MTHFD2对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及机制研究

目的探究亚甲基四氢叶酸脱氢酶2(MTHFD2)对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响及作用机制。方法选择2020年4月至2023年8月于杭州市富阳区第一人民医院接受肝癌切除术的58例肝细胞癌(HCC)患者作为研究对象,收集手术切除的HCC组织及癌旁组织,采用免疫组织化学染色法检测组织中MTHFD2表达水平。另选取正常肝细胞系LO2,以及人肝癌细胞系HepG2、Hep3B和SMMC-7721,采用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测各组细胞中MTHFD2表达水平。将HepG2细胞分为空白对照组(仅给予缓冲溶液)、si-NC组(转染si-NC)和si-MTHFD2组(转染si-MTHFD2),比较各组细胞的增殖、迁移和侵袭能力。选取30只BALB/C-nu/nu雄性裸鼠,将转染24 h后处于对数生长期的HepG2细胞种植于裸鼠右侧腋下,每周测算瘤体体积,4周后剥离瘤块称重。结果HCC组织中MTHFD2蛋白阳性表达率为70.69%,显著高于癌旁组织(32.76%),差异具有统计学意义(P<0.05)。与LO2细胞相比,HepG2、Hep3B和SMMC-7721细胞中MTHFD2的蛋白及mRNA表达水平均显著升高(P均<0.05),且HepG2细胞中MTHFD2的蛋白及mRNA表达水平均最高。与空白对照组和si-NC组相比,si-MTHFD2组细胞中MTHFD2的蛋白及mRNA表达水平均显著降低(P均<0.05)。转染72h和96h后,si-MTHFD2组的光密度(OD)450值分别低于空白对照组和si-NC组(P均<0.05)。与空白对照组和si-NC组相比,si-MTHFD2组的细胞划痕愈合率降低,侵袭细胞数目减少,细胞中磷酸肌醇3激酶(PI3K)、磷酸化PI3K(p-PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、p-AKT、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、p-mTOR蛋白表达水平均显著降低(P均<0.05)。培养3周后,si-MTHFD2组裸鼠体内肿瘤体积分别小于空白对照组和si-NC组(P均<0.05)。培养4周后称重结果显示,si-MTHFD2组裸鼠体内肿瘤质量分别小于空白对照组和si-NC组(P均<0.05)。结论下调MTHFD2表达可抑制肝癌细胞增殖、迁移、侵袭及体内成瘤能力,其机制可能与负调控PI3K/AKT/mTOR信号转导通路有关。MTHFD2有望成为肝癌治疗的新靶点。

小探头超声内镜检查结合内镜黏膜下剥离术诊治上消化道隆起性病变20例

目的探讨小探头超声内镜检查结合内镜黏膜下剥离术诊治上消化道隆起性病变的效果。方法选取2016年7月至2018年2月在该院接受诊治的上消化道隆起性病变患者20例,均采用小探头超声内镜检查结合内镜黏膜下剥离术治疗,分析小探头超声内镜检查结果、手术指标等,术后随访病变残留和复发情况。结果小探头超声内镜检查结果:平滑肌瘤8例(40.0%),间质瘤5例(25.0%),囊肿4例(20.0%),异位胰腺2例(10.0%),胃部息肉1例(5.0%)。平滑肌瘤中,小探头超声内镜表现为椭圆形,均匀低回声,边界清;间质瘤中,小探头超声内镜表现为低回声,回声可不均匀;囊肿中,小探头超声内镜表现为无回声,均匀,边界清。小探头超声内镜与术后病理结果符合率达90.0%(18/20),术后并发症发生率为5.0%(1/20)。术后随访6～12个月均未出现病变残留和复发。结论小探头超声内镜检查上消化道隆起性病变准确率高,采用内镜黏膜下剥离术治疗效果满意。

