中药炮制“炭药止血”理论的现代研究进展

炭药在中医临床上常用于治疗各种出血性疾病,中药炮制“炭药止血”理论在炭药的选用中占有重要地位。目前有关“炭药止血”理论的物质基础研究尚不充分,对中药炒炭后的止血效果也存有争议。本文从止血物质基础、药效学、止血机制3个方面对该理论研究进展进行归纳和总结,并对止血物质基础研究中的新思路“纳米类成分”进行探讨,以期为“炭药止血”理论的深入研究提供参考,为中医临床合理选用炭药提供依据。

半夏曲的炮制历史沿革考据

半夏曲药用历史悠久,自宋代首载半夏制曲开始,其炮制工艺经过继承与发展,一直沿用至今。历版《中国药典》均未收录半夏曲,各地区半夏曲的炮制工艺和质控标准不统一,其临床用药安全性、有效性难以得到保证。本文通过查阅医书古籍及文献资料,对半夏曲的炮制历史沿革进行总结,对全国各地区中药饮片炮制规范中半夏曲的炮制方法及炮制品规进行归纳,以期为半夏曲炮制工艺和质量标准研究提供历史依据和现实参考。

中药质量标志物(Q-Marker)的科学计量分析

目的中药质量标志物(quality marker,Q-Marker)的确定是完善《中国药典》、促进中医药产业健康发展的关键内容,是中医药走向国际化和现代化需要迈出的重要一步,对Q-Marker的研究现状进行充分认识很有必要。方法采用科学计量分析方法,通过CNKI和Web of Science数据库检索中药Q-Marker相关文献,从论文的整体产出概况、研究国家和机构、研究热点及研究趋势等方面,借助VOSviewer、CiteSpace软件绘制可视化知识图谱。结果共纳入1030篇中、英文文献,分析可知中药Q-Marker研究正处于快速发展阶段,概念提出人刘昌孝院士的发文量最多,该研究领域在中药质量控制、药效物质基础、炮制机制研究、中药药理与安全性评价、中药资源种植等方向已取得大量研究成果。结论中药Q-Marker正处于研究的上升阶段,研究领域内各机构和团队之间的交流合作有待加强。通过全面、科学地总结中药Q-Marker研究领域的发展进程、研究近况,并探讨其研究热点趋势,可为中药Q-Marker的深入研究提供参考依据。

乳香炮制研究进展

乳香自唐代开始使用不同的炮制方法,在《中国药典》和全国大部分省市的中药饮片炮制规范中均有收载。本文就近年来有关乳香炮制工艺、炮制前后化学成分和药理作用变化方面的研究进行总结,以期为今后乳香炮制研究提供参考,为揭示乳香炮制原理和进行质量控制提供一定理论依据。

高效液相色谱法同时测定金荞麦中4种指标成分含量

目的建立同时测定金荞麦中儿茶素、原花青素B_2、表儿茶素和表儿茶素没食子酸酯的HPLC方法。方法采用TSK ODS-100V色谱柱(5μm,4.6 mm×250 mm)进行分离;流动相为乙腈-0.2%磷酸水溶液,流速为0.8 mL·min^(-1),梯度洗脱;检测波长280 nm;柱温为35℃;进样量为10μL。结果儿茶素、原花青素B_2、表儿茶素和表儿茶素没食子酸酯的质量浓度分别在15.55～194.40μg·mL^(-1)(r=0.9998)、15.36～192.00μg·mL^(-1)(r=0.9996)、15.95～199.40μg·mL^(-1)(r=0.9997)和15.50～193.80μg·mL^(-1)(r=0.9992)与峰面积呈现良好的线性关系,平均加样回收率分别为98.6%(RSD=1.4%)、98.3%(RSD=1.4%)、98.6%(RSD=1.2%)和97.0%(RSD=1.5%)。结论该方法简便快速,测定结果准确可靠,可用于金荞麦药材的质量控制。

