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固相合成法合成葡萄球菌RNAⅢ抑制肽的鉴定
被引量:
2
1
作者
邢庆昌
郝立波
+2 位作者
王继芳
姬志娟
王蓉
《中国组织工程研究与临床康复》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第13期2419-2422,共4页
背景:葡萄球菌感染和生物被膜形成受群体感应机制调控。葡萄球菌RNAⅢ抑制肽可以干预葡萄球菌群体感应系统,阻断葡萄球菌细胞间的信号传导通路,进而抑制葡萄球菌的毒素分泌和生物被膜形成,防治葡萄球菌感染。目的:探讨葡萄球菌RNAⅢ抑制...
背景:葡萄球菌感染和生物被膜形成受群体感应机制调控。葡萄球菌RNAⅢ抑制肽可以干预葡萄球菌群体感应系统,阻断葡萄球菌细胞间的信号传导通路,进而抑制葡萄球菌的毒素分泌和生物被膜形成,防治葡萄球菌感染。目的:探讨葡萄球菌RNAⅢ抑制肽(RIP)的人工合成方法。设计、时间及地点:单一样本观察。于2006-08/11在北京宣武医院中心实验室完成。材料:Fmoc-AA、Pipredine、TFA、HMP购自美国MERCK公司;DCC、HOBT、DMAP购自美国ABI公司。方法:采用固相合成法合成RNAⅢ抑制肽,HPLC法纯化,进行质谱分析法、酸水解法、红外光谱分析法和内酰胺酶活性测定法检测。主要观察指标:①合成和纯化结果。②分子量测定结果。③组成成分分析结果。④氨基酸序列分析结果。⑤结构分析结果。⑥生物活性鉴定结果。结果:合成的RNAⅢ抑制肽纯度为97.42%,相对分子质量为914.37,与理论相对分子质量基本一致;与天然RNAⅢ抑制肽具有相同的氨基酸组分、氨基酸序列以及空间结构;生物活性检测证明合成RNAⅢ抑制肽具有和天然RNAⅢ抑制肽相同的功效,可以有效抑制细菌产生RNAⅢ。结论:采用固相合成法成功合成RNAⅢ抑制肽,鉴定分析证实合成的多肽和天然RNAⅢ抑制肽蛋白具有相同的结构和功能。
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关键词
葡萄球菌
RNAⅢ抑制肽
合成
下载PDF
职称材料
新的人突触相关蛋白(FRG4)抗原表位分析及抗体制备
被引量:
2
2
作者
王仁
杨向东
+4 位作者
屈顺林
刘俊文
闾宏伟
姬志娟
盛树力
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第7期531-534,共4页
目的:分析一个新的人突触相关蛋白(FRG4)抗原表位并制备其多克隆抗体。方法:从人胎肝文库PCR扩增获得FRG4基因全长cDNA序列;通过生物信息学分析,预测FRG4编码氨基酸序列的二级结构、抗原决定簇、功能结构域,并进行了多序列比对;采用固...