乌药醇提物对酒精联合高脂饮食诱导的脂肪肝防治作用研究

目的观察乌药醇提取物(LREE)对酒精性脂肪肝模型小鼠的保护作用,探讨其可能的作用机制。方法32只雄性ICR小鼠按随机数字表法分为正常对照组、模型对照组、易善复组(0.2736 g/kg)和乌药组(1 g/kg),每组8只。采用饮食高脂饲料复合梯度浓度白酒连续灌胃8周复制酒精性脂肪肝模型小鼠,造模的同时给予易善复、LREE进行干预;于第2、4、6、8周采血,全自动生化仪检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性及总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)水平;实验期末,解剖,取肝脏,油红O染色检测肝组织脂肪病变程度,RT-PCR检测肝组织低密度脂蛋白受体(LDLR)、过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR-α)、胰岛素诱导基因1(Insig1)、固醇调节元件结合蛋白裂解激活蛋白(SCAP)、固醇调节元件结合蛋白-1(SREBP-1)mRNA表达水平。结果LREE和易善复能抑制高脂饮食+酒精诱导的小鼠体质量增加[(38.6±2.9)g、(39.4±2.3)g比(42.3±1.9)g,P<0.05],实验期末,乌药组及易善复组小鼠血清ALT、AST活性显著降低[ALT:(37.5±8.2)U/L、(41.4±17.5)U/L比(64.3±14.7)U/L,P<0.05;AST:(67.3±23.0)U/L、(67.4±23.9)U/L比(96.3±11.5)U/L,P<0.01],肝组织脂质沉积改善;RT-PCR结果显示,LREE与易善复能上调肝组织LDLR[(0.6±0.1)、(0.8±0.1)比(0.3±0.1),P<0.01]和PPAR-α[(0.8±0.1)、(0.7±0.1)比(0.5±0.1),P<0.05或P<0.01]mRNA表达水平,下调Insig1[(1.6±0.1)、(1.6±0.1)比(3.1±0.4),P<0.01]、SCAP[(1.8±0.2)、(1.3±0.1)比(2.3±0.1),P<0.05]和SREBP-1[(1.5±0.3)、(1.2±0.1)比(2.5±0.1),P<0.01]mRNA表达水平。结论LREE对高脂联合酒精诱导的酒精性脂肪肝具有良好的保护作用,其机制可能与抑制Insig1-SCAP-SERBP1通路活化有关。

深在性囊性胃炎6例诊治分析

目的分析深在性囊性胃炎临床表现、CT、胃镜、超声内镜检查,以及治疗方式,提高对该病的认识。方法回顾分析6例深在性囊性胃炎的临床表现、CT、胃镜、超声内镜及病理资料。结果 6例患者中CT提示3例为胃癌,3例考虑胃部肿块。胃镜均提示隆起病变。超声内镜均诊断为深在性囊性胃炎。6例患者均行内镜黏膜下剥离术(ESD),病理均符合深在性囊性胃炎。结论超声内镜结合内镜黏膜切除术(EMR)或ESD可以提高诊断率,对于不伴随恶性肿瘤的深在性囊性胃炎,可行ESD治疗。

贝伐珠单抗联合化疗治疗转移性结直肠癌对患者血清VEGF和TAP水平的影响

目的探讨贝伐珠单抗联合化疗治疗转移性结直肠癌对患者血清血管内皮生长因子(VEGF)和肿瘤异常蛋白(TAP)水平的影响。方法回顾性选取2019年1月至2020年4月本溪市中心医院收治的86例转移性结直肠癌患者,所有患者均经采用贝伐珠单抗联合化疗治疗6个周期。分别记录各组患者临床特征情况;双夹心酶联免疫法检测患者基线和治疗2个周期、6个周期的血清VEGF、TAP水平;评价临床疗效,分为完全缓解、部分缓解、稳定、进展。结果转移性结直肠癌患者的基线VEGF水平与原发肿瘤部位、分化程度、血清CEA水平、血清CA19-9水平相关(P<0.05),基线TAP水平与年龄、转移部位数目、分化程度、Karnofsky评分相关(P<0.05)。与基线比较,治疗后2个周期、6个周期的VEGF、TAP水平均明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。部分缓解有55例(63.95%),稳定18例(20.93%),进展有13例(15.12%),临床有效率为63.95%,疾病控制率为84.88%。部分缓解、稳定和进展患者的VEGF水平表达比较,差异有统计学意义(P<0.05),而TAP水平表达差异无统计学意义(P>0.05)。VEGF对临床有效率的敏感度为85.50%,特异度为61.30%,准确度为76.60%,对疾病控制率分别为79.50%、92.30%、81.40%;TAP对临床有效率分别为52.70%、58.10%、54.70%,对疾病控制率分别为50.70%、61.50%、52.30%;VEGF+TAP对临床有效率分别为61.80%、87.10%、70.90%,对疾病控制率分别为74.00%、69.20%、73.30%。结论贝伐珠单抗联合化疗治疗转移性结直肠癌可显著降低患者血清中VEGF、TAP水平,其中血清VEGF对贝伐珠单抗联合化疗治疗转移性结直肠癌的疗效的预测价值尚可,而TAP的预测价值不佳。