当归四逆汤化学成分、药理作用和临床应用的研究进展及质量标志物(Q-Marker)的预测分析

当归四逆汤(Danggui Sini Decoction,DSD)是治疗血虚寒厥证的代表方剂,具有温经散寒、养血通脉等功效,临床多用于治疗冠心病、心绞痛、雷诺氏征、糖尿病周围神经病变、痛经、膝骨关节炎等疾病。在对DSD化学成分、药理作用和临床应用研究进展进行综述的基础上,依据中药质量标志物(quality marker,Q-Marker)“五原则”对其Q-Marker进行预测分析。结果提示阿魏酸、藁本内酯、肉桂酸、桂皮醛、芍药苷、芍药内酯苷、甘草苷、甘草酸和细辛脂素可作为DSD的Q-Marker,为DSD及其相关制剂的质量控制等后续研究提供参考。

经典名方桂枝茯苓方对子宫内膜间质细胞TNF-α表达的谱效关系及分子对接研究

目的:探讨经典名方桂枝茯苓方(Guizhi Fuling Prescription, GFP)物质组分对人子宫内膜间质细胞(hEM15A细胞)肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达的谱效关系,解析GFP中与抗炎作用相关的化合物组成与作用机制。方法:利用HPLC法建立GFP样品指纹图谱;采用酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测GFP样品对hEM15A细胞TNF-α表达水平的变化;选用皮尔逊相关性分析(Pearson’s r)、灰色关联分析(grey relation analysis, GRA)和正交偏最小二乘分析(orthogonal partial least square, OPLS)法建立GFP抗炎活性谱效关系数学模型;采用高效液相色谱与电喷雾四极杆飞行时间质谱仪串联(HPLC-ESI-Q-TOF-MS)技术对与抗炎作用呈显著正相关的色谱峰进行鉴定,并通过分子对接技术验证GFP活性成分的抗炎作用。结果:综合3种谱效关系数学模型共筛选出7个色谱峰对抑制hEM15A细胞TNF-α表达贡献较大,成分鉴定为氧化芍药苷、苦杏仁苷、芍药内酯苷、芍药苷、四没食子酰葡萄糖、没食子酸乙酯、没食子酰芍药苷。分子对接结果显示,7种成分可能通过作用于IκB磷酸化激酶β(inhibitor Kappa B Kinaseβ, IKKβ)、细胞外信号调节激酶(extracellular regulated protein kinases, ERK)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor, TNF)等靶点,抑制TNF-α表达,发挥抗炎作用。结论:通过谱效关系研究筛选的氧化芍药苷、苦杏仁苷、芍药内酯苷、芍药苷、四没食子酰葡萄糖、没食子酸乙酯、没食子酰芍药苷7种成分是GFP抑制hEM15A细胞TNF-α表达、发挥抗炎作用的潜在活性成分,为GFP治疗子宫内膜异位症机制研究奠定基础,同时为GFP质量控制和临床应用提供参考。

基于谱-效相关及网络药理学的西洋参不同部位增强免疫药效物质基础研究和作用靶点分析

目的:探究不同部位(主根、须根、茎、叶、花、芦头)西洋参皂苷类成分的差异及增强免疫作用,明确西洋参增强免疫的药效物质基础及作用靶点。方法:利用高效液相色谱技术检测西洋参不同部位的皂苷类成分;通过检测斑马鱼尾部中性粒细胞数目考察西洋参增强免疫作用;采用偏最小二乘相关回归分析法,确定药效物质;基于网络药理学,探究西洋参皂苷类成分增强免疫作用的核心靶点及作用通路。结果:西洋参不同部位人参皂苷含量差异大,总皂苷含量排序为:花>叶>主根>须根>芦头>茎;免疫增强实验显示,西洋参不同部位提取物均可增加中性粒细胞数目,其中除茎、芦头外均有显著免疫增强作用(P<0.01);偏最小二乘相关分析显示,西洋参中人参皂苷Re、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb2相关性较强,VIP值大于1;网络药理学分析得出西洋参增强免疫作用核心靶点为VEGFA、JUN、FGF2等,共有靶点涉及对刺激的反应、生物调节、细胞过程的调控等生物过程,并通过PI3K-Akt、Rap1、MAPK等信号通路发挥作用。结论:西洋参具有增强免疫作用,并且不同部位皂苷类成分含量显著不同,其增强免疫作用与皂苷类成分含量呈正相关。同时该研究借助中药谱效学及网络药理学初步阐释了西洋参皂苷类成分增强免疫作用的药效物质基础和作用靶点。