目的:分析一个新的人突触相关蛋白(FRG4)抗原表位并制备其多克隆抗体。方法:从人胎肝文库PCR扩增获得FRG4基因全长cDNA序列;通过生物信息学分析,预测FRG4编码氨基酸序列的二级结构、抗原决定簇、功能结构域,并进行了多序列比对;采用固相多肽合成法合成了FRG4抗原多肽,并免疫家兔;用免疫组化检测蛋白在人肝癌细胞HepG2细胞中的表达。结果:通过生物信息学分析选取抗原13肽PKLVKEEVFWRNY,制备兔抗人FRG4多克隆抗体。高效液相色谱检测显示抗体纯度达82.79%,抗体滴度为1∶16000,Westernblot证实该抗体具有较好的反应性和特异性,免疫组化证实其主要在HepG2细胞胞浆中表达。结论:成功制备了新的人突触相关蛋白(FRG4)多克隆抗体。
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关键词
巨噬细胞
动脉粥样硬化
突触相关蛋白
多肽合成
抗体
下载PDF
职称材料
题名
固相合成法合成葡萄球菌RNAⅢ抑制肽的鉴定
被引量:
2
1
作者
邢庆昌
郝立波
王继芳
姬志娟
王蓉
机构
解放军总
医院
第二附属
医院
解放军总
医院
骨科
宣武医院肽合成室
出处
《中国组织工程研究与临床康复》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第13期2419-2422,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(30640088)
北京市自然科学基金资助项目(7082043)~~
文摘
背景:葡萄球菌感染和生物被膜形成受群体感应机制调控。葡萄球菌RNAⅢ抑制肽可以干预葡萄球菌群体感应系统,阻断葡萄球菌细胞间的信号传导通路,进而抑制葡萄球菌的毒素分泌和生物被膜形成,防治葡萄球菌感染。目的:探讨葡萄球菌RNAⅢ抑制肽(RIP)的人工合成方法。设计、时间及地点:单一样本观察。于2006-08/11在北京宣武医院中心实验室完成。材料:Fmoc-AA、Pipredine、TFA、HMP购自美国MERCK公司;DCC、HOBT、DMAP购自美国ABI公司。方法:采用固相合成法合成RNAⅢ抑制肽,HPLC法纯化,进行质谱分析法、酸水解法、红外光谱分析法和内酰胺酶活性测定法检测。主要观察指标:①合成和纯化结果。②分子量测定结果。③组成成分分析结果。④氨基酸序列分析结果。⑤结构分析结果。⑥生物活性鉴定结果。结果:合成的RNAⅢ抑制肽纯度为97.42%,相对分子质量为914.37,与理论相对分子质量基本一致;与天然RNAⅢ抑制肽具有相同的氨基酸组分、氨基酸序列以及空间结构;生物活性检测证明合成RNAⅢ抑制肽具有和天然RNAⅢ抑制肽相同的功效,可以有效抑制细菌产生RNAⅢ。结论:采用固相合成法成功合成RNAⅢ抑制肽,鉴定分析证实合成的多肽和天然RNAⅢ抑制肽蛋白具有相同的结构和功能。
关键词
葡萄球菌
RNAⅢ抑制肽
合成
分类号
R318 [医药卫生—生物医学工程]
下载PDF
职称材料
题名
新的人突触相关蛋白(FRG4)抗原表位分析及抗体制备
被引量:
2
2
作者
王仁
杨向东
屈顺林
刘俊文
闾宏伟
姬志娟
盛树力
机构
南华大学分子生物中心
首都医科大学北京
宣武医院
多
肽
合成
室
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第7期531-534,共4页
基金
国家自然科学基金(30200103)
湖南省自然科学基金(02JJY4011)资助
文摘
目的:分析一个新的人突触相关蛋白(FRG4)抗原表位并制备其多克隆抗体。方法:从人胎肝文库PCR扩增获得FRG4基因全长cDNA序列;通过生物信息学分析,预测FRG4编码氨基酸序列的二级结构、抗原决定簇、功能结构域,并进行了多序列比对;采用固相多肽合成法合成了FRG4抗原多肽,并免疫家兔;用免疫组化检测蛋白在人肝癌细胞HepG2细胞中的表达。结果:通过生物信息学分析选取抗原13肽PKLVKEEVFWRNY,制备兔抗人FRG4多克隆抗体。高效液相色谱检测显示抗体纯度达82.79%,抗体滴度为1∶16000,Westernblot证实该抗体具有较好的反应性和特异性,免疫组化证实其主要在HepG2细胞胞浆中表达。结论:成功制备了新的人突触相关蛋白(FRG4)多克隆抗体。
关键词
巨噬细胞
动脉粥样硬化
突触相关蛋白
多肽合成
抗体
Keywords
Macrophages
Atherosclerosis
Synapse associated protein
Peptide synthesis
Antibody
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
固相合成法合成葡萄球菌RNAⅢ抑制肽的鉴定
邢庆昌
郝立波
王继芳
姬志娟
王蓉
《中国组织工程研究与临床康复》
CAS
CSCD
北大核心
2009
2
下载PDF
职称材料
2
新的人突触相关蛋白(FRG4)抗原表位分析及抗体制备
王仁
杨向东
屈顺林
刘俊文
闾宏伟
姬志娟
盛树力
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005
2
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职称材料
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