竹节参提取物对慢性酒精性肝损伤模型小鼠血清生化指标及炎症因子水平的影响

目的观察竹节参水、醇提取物对慢性酒精性肝损伤模型小鼠血生化指标及炎症因子水平的干预作用。方法 ICR小鼠40只,随机分为正常组、模型组、易善复组、竹节参醇提取物(PJEE)组、竹节参水提取物(PJWE)组,各8只。采用灌胃一定浓度乙醇溶液复制慢性酒精性肝损伤小鼠模型,同时予以竹节参水、醇提取物(1.35g/kg)干预;与第2、4、6周全自动生化仪检测血清肝功能指标、血脂水平;第4、6周酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清白介素-6(IL-6)、白介素-1β(IL-1β)水平。结果与正常组比较,自第2周起,模型组小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性随着造模时间的延长而显著增加(P<0.05,P<0.01),血清总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平随着造模时间的延长而呈逐渐降低趋势(P<0.05),第4、6周血清IL-6、IL-1β水平均显著上升(P<0.01)。与模型组比较,竹节参醇提取物组血清ALT、AST、TG显著降低(P<0.05),竹节参水、醇提取物组血清IL-6、IL-1β水平组均显著降低(P<0.01),其中第4周以水提取物较为显著,第6周以醇提取物较为明显。结论竹节参水、醇提取物均具有一定的抗慢性酒精性肝损伤作用,但在作用侧重点、作用时间和强度间存在一定差异。

二氢青蒿素对体外培养胃癌细胞株BGC-823周期蛋白D1 P16蛋白表达的影响

目的探讨二氢青蒿素(DHA)对人胃癌细胞BGC-823增殖的抑制作用及周期蛋白D1、P16蛋白表达的影响。方法以25~100μmol/L DHA干预人胃癌细胞株BGC-823细胞后通过四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定细胞增殖率,吖啶橙-溴化乙定(AO-EB)染色观察细胞凋亡情况、流式细胞仪检测细胞凋亡周期、蛋白质印迹法检测细胞中周期蛋白D1、P16蛋白表达情况。结果DHA对人胃癌细胞具有时间、浓度依赖性抑制作用;且浓度依赖性阻滞细胞周期,使G0/G1期细胞增多,S期细胞减少(P<0.05)。DHA浓度依赖性下调cyclin D1蛋白,上调p16蛋白的表达(P<0.05)。结论DHA通过下调cyclin D1蛋白,上调p16蛋白的表达,调节细胞周期调控通路,阻滞细胞于G0/G1期,有效抑制人胃癌细胞的增殖。

环糊精改性膜的制备及其吸附胆红素的应用

首先通过高碘酸盐氧化反应制备氧化环糊精,再通过希夫碱反应将其固定在醋酸纤维素/聚乙烯基亚胺共混亲和膜(CA/PEI膜)上,制备出一种吸附胆红素的环糊精(CD)改性CA/PEI膜(CA/PEI-CD膜).通过XPS、SEM、机械性能等测试,探究了改性前后膜表面元素组成、膜结构和膜拉伸强度等的变化,并对CA/PEI-CD膜进行吸附胆红素的应用研究,考察胆红素初始浓度以及血清中白蛋白含量对改性膜吸附量的影响.结果表明,环糊精成功固载,随着胆红素初始浓度的增加,CA/PEI-CD膜的吸附量呈上升趋势,当胆红素初始浓度为0.35 mmol/L时,最大吸附量可以达到80.4μmol/(g膜).但是在真实血清中,因白蛋白以及其他成分的干扰,其胆红素吸附量降低.