天麻中6种天麻素类成分一测多评分析法的建立

目的建立天麻药材中天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷A、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷E 6种天麻素类成分的一测多评测定方法。方法采用Agilent Zorbax SB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈(A)-0.05%磷酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱,0~5 min,2%A;5~20 min,2%~30%A,20~25 min,30%~2%A,检测波长220 nm,体积流量1.0 m L/min,柱温25℃。以天麻素为内参物,分别建立对羟基苯甲醇、巴利森苷A、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷E的相对校正因子,利用该相对校正因子计算其他5种成分的量,同时利用外标法测定天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷A、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷E的量,比较2种测定方法的差异,验证一测多评法的可行性和准确性。结果在线性范围内,天麻素与对羟基苯甲醇、巴利森苷A、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷E的相对校正因子分别为0.663、1.278、1.435、1.389、1.591,在不同实验条件下相对校正因子重现性良好,6种天麻素类成分的计算值与实测值无显著性差异。结论一测多评法测定天麻药材中6种天麻素类成分准确且可行,可用于天麻药材的质量控制。

白花蛇舌草抗炎、抗肿瘤作用研究进展

慢性炎症与肿瘤的发生、发展、侵袭、转移等密切相关,清热解毒中药白花蛇舌草兼具抗炎、抗肿瘤作用,在临床上常用于各种炎症、肿瘤的预防与治疗。白花蛇舌草抗炎机制研究主要涉及NF-κB、MAPK、5-LOX等信号通路,抗肿瘤研究主要为抗肠癌、抗肺癌、抗肝癌、抗乳腺癌、抗胃癌等,机制涉及PI3K/AKT、TGF-β/Smad、MAPK、STAT3等信号通路,并可能通过NF-κB、MAPK、VEGF等途径在“炎-癌”转化过程中发挥重要作用。本文综述白花蛇舌草抗炎、抗肿瘤及干预“炎-癌”转化作用,为其进一步研究提供参考。

天麻清蒸过程中7种化学成分变化规律研究及分析

目的:探讨天麻清蒸过程中7种化学成分的动态变化规律。方法:采用HPLC同时测定天麻生品及清蒸不同时间炮制品中天麻素(GA)、柠檬酸(CA)、对羟基苯甲醇(HA)、巴利森苷A(PA)、巴利森苷B(PB)、巴利森苷C(PC)、巴利森苷E(PE)的含量,从各化合物结构初步推断其可能存在的变化途径,并用SPSS 16.0、SIMCA 13.0软件对不同炮制品进行聚类分析(HCA)和偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)。结果:天麻蒸制60min后各成分含量趋于稳定,在蒸制过程中,PA、PE发生不完全水解,GA、CA、PB含量逐渐增加,HA、PC含量几乎不变,初步推断PA、PE水解可形成GA、CA、PB;HCA分析表明天麻蒸制样品可大致聚成4类;PLS-DA分析可以区分天麻不同蒸制样品,GA和PB对样品区分具有较大的贡献率。结论:蒸制影响天麻中天麻素类成分含量,为揭示天麻的炮制原理与天麻饮片的规范化炮制提供实验依据,为天麻饮片质量标志物(Q-Marker)的研究奠定基础。

