实验分为青年对照、老年模型、脑复康 (0 .56g/kg) ,962中剂量 (0 .9g/kg)和 962大剂量 (1 .8g/kg) 5组 ,采用灌胃给药途径给药 1～ 2个月 ,分别用水迷宫及旷场分析对动物学习记忆功能及兴奋性进行评价。结果 中药复方 962中剂量及大剂量能显著改善老年雌、雄性大鼠的空间学习记忆功能 (P<0 .0 5) ,其中 962大剂量在老年雌性大鼠改善学习记忆方面较脑复康 (0 .56g/kg)强。该药对老年雌、雄性大鼠的兴奋性无显著影响。结论 中药复方 962具有改善老年大鼠学习记忆功能的作用 ,对老年动物兴奋性无显著影响。

李氏5号方对人神经母细胞瘤株SY5Y生长的影响

目的:观察李氏5号方在细胞水平上对神经细胞生长的影响,寻找最佳药物浓度.方法:不同浓度的李氏5号方作用于人神经母细胞瘤株SY5Y,利用MTT测定细胞的存活率,制定浓度-药效曲线得出最佳药物浓度.以MTT代谢率、LDH漏出率、细胞轴突长度、胞体面积为观察指标.结果:李氏5号方在0.125～0.75 g*L-1浓度范围内均可增加SY5Y细胞的存活率.与正常对照组相比,加药组SY5Y细胞轴突长度和胞体面积均增加,MTT代谢率升高、LDH漏出率降低. 结论:李氏5号方具有营养神经细胞、促进神经细胞存活的作用.

APP17肽对糖尿病视网膜神经元表达NT-3和星形胶质细胞增殖的影响

目的 观察糖尿病早期视网膜神经元表达 NT- 3和星形胶质细胞增殖情况 ,并观察 APP17肽的作用。方法 用链脲佐菌素 (streptozotocin,STZ)复制 Wistar大鼠糖尿病模型 ,于模型建立 2周后 ,皮下注射 APP17肽 ,1月后处死大鼠取视网膜 ,进行神经免疫组化 ,观察 APP17肽对糖尿病早期视网膜神经元中神经营养因子 3(neurotrophin- 3,NT- 3)和星形胶质细胞中胶质原纤维酸性蛋白 (glial fibrillary acidi protein,GFAP)表达的影响。结果 同正常对照组相比模型组 (DM组 )视网膜神经元 NT- 3阳性细胞数明显减少 ,但APP17+DM组阳性细胞数多于 DM组 (P<0 .0 1) ,并且对照组与 APP17+DM组中星形胶质细胞 GFAP阳性数少于 DM组 (P<0 .0 1)。结论 在糖尿病视网膜病变早期存在视网膜神经细胞 NT- 3表达减少及星形胶质细胞增生 ,APP17肽可明显改善早期糖尿病大鼠视网膜神经元的表达 。

复智散对抗Aβ25-35神经细胞毒性机制的研究

目的 研究自制中药复智散对 Aβ2 5 - 35神经毒性作用的影响及相关机制。方法 测定 Aβ2 5 - 35及复智散孵育下 SH- SY 5 Y神经母细胞瘤株的 MTT值 ,利用 Western Blot法检测 CREB、Bcl- 2、Cyt C的表达。结果 Aβ2 5 - 35致培养神经细胞存活率下降、CREB和 Bcl- 2表达下调、Cyt C表达增加 ,复智散促进神经细胞存活、上调CREB和 Bcl- 2、减少 Cyt C释放入胞浆。结论 复智散通过对 CREB、Bcl- 2和 Cyt C的影响对抗 Aβ2 5 - 35的神经细胞毒性效应。