经鼻型肠梗阻导管联合通腑清肠汤保留灌肠治疗粘连性肠梗阻的临床研究

粘连性肠梗是最常见的一种类型,约占所有肠梗阻的40%-60%,其中80%的病例为手术后粘连所致[1]。大量研究已证实经鼻型肠梗阻导管减压对于肠梗阻尤其是粘连性梗阻的疗效显著,肯定了肠梗阻导管的方法优势[2]。但是经鼻型肠梗阻在临床应用中成功率维持在70%-90%,仍有较多患者得不到有效救治。因此,本次研究尝试在经鼻型肠梗阻导管的基础上联合使用通腑清肠汤保留灌肠治疗粘连性肠梗阻,

清热化湿通腑汤治疗急性胰腺炎的临床观察

急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)是消化系统常见急症,其发病主要是因多种原因引起的胰酶异常激活,导致胰腺受胰蛋白酶消化而产生的一系列水肿、充血及坏死等胰腺被自身消化的病理过程[1],其发病急、临床症状重,常表现为不同程度的恶心、呕吐、发热等,部分患者合并胰腺出血坏死,容易诱发腹腔感染、水电解质紊乱、休克,发展成为重症急性胰腺炎,而引发全身炎症反应,严重威胁到患者的生命安全[2]。针对于该病的临床治疗,西医常给予胃肠减压、抑酸、抑胰液分泌、纠正水电解质紊乱、营养支持等对症治疗为主,急性重症胰腺炎常以外科治疗为主[3],对病情的缓解起到了一定的作用,但在治疗的同时又存在一定的局限性及药物的副作用[4]。中医中药作为AP的有效治疗方法之一,临床应用较广。笔者运用自拟清热化湿通腑汤辅助治疗86例轻、中型急性胰腺炎,疗效显著,现报道如下。

不同抗溃疡药物对非甾体类抗炎药相关性溃疡复发的预防效果比较

目的比较不同抗溃疡药物对非甾体类抗炎药(NSAIDs)相关性溃疡复发的预防效果。方法选取2015年12月至201 7年10月因服用小剂量阿司匹林致上消化道出血,治疗后溃疡愈合的患者90例,按入院先后顺序分为法莫替丁组28例,瑞巴派特组32例,埃索美拉唑组30例,分别予相应药物预防NSAIDs相关性溃疡复发,疗程均为9个月。结果法莫替丁组上消化道出血复发率(5 3. 6%)、胃黏膜损害发生率(6 4. 3%)均显著高于瑞巴派特组(21.9%、28.1%)和埃索美拉唑组(13.3%、26.7%);不良反应发生率埃索美拉唑组(36.7%)高于法莫替丁组(10.7%)和瑞巴派特组(12.5%);组间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论瑞巴派特在预防NSAIDs相关性溃疡胃黏膜损害的复发和再出血方面与埃索美拉唑相当,均优于法莫替丁,且不良反应低于埃索美拉唑,可用瑞巴派特替代埃索美拉唑预防NSAIDs相关性胃黏膜损害的发生。