基于指纹图谱结合多成分定量分析的视疲宁片质量评价研究

目的:建立视疲宁片(SPN)的HPLC特征指纹图谱,结合聚类分析、主成分分析、多成分定量分析,为其质量评价提供依据。方法:采用Agilent C18柱(250mm×4.60mm,5μm),以流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱(0～15min,20%～25%乙腈,20～25min,25%～45%乙腈,25～30min,45%～95%乙腈);体积流量为1mL·min-1;检测波长为280nm;柱温30℃。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2012年版)对10批SPN指纹图谱进行相似度评价,对共有峰进行聚类分析与主成分析,并对指认的6种指标成分进行定量分析。结果:10批SPN HPLC指纹图谱相似度均大于0.90,共20个共有峰,各峰分离度较好。10批SPN样品聚类分析与主成分分析结果具有一致性,且经主成分分析20个共有峰可综合分为6个主成分,累积方差贡献率为95.91%;通过与对照品比对确定6种指标成分,分别为绿原酸(3号峰)、阿魏酸(5号峰)、橙皮苷(7号峰)、淫羊藿苷(12号峰)、橙黄决明素(18号峰)、大黄酚(20号峰),所建立的成分分析方法可用于6种成分的含量测定。结论:HPLC特征指纹图谱结合模式识别可反映SPN的内在质量,建立的多成分定量分析方法对SPN的质量控制具有参考价值。

熵权法结合星点设计-效应面法优化祛湿清肺方提取工艺及体外抗炎活性评价

目的:优化祛湿清肺方提取工艺,并对祛湿清肺方提取液进行体外抗炎活性评价。方法:以绿原酸、虎杖苷、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、芦荟大黄素、汉黄芩素、大黄素成分含量及得膏率为指标,加水量及提取时间为考察因素,采用熵权法结合星点设计-效应面法对祛湿清肺方提取工艺进行优化。以脂多糖(LPS)诱导大鼠腹腔巨噬细胞(RAW264.7)为炎症模型,酶联免疫吸附法测定白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、一氧化氮(NO)的含量,蛋白质印迹法检测磷酸化NF-κB抑制蛋白激酶(phosphorylated inhibitor of NF-κB kinase, p-IKK)、磷酸化NF-κB p65(phosphorylated NF-κB p65,p-NF-κB p65)、NF-κB抑制蛋白α(inhibitor of NF-κBα,IκBα)蛋白表达水平变化,评价祛湿清肺方提取液抗炎活性。结果:星点设计-效应面法优化所得的最佳提取工艺为加水量13倍,提取2次,每次提取时间105 min。祛湿清肺方提取液能降低IL-6、IL-1β、TNF-α、NO的含量,抑制p-IKK、p-NF-κB p65蛋白表达,促进IκBα蛋白表达,具有较好的体外抗炎活性。结论:熵权法结合星点设计-效应面法优选的祛湿清肺方提取工艺稳定可行,所得提取液具有较好的抗炎活性,为祛湿清肺方开发和现代化研究提供参考奠定基础。

天龙仿生酶解有效部位的最佳脱脂工艺研究

目的考察天龙仿生酶解所得有效部位的最佳脱脂工艺。方法采用固体石蜡法对天龙仿生酶解液进行脱脂处理,以得膏率和有效成分(天龙总小肽)含量为评价指标,以酶解液浓缩程度、固体石蜡用量、脱脂次数、冷藏时间和温度等为影响因素,分别采用单因素试验和正交试验优选最佳脱脂工艺参数。结果所得最佳脱脂工艺参数为:取天龙仿生酶解原液,趁热加入相当天龙生药量40%的固体石蜡,加热并搅拌使完全融化,保持微沸5min,静置冷却至室温,冷藏(2~4℃)6h,滤过,分离石蜡层,加适量水洗涤2次,合并滤液。结论所优选的脱脂工艺稳定可行,除脂效果好,有效成分损失少,有助于后续的制剂成型,可为类似含动物药制剂的脱脂工艺提供参考。