比较氯沙坦与普萘洛尔对肝硬化门静脉高压患者血流动力学的影响

目的对比血管紧张素Ⅱ受体拮抗药氯沙坦与普萘洛尔对肝硬化门静脉高压的效果。方法 90例肝硬化门静脉高压症患者按入院顺序分为三组,每组30例。A组予氯沙坦口服;B组予普萘洛尔口服;C组予天晴甘美普通护肝降酶治疗。三组治疗3个月后评价疗效。观察肝血流动力学指标:门静脉内径(DPV)、脾静脉内径(DSV)、门静脉血流速度(VPV)、脾静脉血流速度(VSV),治疗前后肝功能、肾功能及血清透明质酸(HA)、层黏蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原肽(PCⅢ)。结果治疗后VPV、ALT、TBIL、ALB、BUN、Cr三组间两两比较,A、B两组DSV、VSV比较,B、C两组LN、PCⅢ比较,差异均无统计学意义;DSV值B组高于A组,差异有统计学意义外;C组DPV、DSV高于其他两组,C组HA高于B组,A组LN、PCⅢ均明显低于其他两组,差异均有统计学意义。结论氯沙坦降低门脉压力作用与普萘洛尔接近,但是前者能显著改善肝纤维化指标,且对肝肾功能无影响。

TNF-α基因多态性与幽门螺杆菌感染消化不良的关联

目的研究肿瘤坏死因子-α(TNF-α)基因多态性与幽门螺杆菌(Hp)感染消化不良的关联。方法选取2020年3月-2021年3月杭州市富阳区第一人民医院收治的Hp感染消化不良患者110例作为研究组,选取同期于医院健康体检的健康志愿者80名作为对照组;分析TNF-α基因多态性,研究TNF-α基因多态性与Hp感染消化不良的相关性。结果研究组在rsl800629位点GA基因型、rs361525位点GA基因、rsl800630位点CA基因型分布频率低于对照组,rsl800629位点AA基因型、rs361525位点AA基因型、rsl800630位点AA基因型分布频率高于对照组(P<0.05);研究组rsl800629位点G等位基因、rsl800630位点C等位基因携带率低于对照组(P<0.05);多元Logistic回归显示,rsl800629位点A等位基因、rsl800630位点A等位基因与Hp感染消化不良发病有关(P<0.05);转归不佳组在rsl800629位点GA基因型、rsl800630位点CA基因型分布频率低于转归良好组,rsl800629位点AA基因型、rs361525位点AA基因型、rsl800630位点AA基因型分布频率高于转归良好组(P<0.05);转归不佳组rsl800629位点A等位基因、rsl800630位点A等位基因携带率高于转归良好组(P<0.05);多元Logistic回归显示rsl800629位点A等位基因、rsl800630位点AA基因型、A等位基因与患者疾病转归有关(P<0.05)。结论TNF-α基因多态性与Hp感染消化不良有关,rsl800629位点AA基因型、rs361525位点AA基因型、rsl800630位点AA基因型为影响疾病发生和疾病转归的易感基因。

莪术对胆管结扎致肝纤维化小鼠的影响

目的观察莪术对胆管结扎致肝纤维化小鼠的影响。方法将小鼠随机分成3组:对照组、模型组和实验组,每组15只。模型组和实验组小鼠采用胆管结扎的方法构建肝纤维化模型。术后2周,实验组小鼠予以灌胃莪术水煎剂溶液50 mg·kg-1,对照组和模型组小鼠则予以灌胃等量0. 9%氯化钠,每日1次,共8周。用试剂盒检测小鼠血清中谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、胆红素水平,用蛋白质印迹法检测小鼠肝组织中Gli1、Ptch-1蛋白表达。结果对照组、模型组和实验组小鼠血清GPT分别为(15. 58±2. 37),(1262. 05±220. 19),(612. 89±251. 68) U·L-1;GOT分别为(124. 78±14. 56),(813. 39±310. 39),(174. 06±113. 25) U·L-1;胆红素分别为(6. 24±1. 46),(265. 43±22. 16),(140. 50±33. 19)μmol·L-1;小鼠肝组织中Gli1蛋白相对表达量分别为0. 85±0. 12,1. 56±0. 21,1. 02±0. 06;Ptch-1蛋白相对表达量分别为0. 79±0. 24,1. 63±0. 21,0. 75±0. 11;对照组和实验组分别与模型组比较,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。结论莪术可下调Gli1、Ptch-1蛋白表达,降低胆管结扎诱导的肝纤维化小鼠的炎症反应。